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文档简介
1、临床实验室常用试剂配制标准操作程序一、目的: 保证实验中用到的各种试剂符合实验要求。二、适用范围: 实验室常用需要配制的试剂。三、职责: 由临床基因扩增检验实验室专业技术人员制定程序文 件,实验室负责人审核,科室主任批准实施。四、程序:1、4%NaOH容液配制用电子天平称取4克分析纯的NaOH固体,置于一只三 角烧瓶中。用200ml量筒准确取100ml水,缓缓注入盛放NaOH固 体的三角烧瓶中。摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解。然后缓缓倾倒入250ml广口瓶中密封保存备用。2、1%NaClO溶液配制用5ml量筒准确取2mlNaClO原液,缓缓注入一只三角 烧瓶中。用200ml量筒准确取198
2、ml水,缓缓注入盛放NaCIO的 三角烧瓶中。摇荡混匀溶液。将混匀的溶液转移入广口瓶中。重复步的操作,制备1000ml的1%NaCIO溶液储存备用。3、10%NaCI O溶液配制用100ml量筒准确取20mINaCIO原液,缓缓注入一只三 角烧瓶中。用200ml量筒准确取180ml水,缓缓注入盛放NaCIO的 三角烧瓶中。摇荡混匀溶液。将混匀的溶液转移入广口瓶中。重复步的操作,制备1000ml的10%NaCIO溶液储存备用。4、1N HCl溶液配制用100ml量筒准确取86.2ml浓盐酸,缓缓注入一只三 角烧瓶中。用1000ml量筒准确取913.8ml水,缓缓注入盛放浓盐 酸的三角烧瓶中。摇荡
3、混匀溶液。将混匀的溶液转移入广口瓶中储存备用。5、RNA专用试剂配制1)RNA提取器皿的处理1提取过程尽量使用一次性塑料制品,并经高压消毒.因为 其基本不含Rnase,可以不经预处理直接用于制备和储存RNA。2如须使用玻璃制品.使用前必须经180C干烤8小时以上,或用0.1%DEPC容液浸泡。3不能用高温干烤的用品均须用0.1%DEPC溶液浸泡。4DEPC去除Rnase步骤:灌满0.1%DEPC勺器皿在37C放置2小时,然后用灭菌水淋洗数次,并于100C干烤,15分 钟.最后高压消毒15分钟。100C干烤15分钟待用。2)DEPC水 (无Rnase水)配制1量取一定量的超纯水(18.2MQ)2
4、量取0.1%(v/v)的DEPC加入水中。3水放置过夜。4高压蒸汽灭菌15分钟。3)75%DEP(乙醇配制1准备无Rnase的量筒及玻璃瓶。2按3:1比例分别量取RNA专用的无污染的无水乙醇和DEPC水,倒入容器内。3混匀,即为75%DEP(乙醇3)RNA式剂的准备1所用RNA试剂均须为提取RNA专用,不可与其它用途的 式剂混用,以免污染.2称量RNA试剂时,其所用的药勺、容器、量筒等均应为 无Rnase污染器皿。3配制用水为高压灭菌超纯水(最好用DEPC处理过的超纯水)4在配制过程中应戴一次性手套,并须勤换。.5如试剂内不含能与DEPC反应的成分,配好的溶液可用0.1%DEPC于37C处理至少12小时,然后于
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