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文档简介
1、、实验原理、实验原理 、方法步骤、方法步骤根尖培养根尖培养装片制作装片制作:解离解离漂洗漂洗染色染色制片制片观察观察:低倍镜观察低倍镜观察 高倍镜观察高倍镜观察 绘图绘图: 实验:观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验:观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 根尖、茎尖的分生区可观察到有丝分裂。根尖、茎尖的分生区可观察到有丝分裂。染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色色根根尖尖的的培培养养培养根尖:培养根尖:应每天应每天换水换水 ( (防止水中缺氧烂根防止水中缺氧烂根) ) 解解 离离取材取材:取生长旺取生长旺盛、带有盛、带有分生区的分生区的根尖根尖,长,长度为根尖
2、度为根尖的的2-3mm2-3mm。解离解离:解离液解离液(15%15%盐酸盐酸95%95%酒精溶液酒精溶液1111);); 时间:时间:室温室温3-53-5分钟,至根尖酥软;分钟,至根尖酥软;目的:目的:使组织细胞分离开,杀死并固定细胞使组织细胞分离开,杀死并固定细胞漂洗漂洗漂洗漂洗:用用清水清水漂洗漂洗10min10min,目的目的是洗去组织中的解是洗去组织中的解 离液,便于染色离液,便于染色( (防止酸碱中和防止酸碱中和) )。染染色色染色染色:染液染液(0.01g/mL0.01g/mL的龙胆紫或的龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸洋的醋酸洋红)红); ;时间时间为为3 35
3、5分钟;分钟;目的目的是使染色体或染色质被碱性是使染色体或染色质被碱性染料染成深色,便于观察。染料染成深色,便于观察。制制片片压片压片:目的目的是使细胞分散开。是使细胞分散开。方法方法(用镊子弄碎(用镊子弄碎根尖,盖上盖玻片,再放上一块载玻片,压片)根尖,盖上盖玻片,再放上一块载玻片,压片)(压片过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细(压片过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细胞未充分分散开而重叠。)胞未充分分散开而重叠。)低倍镜观察:低倍镜观察:找到找到分生区分生区细胞(特点:细细胞(特点:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂)胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂) 高倍镜观察:高倍镜
4、观察:找各时期细胞。可见找各时期细胞。可见处于间处于间期的细胞最多期的细胞最多,中期最少中期最少。不能看到某个细。不能看到某个细胞连续分裂的过程,因细胞在解离时已被杀胞连续分裂的过程,因细胞在解离时已被杀死。死。取生长健壮的小麦根尖,经过解离、漂洗、染色、取生长健壮的小麦根尖,经过解离、漂洗、染色、制片过程,制成临时装片,放在显微镜下观察。欲制片过程,制成临时装片,放在显微镜下观察。欲观察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期观察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期课课 堂堂 练练 习习A A应该选一个处于间期的细胞,持续观应该选一个处于间期的细胞,持续观察它从间期到末期的全过程察它从间期到末期的全过程B B如果在低倍镜下看不到细胞,可改用如果在低倍镜下看不到细胞,可改用高倍物镜继续观察高倍物镜继续观察C C如果在一个视野中不能看全各个时期,如果在一个视野中不能看全各个时期,可移动装片从周
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