RNA与肿瘤学基本研讨

1、RNA与肿瘤学基本研讨miRNAs能够调节细胞凋亡肿瘤细胞能够打破促凋亡和抗凋亡之间的平衡，从而使细胞能够在不利的环境下生存下来。最近研究表明，miRNAsft肿瘤的发生中也是一种关键的调节因子，在肿瘤形成过程中，肿瘤细胞能够利用miRNAs调节细胞的凋亡。某些miRNAs够抑制抗凋亡基因从而促动肿瘤细胞的凋亡。如miR-15和miR-16,它们能够靶向作用并抑制Bcl-2,通过线粒体途径来促动细胞凋亡，从而抑制肿瘤的发生。miR-29则能够通过调节Mcl-1的表达，从而诱导细胞凋亡。Bo等应用Real-timePCR检测，发现在膀胱癌组织中miR-203的表达降低；应用荧光素酶分析、流式细胞

2、仪和免疫印迹分析，结果显示miR-203直接作用于bcl-w,在体内及体外实验中均降低bcl-w的表达。过表达的miR-203能够促动人膀胱癌细胞的凋亡以及抑制细胞增殖，而miR-203下降则能够促动细胞生长。另外一些miRNASIU能够上调抗凋亡基因，从而减少肿瘤细胞的凋亡。最近研究中，miR-21被认为是细胞凋亡的一个调节因子，它在人类乳腺癌、结肠癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌以及胃癌当中的表达均上调。在MIAPaCa-2胰腺癌细胞中，Dong等发现miR-21能够通过连接到Bcl-2mRNA的3""UTRs上，来上调Bcl-2的表达，从而降低Bax表达，减少细胞凋亡、降低

3、caspase-3的活性，增强细胞增殖水平。抑制胰腺导管腺癌PDACffl胞中miR-21,能够增加肿瘤抑制基因PDCD4程序性死亡因子4）表达，从而降低细胞增殖以及增加细胞死亡。同时，miR-21有可能作为胰腺癌的进展预测和治疗作用的靶点。抑制乳腺肿瘤细胞中miR-21的表达能够增加细胞凋亡以及下调抗凋亡蛋白Bcl-2,从而抑制肿瘤细胞的生长。在肝癌中，miR-21的上调能够减少细胞死亡、促动血管生成和侵袭。研究显示miR-21的过表达能够使得肿瘤细胞更容易生存，这也有可能是肿瘤细胞逃避凋亡的一个重要机制。在正常脑组织中，miR-10b不表达，而在神经胶质瘤中显著上调。Gabriely等将m

4、iR-10b抑制后，能够增强Bcl2L11/Bim、TFAP2C/AP-2gammaCDKN1A/P21CDKN2A/pl6勺表达，从而通过细胞周期阻滞和细胞凋亡来减少胶质瘤细胞的生长。在小鼠模型中，抑制miR-10b则能够显著减少肿瘤的生长。今后miR-10b可能会作为治疗脑胶质瘤新的靶点。Li等发现在宫颈鳞状细胞癌细胞中，将miR-886-5p过表达后，可下调促凋亡蛋白Bax的表达，从而减少细胞凋亡和促动细胞增殖。而将miR-886-5p敲除后，则可增加Bax蛋白和宫颈癌细胞的凋亡。在膀胱癌细胞株和头颈部鳞状细胞癌细胞系HSC3SAS中，车专染miR-133a能够抑制GSTP1（谷胱甘肽S

5、-转移酶P1）mRNA口蛋白的表达，荧光素酶实验显示miR-133a直接调节GSTP1而沉默GSTP侧能够显著降低细胞增殖，并且细胞凋亡率与si-GSTP1转染正相关。miRNAs能够调节血管生成血管的生成是肿瘤细胞生存的关键因素之一。为了生长，肿瘤需要激活静态内皮细胞，形成有功能的血管网络，这个过程也被称为“血管生成”。不过，促动病理性血管生成的分子机制尚未完全清楚。在血管生成中，一些特殊的miRNAs能够影响内皮细胞的功能以及血管生成，其中一部分miRNAs够阻止血管生成，而另一部分miRNAsIU能够促动血管生成。miR-221和miR-222,能够通过作用于干细胞因子受体c-Kit以及

6、间接调控一氧化氮合酶的表达，从而抑制内皮细胞增殖、迁移和血管生成。对膀胱癌原位病变的miRNA盼析显示，当miR-18a、miR-19a过表达及miR-107下调时，促动了血管生成。miR-132在肿瘤血管内皮细胞里高表达，它能够靶向作用于p120RasGAP从而起到促动血管生长的作用。let7-f能够通过调节血小板反应蛋白-1从而促动血管生成，而miR-130a则能够反向调节抗血管生成因子GAX和HOXA5促动血管生成。Liu等应用鸡胚绒毛尿囊膜方法来分析肿瘤血管生成，发现miR-21作用于PTEN导致激活AKT和ERK1/2信号通路，增强HIF-1%和VEGF的表达，从而诱导肿瘤血管生成。

7、Fang等发现，当过表达miR-93的U87细胞与内皮细胞共培养时，它们支持内皮细胞的扩散、生长、迁移和血管形成。体内实验显示增加miR-93表达能够诱导血管生成，使血管高密度延伸到肿瘤组织中，从而促动细胞生长、加快肿瘤成长。通过功能获得性/缺失性研究，显示miR-93通过作用于整合素-(38来促动肿瘤生长和血管生成，抑制miR-93可能会成为抑制血管生成和肿瘤生长的办法。miRNAs能够调节肿瘤的免疫反应当前研究显示，肿瘤细胞在经历了各种变化后，获得了主动下调抗肿瘤免疫反应和逃避免疫监视的水平。不过，对于肿瘤细胞逃避免疫系统攻击的复杂机制，人们却了解甚微。在免疫系统中，某些miRNASW表达

8、具有阶段特异性，这表明了它们可能参与免疫调节。最近的研究显示，miRNA坏但能够调节适合性免疫反应，而且在肿瘤的免疫调节中也起重要的作用。为了探索miRNAs人类的CD8+既田胞分化中的潜在作用，Salaun等实行了CD8+T细胞分化过程中miRNA表达谱的检测。发现与幼稚细胞相比，当分化为效应细胞时细胞中miR-21和miR-155上调，而miR-17-92簇的表达则降低。哺乳动物免疫系统里，miR-155在具体分化进程的控制中起重要作用，特别是调节T辅助细胞的分化。miR-155能够调节某些具有正常免疫功能的基因，如IL-4、CCL5等。在人类的各种B细胞淋巴瘤中，miR-155也已被证明

9、是高表达的。在肿瘤的发生中，很多病毒编码的miRNAtil参与了宿主和病毒的相互作用。有报道表明，SV40编码两个病毒miRNA针对于该病毒T抗原并导致其被切割，从而导致正常猿猴的肾脏感染，以及啮齿动物的肿瘤发生。miRNAs能够调节肿瘤的侵袭和转移肿瘤的侵袭和转移是导致肿瘤发病率和死亡率最常见的原因，具包含了一系列复杂的过程。所有的过程由多重因素调节，并且必须使得转移性肿瘤能够在新的微环境下生长。现有的证据显示，miRNA劭、调了一些复杂的基因表达程序，并在肿瘤的侵袭和转移中起重要的作用。Chen等通过对食道鳞状细胞癌的全面miRNAg达谱检测发现，miR-92a在肿瘤组织中高表达。在全部观

10、察的107例食道鳞状细胞癌病人中，miR-92a上调和淋巴结转移状态显著相关。另外，miR-92a的上调和食道鳞状细胞癌病人预后差也相关联，并且可能作为一个独立的预后相关因素。体外实验显示miR-92a调节食道鳞状细胞癌细胞的侵袭和转移，而不调节细胞的凋亡和增殖。进一步实验发现，miR-92a通过抑制CDH俵达，从而促动食道鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭。在小鼠黑色素瘤细胞中，转染了let-7b的B16-F10细胞的入侵及迁移的水平显著减小，并且减少了肺转移的几率。Chang等发现，在结肠癌和胃癌中，miR-203的表达和肿瘤大小、肉眼可视的类型及PTstage相关，显示miR-203与结肠癌、胃

11、癌的扩散和侵袭相关。异位表达miR-137能够降低cdc42mRN厢蛋白表达水平，诱导细胞G1期阻滞、抑制细胞增殖，并且阻止结肠癌细胞侵袭。miR-10b在转移性乳腺癌细胞中高表达，它能够抑制HOXD10I白的合成，增加促转移蛋白RhoC的表达，从而调节肿瘤的侵袭和转移。另外，miR-21已被证明能够通过抑制PTENPDCD4TPM伟口Maspin的表达，来促动肿瘤形成和肿瘤转移。而miR-373和miR-520c也能够通过下调转移抑制因子CD44勺途径，参与肿瘤侵袭和转移的调节。表皮生长因子受体(EGFR及人表皮生长因子受体-2(HER2的异常表达是很多人类肿瘤的特征，并且和疾病发展、治疗耐

12、受力、预后较差相关。Giles等发现在胶质细胞瘤和前列腺癌细胞系中，miR-7和miR-331-3p直接调节EGF序口HER2勺表达，从而减少Akt活性，调节肿瘤细胞扩散、侵袭、血管生成及凋亡耐受。在MCF-环口MDA-MB-23善L腺癌细胞中，用Real-timePCR和免疫印迹法检测miR-17-5p和HBP1的表达水平，结果显示，在高侵袭度性的MDA-MB-23乳腺癌细胞中miR-17-5p高表达，而在低侵袭度性的MCF-7乳腺癌细胞中miR-17-5p并不高表达。在MCF-7乳腺癌细胞中miR-17-5p过表达后能够作用于HBP1/beta-catenin通路，使MCF-7细胞具有侵袭

13、和迁移的水平。在体外实验中，下调内源性miR-17-5p能够抑制MDA-MB-231田胞侵袭和迁移。从而表明miR-17-5p通过抑制HBP休口Wnt/beta-catenin的后续激活，在乳腺癌细胞的侵袭和迁移中起到了重要作用。上皮细胞间质转化被认为是在肿瘤侵袭和转移的关键步骤之一，而很多miRNA他参与这个过程。一些转录因子，如Slug、Snail、Twist以及ZEB1被认为在肿瘤转移中起决定性作用。在正常情况下，miR-200能够抑制ZEB1和ZEB2的表达；而当转录因子ZEB1和ZEB2被外界信号如TGF-&#61538激活后，则能够反过来抑制miR-200,从而促动上皮细胞

14、间质转化、入侵以及可能会发生肿瘤转移。还有文章显示，miR-205也能够通过作用于ZEB1和ZEB2来调节上皮细胞间质转化。这些发现开辟了了解miRNAsft肿瘤侵袭和转移中作用的新途径。miRNAs调节辐射诱导致癌作用miRNAs在辐射诱导致癌过程中，也起到重要作用。Liu等发现，在辐射诱导胸腺淋巴瘤的BALB/c小鼠中，抑癌基因Big-h3表达下调以及miR-21的表达上调，而进一步研究显示，miR-21能够直接作用于抑癌基因Big-h3,从而参与辐射诱导的致癌作用。Liu等还发现，敲除TLR4基因的小鼠中，IL-6和miR-21表达下调，从而引起辐射诱导胸腺淋巴瘤的发生率降低。miRNA

15、s在肿瘤诊治中的作用1miRNAs与肿瘤诊断及预后miRNAs相对稳定并耐核糖核酸酶降解，还可从石蜡包埋的组织中分离出来。人血清中miRNAs勺水平稳定一致，表明血清miRNAs够作为对各种肿瘤检测的潜在生物标志物。miRNA藁达的结构能够反映肿瘤的起源、阶段等。Abraham等发现在遗传性甲状腺髓样癌和散发性甲状腺髓样癌中miR-183和miR-375过表达，并且miR-183和miR-375的过表达与外侧淋巴结转移、后遗症、远处转移以及死亡率相关。而下调TT细胞株中miR-183的表达则能够引起活细胞计数显著下降以及上调自噬相关蛋白LC3BmiRNAs!若成为预测甲状腺髓样癌的重要的生物标

16、志物以及治疗位点。在非小细胞型肺癌中，miR-126的是一个强大并且独立的负面预后因素，高表达miR-126的肺癌患者5年生存率显著降低。在鳞状细胞型肺癌组织中，miRNAS勺表达模式有系统的改变，其中miR-21的高表达与生存时间缩短相关，表明miR-21可能会成为鳞状细胞型肺癌的诊断和预后的分子标记。Hu等应用Northern印迹法以及原位杂交分析了10种miRNAS10种细胞系和158个组织样本中的表达情况，发现miR-126的表达与肿瘤细胞的去分化和淋巴结转移相关，miR-16-2与淋巴结转移相关，而miR-195P则提示食道腺癌患者处于较高的病理病阶段，另外miR-30e和miR-1

17、6-2则能够作为食道腺癌患者预后的生物标志物。所以，与恶性表型强烈关联的miRNAsfg够用做肿瘤标志物，与未来转移复发相关的miRNAsfg够用来作为肿瘤预后标志物，对于人类恶性肿瘤miRNAS勺分析研究将对肿瘤诊断和预后起到重要的作用。2miRNAs与肿瘤的治疗当前研究结果发现，miRNAs能够调节肿瘤细胞对电离辐射的敏感性。在H1299细胞中过表达miR-9或者let-7g都能够下调NFkappaB1并且降低线照射后细胞生存率。Josson等发现，过表达miR-521能够抑制DNA修复蛋白表达，显著增强前列腺癌细胞对放疗的敏感性；而抑制miR-521则使前列腺癌细

18、胞对放疗敏感性减弱。在A549肺癌细胞中，转染pre-let7a,能够减少K-Ras表达，并使A549细胞辐射敏感性上升。Tsang等研究发现，在人肝癌细胞HepG农田胞中，增加P-糖蛋白能够上调miR-16,抑制miR-16的靶基因Bcl-2的表达，从而增加辐射诱导的细胞凋亡。在髓母细胞瘤中，miR-34a能够通过调节MAGE-府口p53,从而使肿瘤组织对辐射敏感。对于前列腺癌细胞研究发现，持续高水平表达的miR-106b能够使辐射诱导的细胞周期阻滞和细胞生长的抑制点失效，从而使得前列腺癌细胞的耐辐射性增强。在前列腺癌细胞中，miR-106b能够抑制辐射诱导的p21激活，从而取消辐射诱导的细胞周期阻滞和细胞生长抑制。Hamand发现，miR-200c能够通过Akt途径来增加食道癌化疗的抵抗力。miR-21能够诱导Bcl-2上调