青蒿素含量测定方法改进及黄花蒿植物质量评价

1、青蒿素含量测定方法改进及黄花蒿植物质量评价         【摘要】 目的建立一种快捷准确的测定黄花蒿中青蒿素含量的方法，用以指导青蒿素生产原料的收购及青蒿素生产过程中质量监控。方法改进的紫外分光光度法，检测波长292 nm，青蒿素含量计算公式：M（mg/g）=（A样品×V×r×2）/（A标准×3）。结果青蒿素对照品在0.02 0.        【摘要】  目的建立一种快捷准确的测定黄

2、花蒿中青蒿素含量的方法，用以指导青蒿素生产原料的收购及青蒿素生产过程中质量监控。方法改进的紫外分光光度法，检测波长292 nm，青蒿素含量计算公式：M（mg/g）=（A样品×V×r×2）/（A标准×3）。结果青蒿素对照品在0.02 0.14 mg/ml范围内具有良好的线性关系，r=0.999 8（n=7），平均回收率为99.81%（n=7）。重庆市酉阳县等7份不同产地黄花蒿样品中青蒿素含量范围为6.7110.19 mg/g。测定结果与传统的分析方法无显著差异。结论 采用改进的紫外分光光度法进行青蒿素含量测定简单易行，线性及重复性良好，可以取代传统的分析方

3、法作为青蒿素生产过程中含量测定的新方法。 【关键词】  黄花蒿 青蒿素 紫外分光光度法 质量控制Key words：Artemisia annua L.;  Arteannuin;  Ultraviolet spectrophotometry;  Quality control    黄花蒿又名青蒿，为菊科植物黄花蒿Artemisia annua L.的干燥地上部分，具有清热解暑、除蒸、截疟等功效1。20世纪70年代我国学者从黄花蒿中分离得到一种新型的抗疟成分青蒿素2（arteannuin），对脑型疟、恶性疟、间日疟，具有高

4、效、速效、低毒、使用安全的特点，是目前国际上防治疟疾的首选药物，并已成为WHO推荐的抗疟药物。重庆地区拥有丰富的优质黄花蒿种质资源，是全国最重要的青蒿素原料药的产地之一。为了进一步充分利用本地黄花蒿资源，我们采用改进的紫外分光光度法对重庆不同产地的黄花蒿中青蒿素进行含量测定，为该地区的黄花蒿质量评价和进一步加速开发利用提供参考依据；同时，我们对原有青蒿素含量测定的方法进行了改进，建立了一种简便、快捷、准确的青蒿素含量测定方法，用以指导青蒿素生产原料的收购及生产质量的控制。1  仪器与试药1.1  仪器UV-3600型紫外可见近红外分光光度计（日本岛津公司）；微型植物试样粉碎

5、机（北京中兴伟业仪器有限公司）；AE240型天秤梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；SZ-93型自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）；W2018型恒温水浴锅（上海中生科技有限公司）。1.2  试剂甲醇，石油醚（3060），95%乙醇，氢氧化钠，水为二次蒸馏水，以上均为分析纯。1.3  对照品 青蒿素对照品（供含量测定用，批号100202200402）由中国药品生物制品检定所提供。1.4  药材不同产地黄花蒿样品于20060810采自重庆市

6、酉阳县等地（表1），经鉴定为菊科植物黄花蒿Artemisia annua L.的干燥地上部分。2  方法与结果2.1  供试品溶液的制备将黄花蒿叶干燥后，粉碎过筛（过100目筛），制成黄花蒿样品粉末。精密称取黄花蒿样品粉末1.0g于250 ml具塞锥形瓶中，精密量取石油醚（3060）60 ml，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）15 min，立即用流水冷却至室温；将超声后的石油醚提取液摇匀，滤过，倒入量筒，记录石油醚的体积V。精密量取黄花蒿提取液0.4 ml于10 ml的具塞刻度试管中，放入不再加热的沸水中挥干，得到含青蒿素的浸膏，加入2 ml的95%乙醇，溶解残

7、渣，用0.2%氢氧化钠溶液定容至10 ml，摇匀，置(50±1)恒温水浴中微温30 min，取出，流水冷却至室温，待液面回复至刻度，用0.22 m微孔滤膜滤过，即得。2.2  对照品溶液的制备精密称取80干燥至恒重的青蒿素对照品100 mg，置100 ml量瓶中，加入95%乙醇稀释至刻度，得到1 mg/ml的青蒿素对照品母液，4冰箱保存备用。精密量取青蒿素对照品母液10.0 ml于100 ml量瓶中，以95%乙醇补充至20 ml，用0.2%氢氧化钠溶液定容至100 ml，摇匀，置(50±1)恒温水浴中微温30 min，取出，流水冷却至室温，待液面回复至刻度，用0.

8、22 m微孔滤膜滤过，即得。2.3  空白溶液的制备取20 ml 95%乙醇置于100 ml量瓶中，用0.2%氢氧化钠溶液定容至100 ml，摇匀，置(50±1)恒温水浴中微温30 min，取出，流水冷却至室温，待液面回复至刻度，用0.22 m微孔滤膜滤过，即得。2.4  标准曲线的绘制分别精密量取青蒿素对照品母液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 ml于10 ml量瓶中，以95%乙醇溶液补充至2 ml，补加0.2%NaOH溶液至刻度，混匀，即得0.00，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10，0.12，0.14 mg/ml对照品溶液系列，置（50±1）恒温水浴