六味地黄颗粒中丹皮酚和马钱苷的测定(全面版)资料

1、六味地黄颗粒中丹皮酚和马钱 苷的测定（全面版）资料六味地黄颗粒中丹皮酚和马钱苷的测定一、实验目的与要求1. 了解紫外可见分光光度法和高效液相色谱法在测定中药制剂中成分含 量中的应用 及其优缺点 ；2. 了解六味地黄的组成、性质以及其成分测定的方法；3. 掌握中药制剂含量测定中检测对象的选择原则。二、实验原理1. 处方：熟地黄320 g，酒萸肉160 g，牡丹皮120 g，山药160 g，茯苓120 g，泽 泻120 g。中国药典（2021年版）规定，本品每袋含牡丹皮按丹皮酚（C9H°Q）计, 不得少于7.2 mg,本品每袋含酒萸肉按马钱苷（CHn。）计，不得少于4.8 mg。2. 测

2、定原理六味地黄颗粒由熟地黄、酒萸肉、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻六味中药制 成。其中牡丹皮、酒萸肉是其主要药味。牡丹皮的特征性成分丹皮酚具挥发性， 且在紫外光区有吸收，因此可以采用水蒸气蒸馏提取，紫外可见分光光度法测 定含量，吸光系数法定量。马钱苷 （1oganin） 属环烯醚萜苷类 , 是酒萸肉中的主 要药效成分之一，具有对非持异性免疫功能有增强作用，能促进巨噬细胞吞噬 功能，延缓衰老；有良好的防癌防辐射功效和抗炎、抗菌作用，中国药典（2021年版）规定酒萸肉以其中马钱苷为指标，采用高效液相色谱法测定其含 量。、实验材料、试剂与仪器原料名称规格用量六味地黄颗粒普通市售20包马钱苷对照品5 g (

3、?)50%甲 醇取甲醇63g加水至100ml即得。适量中性氧化铝100200目适量紫外-可见分光光度计，水蒸气蒸馏装置，高效液相色谱仪，具塞锥形瓶, 回流装置，容量瓶，移液管，研钵，柱层析色谱柱。四、实验方法与步骤1. 牡丹皮中丹皮酚的含量测定取六味地黄颗粒10袋，精密称定内容物重量，研细，取约 2 g,精密称量,用水蒸气蒸馏，收集馏出液约450 mL，置500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度。利用紫外-可见分光光度计，在274 nm波长处测定吸光度，按丹皮酚（GH°Q）吸收系Eic*%数为862计算，即得含量（mg/袋）=A1%EicmL 100WA=862 1 100500平均装样

4、量平均装样量100010002酒萸肉中马钱苷的含量测定（1） 色谱条件与系统适用性实验以十八烷基硅基键合硅胶为填充剂；以 乙腈-水（15: 85）为流动相；柱温为40 C；检测波长为236 nm。理论板数按 马钱苷峰计算，应不低于4000。（2） 对照品溶液的配制取马钱苷对照品适量，精密称量，用50刖醇配制成每1 mL含20俱的溶液。（3） 供试照品溶液的配制取装量差异项下的本品内容物适量，研细，取约1 g，精密称量，置具塞锥形瓶中，精密加入 50和醇50 mL，密塞，称定重 量，加热回流1 h。放冷，再称定重量，用50和醇补足减少的重量，摇匀，过 滤。精密量取续滤液10 mL加在中性氧化铝柱

5、（100200 目, 4 g,内径为1 cm） 上，用40和醇50 mL洗脱，收集流出液及洗脱液，蒸干，残渣用 50%甲醇适量 使溶解，并转移至10 mL容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取 续 滤液，即得。（4）测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10卩L，进样，测定。 根据对照品、供试品的峰面积，计算马钱苷的含量。本品每袋含酒萸肉按马钱 苷（CHhOo）计，不得少于4.8 mg。注意事项：1. 水蒸气蒸馏过程中要时刻注意安全管中水位的变化。2. 中性氧化铝柱的填充要均匀。3. 采用外标测定含量时，应严格定量操作，且需要平衡 3次以上的操作。 思考题1. 中成药含量测定

6、中检测对象的选择原则有哪些？本品为什么选择丹皮 酚和马钱苷进行含量测定？2. 六味地黄颗粒的鉴别都采用了什么方法？需要检查哪些项目？3. 中药含量测定常用的方法有哪些？高效液相色谱法具有哪些优点？第 32 卷 增 1岩石力学与工程学报 V ol.32 Supp.12021 年 1 月 Chinese Journal of Rock Mechanics and Engineering Jan .,2021收稿日期：2021 -2 27;修回日期：2021 -)3-9项目: 自然科学 资助项目 (51279002,50978022;中央高校基本科研业务费专项资金 资助项目 (2021YJS047粒

7、径和渗流速度对多孔介质中悬浮颗粒迁移和沉积特性的耦合影响陈星欣 ,白 冰 ,于 涛,郭兰杰(北京交通大学 土木建筑工程学院 ,北京 100044摘要 ：关于粒径和渗流速度的研究对更好地描述悬浮颗粒的迁移和沉积过程有着重要的意 义。在不同的粒径和渗流速度条件下进行悬浮颗粒的室内土柱试验,对比分析不同条件下穿透曲线的变化规律。试验很好地克服了悬浮颗粒形状和化学因素等对试验结果的影响。试验结果表 明 ,对于粒径相同的悬浮颗粒来说,流出液中悬浮颗粒的浓度峰值随渗流速度增大而增大,相应的沉积颗粒却随之减小；并且,渗流速度存在一个临界值(0.173 cm/s,大于该临界值，渗流速度的变化对悬浮颗粒的迁移特

8、性的影响很小 。其次 ,渗流速度相同时 ,流出液中悬浮颗粒的浓度峰值随粒径 增大而减小 ,相应的沉积颗粒却随之增大;渗流速度越小 ,粒径对筛滤作用的影响越明显 。 关键词 ：土力学 ;悬浮颗粒 ;多孔介质 ;筛滤;水动力 ;颗粒粒径中图分类号 ：TU 43 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000-6915(2021 增 1 -2840 -06COUPLED EFFECTS OF PARTICLE SIZE AND FLOW RATE ON CHARACTERISTICS OF PARTICLE TRANSPORTA TION ANDDEPOSITION IN POROUS MEDIACHEN

9、Xingxin ,BAI Bing ,YU Tao ,GUO Lanjie(School of Civil Engineering ,Beijing Jiaotong University ,Beijing 100044,ChinaAbstract :Particle size and flow rate play an important role in particle transportation and deposition in porous media. Different suspended particles were studied under different flow

10、rates in soil columns tests ,and the corresponding breakthrough curves were analyzed. The effects of particle shape and chemical factors on test results were excluded from the tests. Test results show that the peak concentration of effluent increases and the quantity of deposition particle decreases

11、 with the increasing flow rate for the same particle size. However ,the deposition particle decreases with the increasing flow rate. There exists a critical flow rate of 0.173 cm/s ,and the effect of flow rate on particle transportation can be negligible when the flow rate is larger than the critica

12、l value. On the other hand ,the peak concentration of effluent decreases and deposition increases with the increasing particle size for the same flow rate. Furthermore ,the effect of particle size on particle straining is obvious at low flow rate. Key words :soil mechanics ;suspended particle ;porou

13、s media ;straining ;hydrodynamic force ;particle size1 引 言多孔介质中悬浮颗粒迁移特性的研究在地下污染物扩散、核废料处置、石油开采、地下水回灌和水工结构的内部侵蚀破坏等方面有很重 要的研究意义 1-4 。过去人们认为 ,在地下渗流环境中污染物只能通过液体和气体进行传输,近几十年的研究发现第 32 卷增 1 陈星欣等 :粒径和渗流速度对多孔介质中悬浮颗粒迁移和沉积特性的耦合影 响? 2841 ?污染物也可吸附在细小颗粒上随水流进行流动。地下环境中大量赋存的黏土矿物、氧化物和腐殖质等细小颗粒（直径1 g由于其特殊的性质（比表面积大、吸附特性强

14、、对化学和物理环境敏感等引起了学术界广泛的关注2-4 。细小颗粒对污染物有强烈的吸附作用,并且可以随水流进行流动 ,从而加速了污染物的扩散 2-4 。另外 ,大量的调查 5-7表明 ,地下水中细小颗粒能增强 放射性元素的迁移。N. Massei等6-7的研究表明，直径大于1 m的悬浮颗粒同样能作为污染物 的载体在污染物扩散过程中发挥重要的作用。因此 ,对悬浮颗粒迁移特性的研究有很重要的学术 价值和应用前景。关于化学因素对多孔介质中悬浮颗粒的释放、迁移和沉积机制的影响已经做了较透彻的研 究，但物理因素对悬浮颗粒的影响机制还不是很明确8-10 。其中，筛滤作用是影响多孔介质中悬浮颗粒的迁移和沉积的

15、重要机制。筛滤是指孔隙中的悬浮颗粒由于其粒径较大而不能从较小的 孔隙喉道中流出。 X. Q. Li 等11-12研究表明 ，筛滤作用主要受悬浮颗粒和介质的粒径大小、介 质表面的粗糙程度、悬浮颗粒的形状、水动力以及水中化学成分等因素的影响。目前，关于筛滤作用的研究主要有 :S. A.Bradford 等13认为悬浮颗粒的筛滤作用与悬浮颗粒以及孔隙大小的分 布情况有关 ，当颗粒粒径远小于孔隙直径时 ，筛滤作用对颗粒滞留的影响变弱，吸附作用的影响变强;S. P. Xu等14通过试验证实了颗粒和介质材料的粒径对筛滤作用的影响，颗粒粒径和介质粒径的比值的临界值为0.008,当该比值小于0.008时，可以

16、忽略筛滤作用的影响；A. A. Porubcan和S. P. Xu15通过试验测定了颗粒在非均质介质中的筛滤作用，在非均质的介质中加入细砂可以显著地增强颗粒的筛滤作用。可见，筛滤作用的研究主要集中在悬浮颗粒的粒径大小以及介质本身的不均匀性等方面 ，关于水动力对悬浮颗粒筛滤作用的影响的研究很少。另外 ，在颗粒间的接触点附近或者小的孔隙中的渗流速度很小，容易形成低渗流区域 16-17。 S. A. Bradford 等16-17研究发现 ，大量的悬浮颗粒滞留在低渗流区域，并且这一区域同时受水动力和化学作用的影响。综上所述 ，粒径和水动力是影响悬浮颗粒筛滤作用的重要因素 ，对这些因素的研究能够进一

17、步探究多孔介质中悬浮颗粒的迁移和沉积特性。本试验同时考虑悬浮颗粒粒径和水动力对悬浮 颗粒迁移特性的影响 ，对 4种不同粒径的球形悬浮颗粒在3 种不同的渗流速度下进行室内土柱试验，试图揭示悬浮颗粒粒径和水动力对饱和多孔介质中悬浮颗粒迁移特性的影响机制。试验很好 地克服了颗粒形状和化学因素等对试验结果的影响。2 试验方法2.1 试验装置如图1所示，蠕动泵带动储水箱中的高纯去离子水自上至下地流入试验土柱。土柱上端的流量计精确测定单位时间的流量，通过恒定蠕动泵的转速能保证渗流速度的稳定。悬浮颗粒通过土 柱顶端的注射器注入，每次试验注入30 mL（浓度为0.2 g/L的悬浮颗粒的混合物液体。在土柱下 部

18、的出口处每隔一定时间接取30 mL的流出液，对其浊度进行测试，测试值为某一时刻所收集液体中悬浮颗粒的浊度，本试验采用美国哈希 2 100 N台式浊度仪进行浊度测试。图1中，土柱的内径70 mm，高度300 mm，渗流通过土柱进水口处孔径均匀的筛网均匀地进入整个土柱断面，因此，可以近似认为土柱中流场为均匀一维流场。图1试验装置示意图Fig.1 Sketch of experime ntal device2.2试验步骤本试验悬浮颗粒选用4种不同粒径范围的球形硅微粉,4种硅微粉的球形率均大于95%，因此,在试验中可以忽略颗粒形状的影响。并且，悬浮颗粒的颗粒级配合理，如图2所示。土柱? 2842 ?岩

19、石力学与工程学报2021年一一础汛和。宫产 H dl pri冒一Q.63 UnD卅 t .02 m = £)511 Ul I一丄一"讣出11 t />sn =山口图2悬浮颗粒粒度曲线Fig.2 Grain size curve of suspe nded particles表 1 为球形硅微粉的物理参数 ,4 种硅微粉的密度均为 2.26 g/cm 3, 大于水的密度。并且 ,随 着中位粒径 D 50 的增加 ,硅微粉的比表面积逐渐减小。多孔介质选用洁净无任何杂质的天然石 英砂 ,其中颗粒粒径分布为1.003.50 mm ,级配不良 ,粒径分布比较集中。土柱分10 层

20、填装 ,每层约 174 g 砂 ,每次填装时水面高于试样顶面12 cm , 这样能确保填装的土柱为饱和土柱。同时,对每层捣实相同的次数以保证土柱整体的均匀性。表 1 球形硅微粉物理参数Table 1 Physical parameters of spherical silica中位粒径 D 50/ (jm密度/(g cm -3PH值比表面积/(m 2 kg -11.022.26 5.56.0 2 357.393.40 2.26 5.56.0 835.25 8.31 2.26 5.56.0 355.03 9.632.265.56.0276.17本试验对 4 种不同粒径的悬浮颗粒 (SiO 2 分

21、别进行 3 种不同渗流速度的土柱试验 ,共计 12 次试验。在每次试验时 ,通过注射器注入 30 mL( 浓度为 0.2 g/L 的悬浮物溶液。从每次注射开始 时每隔 38 s (视不同的渗流速度来定接取30 mL 土柱底部流出的水样 ,对每次接取的水样进行浊度测试。最后 ,通过悬浮液浊度和浓度的关系对每一时刻的流出水样中的颗粒浓度随时间的变 化关系进行分析。其中,0.2 g/L的中位粒径为1.02,3.40,8.31,9.63 g的悬浮颗粒所对应的初始浊度分别为 142.0,71.0,42.0,26.6 NTU 。本试验的渗流流量范围为 200600 mL/min , 对应的达西渗流速度是

22、0.0870.260 cm/s 。在 每次试验前 ,采用高纯去离子水对土柱进行渗透,以保证正式试验时水流是稳定流。本试验的悬浮颗粒采用脉冲注入形式,通过注射器产生脉冲 ,每次注入 30 mL 混合物液体。每次注射的持续时间很短 ,可以看成是瞬间的 5-6, 并且忽略脉冲注入对土柱中渗流场的影响。另外 ,本试验中的试 验材料的性质稳定 ,采用的渗流为高纯去离子水,可以忽略化学因素对试验结果的影响。3 试验结果分析3.1 纯水中悬浮颗粒的浓度测试结果悬浮颗粒浓度是指一定体积浑水中所含悬浮颗粒的质量 ,是一种直接指标 。而浑浊度则是一 种光学效应。悬浮颗粒的大小、形状、粒径分布、折射指数等影响光散射

23、性质,致使浑浊度出现差异。由于浊度测量技术的迅速发展 ,J. Pfrannkuche 等18-21已成功通过浊度测量来代替浓度 测量。本试验通过测定一系列已知浓度的悬浮液的浊度来得出分析悬浮颗粒浓度和浊度的关系,图3为4种不同粒径的悬浮颗粒浓度和浊度的关系曲线。图 3 悬浮颗粒浊度和浓度的关系曲线Fig.3 Relationship curves between turbidity and concentrationof suspended particles对图 3分析可知 ,对于 4种不同粒径的悬浮颗粒来说 ,随着浊度的增加 ,其浓度也相应地增大,这主要是由于浊度增加,颗粒的数量随之增加,

24、散射光的强度增大。同时 ,比较不同粒径的悬浮颗粒浓度和浊度的关系曲线可知,粒径越小 ,曲线的斜率越小 ;对于一定浓度的悬浮颗粒来说 ,粒径越小 ,其数量越多 ,对光线的散射也相应较强 , 所以其浊度也较大 。最后,将本次试验结果的标定浓度与浊度观测值进行线性回归分析,其 R 2都可达到 0.9以上,说明两者间确实具有高度相关性,由浊度转换而成浓度的误差很小。可见,本试验 通过对悬浮颗粒浊度的测试来反映其浓度的变化的方法可行。粒径/m m小于某粒径的质量百分比/%浓度/(g L-1浊度/NTU第32卷增1陈星欣等：粒径和渗流速度对多孔介质中悬浮颗粒迁移和沉积特性的耦合影响?2843?3.2渗流速

25、度对悬浮颗粒迁移的影响对4种不同粒径的悬浮颗粒在3种不同的渗流速度下进行试验,4种不同粒径的悬浮颗粒的穿透曲线如图4所示。由于土柱上边界的悬浮颗粒采用脉冲注入形式，所以悬浮颗粒的穿透曲线都类似于正态曲线的形式。随着孔隙体积的增加，在某一特定的孔隙体积处呈现一个明显的浓度峰值（即最大浓度，超过这一特定体积，浓度逐渐减小，最后趋向于 0。孔隙体积是指流过土柱的累 计水量与含水介质中总的孔隙体积之比。一般不以时间t为横轴，因为不同的多孔介质的孔隙体积及流速差异造成试验结果可比性差7。(a D50 =1.02m卩(b D50 =3.40m卩(c D50 =8.31m卩(d D50 =9.63m卩Fig

26、.4 Efflue nt curves of suspe nded particles in图4 4种不同中位粒径的悬浮颗粒的穿透曲线sand withdiffere nt media n diameters由图4可知,对于同一种粒径的悬浮颗粒，渗,4 种不同粒3.3 悬浮颗粒粒径对迁移特性的影响图5为 3种不同渗流速度条件下0.00.51.0 1.52.0浓度/(m g 1孔隙体积浓度/(m g 1孔隙体积浓度/(m g 1孔隙体积0.00.5 1.0 1.5 2.0浓度/(m g -孔隙体积? 2844 ?岩石力学与工程学报2021年(a 0.260 cm/s(b 0.173 cm/s(c

27、 0.087 cm/s图5 3种不同渗流速度下,4种不同粒径的悬浮颗粒穿透曲线 Fig.5 Effluent curves of suspended particles with four differentmedian diameters under different seepage velocities径的悬浮颗粒的迁移特性的试验结果。在同一渗流速度条件下 ,4 种不同粒径的悬浮颗粒穿 透曲线的浓度峰值所对应的孔隙体积大致相等。另外 ,渗流速度相同时 ,悬浮颗粒中位粒径越大 其浓度峰值越小 ,如图 5 所示。本次所用的悬浮颗粒和石英砂都是化学性质稳定的 SiO 2,两者之 间的静电吸附作

28、用可以忽略不计。因此 ,多孔介质中悬浮颗粒的滞留可以近似认为是由于筛滤作 用造成的。悬浮颗粒越大 ,其在孔径相同的多孔介质中的筛滤作用越明显13另外，在渗流速度较大(见图5(a时，不同粒径(如中位粒径D 50 = 3.40,8.31,9.63 m的悬浮颗 粒的穿透曲线大致相同,浓度峰值也差别不大。结果表明,渗流速度较大时 ,介质中的低渗流区域较小,所以相应的筛滤作用也较小 。然而 ,在渗流速度为 0.087 cm/s 时,4种不同粒径的悬浮颗粒的 浓度峰值的差别很明显,如图 5(c 所示。这种现象说明 ,渗流速度较小时 ,筛滤现象是影响多孔介质中悬浮颗粒的滞留的主要因素 ,表现为悬浮颗粒越大

29、,其相应的浓度峰值越小。综上所述 ,在渗流速度逐渐减小的过程中 ,悬浮颗粒的迁移是悬浮颗粒粒径和水动力 2 个因 素此消彼长共同作用的结果。在渗流速度较高时 ,水动力对悬浮颗粒迁移的影响要远大于粒径的 影响 ,此时 ,不同粒径的悬浮颗粒的穿透曲线大致相同;而在渗流速度较低时,粒径的作用占主要地位,悬浮颗粒越大 ,其在多孔介质中的筛滤作用越明显。3.4 渗流速度和粒径对悬浮颗粒沉积特性的影响回收率是指土柱流出液中颗粒的质量占注入的总量的百分比。回收率间接地反映悬浮颗粒 沉积的特性 。通过 Matlab 软件对前述的各个悬浮颗粒穿透曲线进行积分可求得不同粒径和渗流 速度情况下的回收率的值,如图 6

30、 所示。回收率 R 的计算公式 7为0(d /R QC t t m ¥= o(1式中:m为注入的颗粒质量，Q为单位时间的渗流流量,C (t为流出液中悬浮颗粒的浓度。图 6 不同渗流速度下 ,流出液中悬浮颗粒的回收率随中位粒径的变化曲线Fig.6 V ariation curves of recovery rate at the column outlet with afunction of particle median diameter under different seepage velocities从图 6可以看出 ，在同一渗流速度下 ，随着悬浮颗粒中位粒径的增大，其对应的回

31、收率随之减小，此时悬浮颗粒在多孔介质中的沉积量逐渐增多。其浓度/(m g 1孔隙体积浓度(m g L-1孔隙体积浓度 /(m g L -1孔隙体积 回收率 R /% 中位粒径 D 50/m m第 32 卷 增 1 陈星欣等：粒径和渗流速度对多孔介质中悬浮颗粒迁移和沉积特性的耦合影响 ? 2845 ? 次，在同一粒径条件下，渗流速度越大，回收率越 大，对应的沉积量越小。但 是，渗流速度越小 ，回 收率随颗粒粒径的变化范围越大 。例如：在渗流速 度为 0.087 cm/s 时，回收率随着悬浮颗粒中位粒径的变化很明显，回收率的变化范围为30%90%。渗流速度为0.260 cm/s时，回收率的变化范围

32、为80%100%。此时，悬浮颗粒在多孔介质迁移过程中只产生了少量 沉积。 facilitated radionuclide transport in a coupled fracture-matrix systemJ. International Journal of Energy and Environment , 2021, 2(3: 491 -504. MASSEI N , LACROIX M， WANG H Q ， et al. Transport of particulate material and dissolved tracer in a highly permeable po

33、rous medium : comparison of the transfer parametersJ. Journal of Contaminant Hydrology ， 2002， 57(1/2: 21-39. 7 AHFIR N D ， WANG H Q， BENAMAR A ， et al. Transport and deposition of suspended particles in saturated porous media : hydrodynamic effectJ. Hydrogeology Journal ， 2007， 15(4: 659-668. 8 OCH

34、IAI N ， DRAGILA M I ， PARKER J L. Three-Dimensional tracking of colloids at the pore scale using epifluorescence microscopyJ. Vadose Zone Journal ， 2021 ， 9(3: 576-587. 9 FREY J M ， SCHMITZ P ， DUFRECHE J， et al. Particle deposition in porous media: analysis of hydrodynamic and weak inertial effectJ

35、. Transport in porous media ， 1999， 37(1: 25-54. 10 AHFIR N D ， BENAMAR A ， ALEM A ， et al. Influence of internal structure and medium length on transport and deposition of suspended particles: a laboratory studyJ. Transport in Porous Media ， 2021，76(2: 289-307. 11 LI X Q， LIN C L， MILLER J D ， et a

36、l. Role of grain-to grain contactson profiles of retained colloids in porous media in the presence of an energy barrier to depositionJ. Environmental Science and Technology， 2006， 40(12: 3 769-3 774. 12 KELLER A A ， AUSET M. A review of visualization techniques of biocolloid transport processes at t

37、he pore scale under saturated and unsaturated conditionsJ. Advances in Water Resources ，2007 ，30(6/7: 1 392-1 407. 13BRADFORD S A ， YATES S R， BETTAHAR M ， et al. Physical factors affecting the transport and fate of colloids in saturated porous mediaJ. Water Resources Research， 2002， 38(12: 1 327-1

38、338. 14 XU S P， GAO B， SAIERS J E. Straining of colloidal particles in saturated porous mediaJ. Water Resources Research， 2006， 42:W12S16. doi: 1029/2006WR004948. 15 PORUBCAN A A ， XUS P. Colloid straining within saturated heterogeneous porous mediaJ. Water Resources Research ， 2021，45(4: 1 796-1 80

39、6. 16 BRADFORD S A ， TORKZABAN S ， WALKER S L. Coupling ofphysical and chemical mechanisms of colloid straining in saturated porous mediaJ. Water Research， 2007， 41(13: 3 012-3 024. 17 TORKZABAN S ， BRADFORD S A ， WALKER S L. Colloid transport in unsaturated porous media: The role of water content a

40、nd ionic strength on particlestrainingJ. Journal of Contaminant Hydrology96(1/2/3/4 : 113-127. 18 PFANNKUCHE JSCHMIDT A. Determination of suspended particulate matter concentration from turbidity measurements: particle size effects and calibration proceduresJ. Hydrological Processes ， 2003， 17(10: 1

41、 951 -1 963. 19 薛元忠，何 青，王元叶 . OBS 浊度计测量泥沙浓度的方法与实践 研 究J.泥沙研究， 2004,(4：56 -60.(XUE Y ua nzho ng, HE Qi ng , WANG Yua nye. The methodand application OBS in the measurement of sediment concentrationJ. Journal of Sediment Research, 2004,(4： 56-60.(in Chinese 20 JASTRAM J D , ZIPPER C E, ZELAZNY L W , et

42、al.Increasing precision of turbidity-based suspended sediment concentration and load estimatesJ. Journal of Environmental Quality , 2021, 39(4：1 306-1 316. 21 MURILLO J M. Turbidity andsuspended solids in the runoff susceptible of use for the artificial recharge of the deep granular aquifer subjacen

43、t to the town of San Luis de Potos (MexicoJ. Bolet n Geol gicoy Minero , 2021 , 120(2: 169-184. 4 结 论 (1 随着浊度的增大,悬浮颗粒的浓度也相应 地增大。其次,悬浮颗粒的粒 径越小,浓度 -浊度 关系曲线的斜率越小。对于大小和形状一定的悬浮 颗粒来说,通过测试悬 浮颗粒浊度来反映其浓度的 变化能取得较好的结果。 (2 对于同一粒径的悬浮颗粒,渗流速度 越大, 流出液中悬浮颗粒的浓度峰值越大,其浓度峰值所 对应的孔隙体积越大。另外, 0.173 cm/s 是渗流速 度的临界值。当渗流速度大于 0

44、.173 cm/s 时,渗流 速度的变化对悬浮颗粒的 迁移特性的影响很小,反 之亦然。 (3 悬浮颗粒大小是影响其迁移的重要因素,在同一渗流速度条件下,颗粒粒径越大,其浓度峰 值越小。随着渗流速度的减小,粒径对悬浮颗粒的 筛 滤作用的影响逐渐增大 ,表现为 4 种不同粒径的 悬浮颗粒的浓度峰值的差别逐渐明显 。 (4 在 同一渗流速度下 ,随着中位粒径的增大 , 回收率逐渐减小 ,多孔介质中沉积的悬浮颗粒逐渐 增 多。此外,在同一粒径条件下,渗流速度越大, 回收率越大,沉积的悬浮颗粒越少。 参考文 献(References：1 SAIERS J E, HORNBERGER G M. The r

45、ole of colloidal kaolinite in thetransport of cesium through laboratory sand columnsJ. Water Resources Research , 1996, 32(1： 33-41. 2 GROLIMUND D, ELIMELECH M, BORKOVEC M, et al. Transport of in situ mobilized colloidal particles in packed soil columnsJ. Environmental Science and Technology, 1998,

46、32(22： 3 562-3 569. 3 UTSUNOMIYA S , KERSTING A B , EWING R C. Groundwater nanoparticles in the far-field at the Nevada test site： mechanism for radionuclide transportJ.Environmental Science and Technology,2021, 43(5： 1 293-1 298. 4 M?RI A , ALEXANDER WR， GECKEIS H ，et al. The colloid and radionucli

47、de retardation experiment at the Grimsel test site ： influence of bentonite colloids on radionuclide migration in a fractured rockJ. Colloids and SurfacesA : Physicochemical and Engineering Aspects,2003, 217(1/2/3 : 33 Y7. 5 NATARAJAN N,KUMAR G S. Spatial moment analysis of colloid饲料中莱克多巴胺的测定前言本标准是在

48、参阅了国内外文献的基础上，根据我国技术发展水平研究制定的，采用了酶联免疫法、高效液相色 谱-荧光检测法和气相色谱-质谱法。本标准由浙江省农业厅提岀并归口。本标准由浙江省畜产品质量安全检测中心、浙江省疾病预防控制中心负责起草，浙江一星集团饲料有限责任公 司参与起草。本标准主要起草人：陈慧华、吴平谷、应永飞、任玉琴、屈健、周文海、陈勇、浦琴华。饲料中莱克多巴胺的测定1范围本标准规定了以酶联免疫（ELISA ）法、高效液相色谱（HPLC）法和气相色谱质谱（GC - MS ）法检测饲料 中莱克多巴胺的方法，规定 GC MS法为仲裁法。本标准适用于饲料和饲料添加剂中莱克多巴胺的测定。酶联免疫（ELISA

49、 ）法为筛选方法，检测限为0.01mg/kg，高效液相色谱（HPLC ）法和气相色谱质谱（GC MS ）法为定量方法，定量限 HPLC法为0.1mg/kg、GC MS法为0.05mg/kg。线性范围：酶联免疫（ELISA ） 法为，高效液相色谱（HPLC ）法为2.5ng-10ng，气相色谱质谱（GC MS）法为。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不 包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文 件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T

50、6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1饲料采样方法3试样制备按GB/T 14699.1抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取约200g，粉碎至过0.45mm孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中备用。第一法酶联免疫法4原理与方法4.1 原理本测定方法是酶联免疫法中的竞争性测定法，其主要原理是：吸附在孔内的莱克多巴胺与标准或样品中的莱克 多巴胺竞争性地与莱克多巴胺抗体相结合，与标准品或样品相结合的莱克多巴胺抗体被洗涤去除后，只剩下与 微孔内药物相结合的抗体，其再与加入的酶标记的第二抗体相结合，酶底物在酶作用下产生蓝色产物，吸光度 的高低与样品中莱克多巴胺的含量成反比。4.2方法采

51、用莱克多巴胺酶联免疫试剂盒或类似产品，按试剂盒的使用说明操作。5试剂和溶液5.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合GB/T 6682二级水的规定。5.2 PBS缓冲液：用水10倍稀释厂商提供的浓缩 PBS缓冲液。5.3工作洗液：用水20倍稀释厂商提供的浓缩洗液。5.4 乙酸乙酯。5.5 碳酸盐缓冲液：称取 4.3g碳酸钠（Na2CO3?10H2O）, 2.9g碳酸氢钠（NaHC03），加水至1000mL，摇 匀，调节pH值至9.5。5.6 提取液：取10mL甲醇，力口 90mLPBS缓冲液，摇匀。5.7 甲醇。5.8第二抗体工作液：用第二抗体稀释液2500倍稀释第二抗体。

52、6仪器与设备6.1微孔板酶标仪（带450nm滤光片）。6.2振荡器。6.3冷冻离心机。6.4 微量加样器及配套吸头：20卩L,50卩L,100卩L200 gLo6.5冰箱。6.6洗板机。6.7生化培养箱。6.8氮吹仪。6.9 分析天平：感量 0.01g。7测定步骤7.1注意事项不同品牌的试剂盒其操作步骤可能略有差别，具体操作步骤可根据试剂盒使用说明书略作调整。7.2试样处理取3g试样于50mL离心管中，加入 6mL提取液（5.5），上下手摇数次，加入 6mL碳酸盐缓冲液（5.4），再加 入8mL乙酸乙酯（5.3），振荡30min ;以4000rpm的转速离心5min，移取2.0mL上层有机相至

53、另一新试管中， 氮吹至干。加入50gL甲醇（5.6）溶解残余物后，再加入 450gLPBS缓冲液（5.1），即为供试溶液，取 50gL 进行ELISA测定。7.3测试程序根据所测定样品及标准数，计算岀所需微孔条数，将微孔条插入微孔架，标准和样品做两个孔的平行重 复，记录标准和样品的位置。加入50 gL的标准品和处理好的样品到各自的微孔中，标准和样品做两个平行重复。加入100 gL第一抗体溶液到每一个微孔中，在37C孵育30分钟后倒岀孔中的液体，将微孔架倒置在洗水纸上拍打（每轮拍打 3次）以保证完全除去孔中的液体，再加入工作洗液（5.2） 250 gL，重复操作两遍。最后用吸水纸吸干。加入150

54、 gL稀释的酶标记的第二抗体（5.7） 37C孵育30分钟后倒岀孔中的液体，将微孔架倒置在洗水 纸上拍打（每轮拍打 3次）以保证完全除去孔中的液体，再加入工作洗液（5.2） 250gL，重复操作两遍。最后用吸水纸吸干。加入100 gL酶底物液到微孔中，充分混合并在室温孵育5-10min。加入50 gL反应终止液到微孔中，混合后在450nm处测量吸光度值。8结果计算以空白（浓度为0的标准溶液）吸光度值为100%计算，折算岀各标准和样品的相对吸光度值。相对吸光度值（%）=标准的吸光度值（或样品）/空白的吸光度值X100计算出的标准相对吸光度值绘成为一个对应浓度（ng/L）的半对数坐标系统曲线图，校

55、正曲线在200-2000ng/L范围内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度（ng/L）可以从校正曲线上读出。第二法高效液相色谱法9方法原理用2%氨/甲醇溶液提取试样中的莱克多巴胺，经固相萃取柱净化，浓缩后用2%乙酸溶液定容，用高效液相色谱-荧光检测法分离测定。10试剂和溶液10.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合GB/T 6682二级水的规定。10.2 乙腈：色谱纯。10.3 甲醇。10.4乙腈。10.5 乙酸乙酯。10.6 冰醋酸。10.7 无水硫酸钠。10.8戊烷磺酸钠：色谱级。10.9 正己烷。10.10 氨水。10.11 50%乙腈/乙酸乙酯溶液：取 250mL

56、乙腈加乙酸乙酯至 500mL，混匀。10.12 50%甲醇/乙酸乙酯溶液：取 250mL甲醇加乙酸乙酯至 500mL，混匀。10.13 2%乙酸溶液：取 5mL冰醋酸加水至250mL，混匀。10.14 固相萃取柱）：每根柱填料量为 500mg，柱体积5mL。10.15 2%氨/甲醇溶液：取20mL氨水加甲醇至1000mL，混匀。10.16 戊烷磺酸钠溶液：取800mL水，加20mL冰醋酸和0.87g戊烷磺酸钠（C5H11O3SNa?H2O）,混匀。10.17 莱克多巴胺标准溶液10.17.1 莱克多巴胺贮备液（250卩gmL）精密称取莱克多巴胺对照品25mg，置100mL容量瓶中，用甲醇（10.2）溶解并定容至刻度，置-20'C冰箱中，可保存3个月。10.17.2 莱克多巴胺稀释液（5卩g/mL）精密量取1mL莱克多巴胺贮备液（），置50mL棕色容量瓶中，用甲醇（10.2）稀释并定容至刻度，为 莱克多巴胺工作液。10.17.3 莱克