烟草种子霜霉病检疫规程

1、UDC 633.71:632.913B 35 GB/T 156991995 烟草种子霜霉病检疫规程Rules for tobacco seed (blue mold) quarantine 1995-08-28 发布1996-03-01 实施 中华人民共和国国家标准烟草种子霜霉病检疫规程 GB/T 156991995 Rules for tobacco seed (blue mold) quarantine国家质量技术监督局1995-08-28批准1996-03-01 实施1主题内容与适用范围本标准规定了烟草种子检疫对象、程序和方法。本标准适用于各种入境烟草种子的检疫。2术语2.1检疫：为预防

2、危险性烟草病虫害传播蔓延采取的一种措施。2.2烟草霜霉病tobacco blue moldPeronospora tabacina Adam和Peronospora nicotianae Speg，异名Peronospora hyosymi f. Sptabacina.又称蓝霉病，是烟草上一种毁灭性病害。现已蔓延至欧洲、美洲、澳洲，目前我国尚无该病发生，因此做为对外检疫对象。3检疫程序3.1取样对一批种子总件数按比例抽查取样。在取样时，按对角线五点、棋盘式或分层取样，每点取样1020g（旅客携带和国际邮包邮寄的少量烟草种子，取样多少视具体情况而定）。取样要尽量做到有代表性，将取的各点样品均匀抽

3、取平均样品。3.2孢子囊和孢子梗检疫洗涤检验法。利用振荡的方法，使粘附在种子上的分生孢子和分生孢子梗分散到水中。离心机、显微镜、载玻片、振荡器、三角瓶。蒸馏水。取烟种5g，放入三角瓶中，加一定量蒸馏水浸泡0.5h后，再加蒸馏水剧烈振荡5min（也可放在振荡器上振荡）。将洗液注入离心管，以1 000r/min的速度离心5min，倾去大部分上清液，每个离心管再加入少量蒸馏水，使沉淀重悬浮，取悬浮液制片，用400500倍显微镜检查，每个载玻片查10个视野（见图1），每个样品检查510个载玻片，检查有无树枝状孢子囊梗和对生的孢子囊，孢子囊大约（1318）m×16m×29m。3.3卵

4、孢子检验乳酚油透明法。乳酚油加苯胺蓝是真菌标准的浮载剂。苯胺蓝是碱性染料，可染真菌的原生质，而不染细胞壁，因此可以分辨清楚很难看清的真菌孢子。显微镜、烧杯、电炉、水浴锅 苯胺蓝、苯酚、甘油、乳酚油、蒸馏水。取混合样品烟草种子5g，置于烧杯中用乳酚油煮沸1530min，煮至烟草种子透明，但尚不至于消解为止。加苯胺蓝（棉蓝）染色后用乳酚油作浮载剂，然后镜检。每个样品查20个载玻片乳酚油的配方：苯酚结晶（水浴加热溶化）20mL，乳酸20ml，甘油40 mL，蒸馏水20 mL。统计孢子数量时，用血球计数器，观察80个小格，用其平均数×4000 000，就是每毫升悬浮液孢子的数量。3.4种子检

5、验萌芽检验。灭菌锅、温箱、培养皿、滤纸、次氯酸钠、无菌水。取混合样品种子100粒，重复4次。取直径10cm的无菌柏氏培养皿或塑料培养皿4个，每个培养皿放入三层吸足无菌水的吸水纸，将100粒种子均匀排列在吸足水的纸上，盖上培养皿，保持湿度。然后放入1520温箱内培养，经47d观察幼苗上是否有烟草霜霉病菌浸染的迹象。若检查种子内部是否有病菌时，则将种子浸入1%次氯酸钠溶液10min，然后置于无菌滤纸上，培养检查。单皿发病率和平均发病率按式（1）、（2）计算：3.5分离培养检验琼脂培养检验。用适于植物水培的营养盐类2.5g，琼脂14g，蒸馏水100mL。用300mL的大口三角瓶，每瓶盛培养基80mL

6、，用棉塞塞好，消毒后将培养基做成斜面。培养基凝固后，用表面消毒过的种子，在培养基斜面上每瓶加0.01g置于1520下，种子发芽后，观察幼苗是否有烟草霜霉病菌侵染的迹象。3.6隔离试种引种入境之前，引种人应持引种审批单，出口国的检疫证书，贸易合同，向入境的口岸植检机关报检（包括非正规渠道来的种子）。供检材料由引种人（单位）送到隔离检疫圃，交检疫收件人登记。由检疫人员在初检室对送检材料进行初步检查。初检合格，可以进入检疫圃的供检材料，在检疫温室用消毒过的土和盆进行育苗盆栽。在温室内对供检材料在生长期进行检查，对检查和检测情况进行详细登记，根据检测情况作出评定。4检疫检验后的评定及处理4.1入境的烟

7、草种子经检疫未发现被检对象则认为合格。经检疫后认为合格的签发检疫放行通知单，或在货运单上加盖检疫放行章。经严格包装，由专人送中国烟草总公司青州烟草研究所隔离试种检疫。经隔离试种后未检出被检对象的，交送检人（单位）在国内试种。4.2检疫不合格经检疫发现有检疫对象者认为不合格。检疫不合格，发现有检疫对象，而且在抽检烟种中1的比例内有检疫对象，则应在检疫地原地销毁。被检烟种若发现有检疫对象，而且在抽检烟种中1的比例内有检疫对象，则应在检疫地原地销毁。被检烟种中有检疫对象，有以下情况可退回原地，材料较有研究应用价值，抽查烟种检疫对象不超过1。对少量引进有价值材料可用热处理，处理后在检疫温室试种。干热处

8、理方法：干热消毒，事先将种子进行60，23h通风，使种子充分干燥；种子薄摊成2cm以内厚度，用干热消毒器70干热处理2d以上。处理后的种子在检疫温室用无菌土、盆试种，检验有无检疫对象。将繁殖后的种子（应是无菌的）交送检人（单位），可在国内试种。5发放检疫证书入境烟草种子没有发现检疫对象时，签发植物检疫证书附录C（补充件）；经检疫不符合贸易合同规定时，签发检验证书附录D（补充件），说明情况作为对外索赔证件，并制备保存该被检烟种和检疫对象的标本，作为索赔的依据。6检疫报告包括受检日期、货批号、数量及重量。检疫结果：处理意见：检疫员：检疫单位：附加说明：本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会归口。本标准由中国烟草总公司青州烟草研究所负责起草。本标准主要起草人：佟道儒、石金开、蒋予恩、艾树理、刘洪祥。(京)新登字XXX号中 华 人 民 共 和 国国 家 标 准标准名称GB/T XXXXX.XXXXXX*中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街16号中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新