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文档简介
1、附录二: 常用固定液和染色液的配制常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml +冰醋酸5ml +福尔马林(37%40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜 作细胞学研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收 缩。若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。若材料易收缩,可 稍增加冰醋酸。久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。此液又 可作保存液。固定时间最多10h。如果用在植物胚胎的材料上,改用 下面的配方,效果较好:50%酒精89ml +冰醋酸6ml +福尔马林5ml2. 福尔马林炳酸-酒精固定液(FP
2、A)福尔马林5ml +丙酸5ml + 50%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定 24h,可长久保存。3酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方I:纯酒精3份+冰醋酸1份配方纯酒精6份+冰醋酸1份+氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定 液。固定时间不宜过久。4酒精-福尔马林固定液福尔马林 26 (610) ml + 70%酒精 100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。通常固定24h, 亦可长久保存 5酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml +甘油50ml此液也可长期储存材料
3、。6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml +蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml +蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml +蒸馏水60ml 弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。固定时间较短,一般为数小时,最长可固定 1224h,但藻类和蕨类 的原叶体可缩短到几分钟至1h。中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。为了易于渗透, 可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间1224h。强液配方用于固定木质根、
4、茎、成熟子房等。为了易于渗透,可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间1224h或更长。7. 铬酸-醋酸-福尔马林混合液这3种药品混合在一起所配成的各种固定液,通常称纳瓦兴固定液(Nawashin fixative),简称 Craf。配方见下表:常备液纳瓦兴原液(ml)纳瓦兴固定液(ml)桑弗利斯液(ml)InmIVV1%铬酸404040甲10%铬酸1581013铬酸1520206070液冰醋酸108蒸馏水75454040322079乙福尔马林40101010203064液蒸馏水60909080807036甲、乙两液均为贮备液,使用之前才将二者混合。适用于组织学和细胞学的研究材料。柔嫩而含水
5、多的材料,可选用I或H固定,坚韧而 成熟的材料,可用高浓度的W或V, 般材料多用皿。制作染色体和 有丝分裂的纺锤体标本时,常用桑弗利斯固定液。I、H、皿、W、 V固定液的固定时间为1248h,桑弗利斯液固定时间为46h。8. 铬酸-锇酸-醋酸固定液(Flemming fixative)强液:10%铬酸水溶液3.1ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml +蒸馏水11.9ml中液:10%铬酸水溶液0.33ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液0.62ml+ 10%醋酸水溶液3ml +蒸馏水6.27ml弱液:10%铬酸水溶液1.5ml + 2%锇酸的铬酸(2%)水溶液5ml + 10% 醋酸水溶液1ml +蒸馏水96.5ml此固定液需现用现配。固定2348h。 可用于各
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