新的制品重点

1、1、名词解释：生物制品:指采用现代生物技术手段来人为的创造一些条件，借用某些微生物、植物或动物体或利用生物体的某一组成部分,来生产某些初级或次级代谢产物，制成作诊断、治疗、预防疾病或用于某种特殊医学目的的医药用品。亲和层析：大部分生物活性物质都有其作用的靶物质，如酶与底物（或抑制剂）、抗原与抗体、激素与受体等，它们之间有特异的亲合作用，利用该性质设计的特异层析分离技术称为亲和层析。基因工程缺失活疫苗：是指应用基因操作技术，将病原微生物中与致病性有关的毒力基因序列除去或失活，使之成为无毒株或弱毒株，但仍保持有良好的免疫原性，从而制成的安全有效的疫苗。单克隆抗体：识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生

2、的均一性抗体，称之为单克隆抗体。单域抗体：抗体结合抗原主要由V区决定，只含有V区基因片段表达的小分子抗体，即只有VH或VL一个功能结构域，也能保持原单克隆抗体的特异性。这种小分子就称为单域抗体（single domain antibody）。双特异性抗体：天然的抗体分子为双价单特异性，如果对天然的抗体分子进行改造，把其他的效应物质如毒素、酶、细胞因子、受体分子通过一定方法与两种杂交抗体Fab片段或V区（VH与VL）连接起来，使之即可与靶细胞结合，又可介导其他一些效应功能，从而最大限度地杀伤靶细胞。这种具有双特异性的抗体分子就称为双特异性抗体或双功能抗体。蛋白工程疫苗：蛋白工程疫苗是指将抗原基因

3、加以改造，使之发生点突变、插入、缺失、构型改变，甚至进行不同基因或部分结构域的人工组合，以期达到增强其产物的免疫原性，扩大反应谱，去除有害作用或副反应的一类疫苗。多糖蛋白结合疫苗：将多糖与载体蛋白共价连接，通过载体蛋白提供适当的T细胞表位，有T细胞协助B细胞产生多糖特异性抗体，使T细胞非依赖性抗原转变为T细胞依赖性抗原，这类菌苗称为多糖蛋白结合苗。治疗性疫苗：广义治疗性疫苗是指在已感染病原生物或患某些疾病的机体中，通过诱生机体的特异性或非特异性免疫应答，以达到治疗或防止疾病恶化的生物制品。肿瘤导向治疗：2、生物制品行业重点发展方向？1）抗体与靶向治疗药物 创新药物所占比例最大的也是现代生物药，

4、而其中抗体药物则独占鳌头，占了1/3的比例。在美国FDA批准的抗体药物中有四种超过40亿美元，在G蛋白偶联受体靶向药物中，年销售额超过2030亿美元的就有20多种。目前这类药物的研发重点是各类单抗药，双功能抗体药、G蛋白偶联受体的靶向药物（即生物导弹）、小分子抗体或基因工程抗体等。2）疫苗类 疫苗从传统的传染病预防已扩展到了关节炎、癌症、心血管疾病、糖尿病、胃肠道疾病、高血压、肾病、肥胖症、气管炎和哮喘等各领域疾病的预防和治疗性疫苗。目前全球疫苗市场规模已超过220多亿美元，仅我国就达16亿美元，占7%。而且发展潜力很大，3）各种重组细胞因子、重组激素、血液制品4）诊断试剂与试剂盒5）氨基酸、

5、抗生素、药物制剂6）特殊新型生物制品 如RNAi、Stem、基因治疗、组织工程、生物芯片、生物信息等，正在兴起，已经进入研究的热点，相信，在不远的将来可能会有较好的开发应用前景。3、传统疫苗技术不能解决的问题？ 第一，用传统方法很难获得大量高纯度的抗原供研究和生产，然而重组DNA工程可以提供无穷无尽的材料供试验，而且可以对大量的候选疫苗进行反复的筛选。 第二，重组DNA技术使得对病原微生物的研究变得更加安全，因为研究的对象是基因和它们的蛋白质产物，而不是能引起传染病的致病微生物。 对于免疫保护机制不明确，有潜在致癌性或免疫病理作用，以及病原不能或难于培养的疫苗，使用传统疫苗技术就很难研制成功。

6、 主要针对免疫效果差，副反应大，成本较高和使用不方便的传统疫苗进行改造。4、基因工程缺失活疫苗的优点？有突变性状明确、稳定；不易返祖、毒力恢复；是研究安全有效的新型疫苗的重要途径。5、流感病毒的亚型分类（表面蛋白抗性）？ 根据流感病毒表面结构蛋白血凝素（hemagglutinin，HA）和神经氨酸酶（neuraminidase，NA）两抗原性的不同，将A型流感病毒分为不同的血清亚型。6、生物制品分离纯化过程中技术的选择优先性。 应选择不同机制的分离单元来组成一套分离纯化工艺，尽早采用高效的分离手段，先将含量最多的杂质分离去除，将费用最高、最费时的分离单元放在最后阶段。 即通常：先选用非特异、低

7、分辨的操作单元（如沉淀、超滤和吸附等），以尽快缩小样品体积，提高产物浓度，去除最主要的杂质（包括非蛋白类杂质）；采用高分辨率的操作单元（如具有高选择性的离子交换色谱和亲和色谱）；凝胶排阻色谱这类分离规模小、分离速度慢的操作单元放在最后。7、乙型肝炎治疗性疫苗策略，消除机理 策略： 在主动免疫与被动免疫中进行了选择。 主动免疫的优点为：注入有效的免疫原方法简单，安全性较高，通过调动机体本身的免疫应答，故有效持续的时间可较长。其缺点为，如患者的免疫应答普遍低下，则效果会较差。被动免疫包括输入经细胞因子激活或改造的自身免疫细胞或输入具有对HBsAg强免疫应答的他人免疫细胞等。由于已证实被动输入抗HB

8、s仅能短暂使血清中的HBsAg滴度下降，并无治疗作用，故不再考虑。 被动免疫的操作复杂，选择对象严格，需特别防止污染，医疗环境的要求高。鉴于慢性乙肝感染者不同于HIV感染者或肿瘤患者，一般具有对抗原刺激的正常应答，仅为对HBsAg有免疫耐受，因此可定位于主动免疫。 主动免疫策略为：改变抗原组分，使机体从免疫耐受转为识别抗原而产生免疫应答；调节抗原提呈的方式或途径，使机体对经调节后提呈的HBsAg产生免疫应答。消除机理（作用机制）：1）通过复合物中抗体的Fc段，与抗原提呈细胞表面的Fc受体结合，促进了细胞摄取抗原。当用酶消化去除抗HBs的Fc段，虽可形成抗原-抗体Fab段的复合物，但不能增强被巨

9、噬细胞所摄取。当用异种动物（如羊）的抗HBs组建复合物，因与鼠的巨噬细胞的Fc受体不相应，也不能促进抗原的摄入与提呈。2）抗原抗体复合物一旦与抗原呈细胞结合，可比单纯抗原更有效地激活B淋巴细胞和T淋巴细胞，激活T细胞增殖，释放更多的-干扰素和IL-2，属TH1类应答。刺激B淋巴细胞成为抗体分泌细胞，复合物在正常小鼠中诱生的抗HBS较单纯抗原诱生的抗体高10倍以上。从而引起强烈的体液免疫应答和细胞免疫应答，能打破免疫耐受、重新唤起机体的免疫应答，治疗持续性慢性感染 。8、生物制品原料保存方法，重组蛋白类生物制品保存方法。 原料的保存方法主要有：冷冻法。该方法适用于所有生物原料。常用-40速冻。有

10、机溶剂脱水法。常用的有机溶剂是丙酮。该法适用于原料少而价值高、有机溶剂对活性物质没有破坏作用的原料，如脑垂体等。防腐剂保鲜。常用乙醇、苯酚等。该法适用于液体原料，如发酵液、提取液等。 重组蛋白质：1）液态保存；A、低温保存；B、超低温保存；C、在稳定PH条件下保存；D、高浓度保存；E、加保护剂保存；2）固态保存；9、基因工程活性肽药物的应用包括哪些方面？在体外和离体研究中作为细胞培养补充剂；作为基础研究的对象；作为研究其他现象（如在免疫方面）的一种辅助剂；作为诊断剂；用于生物治疗的研究与开发。10.蛋白质类生物制品存在的非蛋白类杂质包括哪些？ 病毒和细菌等微生物、热原质、内毒素、致敏原及DNA

11、11.现代疫苗包括哪些？ 答：是一种利用现代分子生物学技术使用Ag通过诱发机体产生特异性免疫反应以予防和治疗疾病或达到某种特定医学目的的生物制剂。12.重组蛋白类生物制品鉴定方法酶联免疫电泳方法：SDS-PAGE，等电点聚焦，免疫电泳免疫学分析方法：放免法（RIA），放射性免疫扩散法（RID）酶联免疫吸附法（ELISA），免疫印渍（immunoblotting）受体结合试验（receptor binding）各种高效液相分析法（HPLC）肽图分析法Edman N末端序列分析法圆二色谱（CD）核磁共振（NMR）13.院士首创的基因工程药物是什么：-b型干扰素。14.新型疫苗的研究内容有哪些？15

12、、临床上预防术后血管栓塞的生物制品 肝素 硫酸软骨素16、艾滋病疫苗研制困难的原因？ HIV疫苗的研究进展缓慢，主要原因是该病毒本身的生物学特点：1）基因变异率极高；2）抗HIV的保护性免疫机制尚未明确；3）缺乏研究HIV疫苗保护作用的适宜动物模型；4）HIV常通过黏膜表面传播，需要建立黏膜免疫来预防病毒的性途径传播；5）病毒基因可整合至宿主细胞染色体中，造成潜伏感染；6）病毒可直接侵犯和破坏免疫系统。17、中和作用： 用于感染性疾病，使病原体或其产生的毒素丧失致病力。18、寄生虫免疫逃避机制（记住这几个字即可） 一些种群在进化过程中获得某些保护自己而不被宿主清除的功能，即所谓寄生虫的免疫逃避

13、机制。19、特殊类型的基因工程的抗体双特异性抗体；免疫黏连素；催化抗体。 20、小分子抗体Fab抗体：Fab抗体大小只有完整IgG的1/3单链抗体：其大小只为完整抗体的1/6单域抗体：其相对分子质量仅为完整抗体分子的1/12超变区多肽：只含有一个CDR多肽的抗体21、HAMA主要由抗体的 鼠单抗可变区 区域导致。22、生物制品按分子大小的分离方法 按分子大小分离的方法：有离心、沉淀、超滤法（ultrafiltration）和透折法（dialysis）（即膜分离方法）、凝胶层析法（gel chromatography）、超速离心法（ultra centrifugation）等。其中膜分离法可用于

14、生物大分子物质的浓缩、分级和脱盐。23、生物制品分离纯化方法要满足哪些要求？1、根据产物表达形式来选择2、根据分离单元之间的衔接选择3、根据分离纯化工艺的要求来选择（1）工艺条件应温和，保持产品生物活性；具有良好的稳定性和重复性：不受或少受发酵工艺、条件及原材料来源的影响，在任何环境下使用都应具有重复性，明确需严格控制的步骤和技术（2）尽可能减少组成工艺的步骤：步骤越多，产品的后处理收率越低，但必须保证产品的质量（3）组成工艺的各技术或步骤之间要相互适应和协调（4）在工艺过程中要尽可能少用试剂，以免增加步骤，或干扰产品质量（5）时间要尽可能短，因稳定性差的产物随工艺时间增加，生物活性收率会降低

15、，产品质量会下降（6）必须高效、收率高、易操作，对设备条件要求低，能耗低（7）具有较高的安全性：药品必须保证安全、无菌、无热原、无污染24、理想菌苗的条件（1）安全，遗传性状稳定，无毒性，无致癌性，无致畸变或致流产性。（2）结构简单清楚，可生物降解，有生物相容性，与组织抗原无免疫学交叉反应。（3）对各年龄组人群均有长时间的免疫保护作用。（4）多价，有更大的覆盖面，最好一次性免疫。（5）能口服，能有效诱导粘膜免疫。（6）易于生产，储存及服务，不需冷藏。25、核酸疫苗的优缺点优点：易于制备； 便于保存；可多次免疫并且容易制成多联多价疫苗。缺点：外源核酸是否会整合到染色体中引起癌变；能否引起免疫病理

16、作用，如自身抗核酸抗体的产生，免疫耐受等。26、传统疫苗（减毒、灭活、亚单位苗）的区别27、基因工程亚单位苗优缺点，如何克服缺点？优点：产量高；纯度高；安全性高 ；用于病原体难于培养或有潜在致癌性，或有免疫病理作用的疫苗研究。免疫原性好。缺点： 与传统亚单位疫苗相比 ，其免疫效果一般较差。克服缺点：为了增强其免疫原性，一般方法是:调整基因组合使之表达成颗粒性结构 ；是在体外加以聚团化，包入脂质体或胶囊微球；加入有免疫增强作用的化合物作为佐剂（adjuvant）。28、为什么迄今为止没有寄生虫疫苗？（迄今仍无公认的寄生虫病疫苗）（1）多数寄生虫为多细胞生物，寄生虫抗原成分非常复杂，很难找准特定保

17、护性抗原，保护性免疫应答机制不清。（2）寄生虫抗原免疫所诱导的大都为部分保护性免疫力（一般为30%70%）。（3）寄生虫形成种种逃避宿主免疫应答的办法，其机制尚待阐明。（4）寄生虫一般引起慢性长期感染，病期因寄生虫生活史中形态上不同，常存在数阶段（期）。29、与裸DNA相比，用细菌释放DNA的优点有哪些？1）增加靶向性。用肌肉注射或基因枪注入DNA只能转染有限的抗原提呈细胞（APCs）；而通过适当的细菌释放DNA，能将质粒DNA特异靶向相关免疫组织的APCs，且除APCs外，还可靶向树突状细胞（DCs），能更好地进行抗原提呈。2）增加免疫原性。细菌的成份，如G-菌的LPS和G+菌的脂肽酸及细菌DNA中没有甲基化的序列等，都有佐剂活性，可增加释放DNA的免疫原性。3）增加免疫途径。细菌载体还能进行口服，转染肠相关淋巴组织，促进粘膜免疫效果。他们可停留在吞噬泡中，也可通过分泌溶质