临床免疫学检查操作规程

1、临床免疫学检查操作规程传染病免疫学检查乙型肝炎血清标志物（HBV M）检测【 方 法 】ELISA 法。【 试 剂 】国内有商品化试剂盒供应。但必须按规定使用经中国药 品生物制品检定所检定并贴有“中国药品生物制品检定所检 定合格”字样的防伪标签的试剂。【 操 作 】按试剂盒内说明书书进行。【 附 注 】1 试剂盒应置冰箱中保存，取出后平衡至室温方可使 用，未用完的微孔条须密封保存；2 每次应设空白 1 孔（不加标本及标酶试剂，其余各 步相同），阴性对照 3 孔，阳性对照 2 孔；3 洗涤液须用蒸镏水或去离子水配制，洗涤时各孔均应加满洗液，以防孔口内边缘有游离酶残存不能洗净；4 用洗板机洗板，每

2、次洗板反复 5 遍，最后一次要求微孔内不残留洗涤液，如达不到要求，需扣干；5 洗板机洗板时应设定 3060 秒的浸泡时间；6 滴加试剂前应将滴瓶翻转数次，使液体均匀并弃去 一滴。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量 准确，注意勿将 试剂滴在孔壁上；7 . 37 C温育须采用水浴箱， 不可使用37 C干式恒温箱，且微孔条必须接触 37 C水浴水面，不可悬空；8 不同批号试剂不可混合使用。【 结果判断 】酶标仪双波长 450/630nm 比色测定；1 . HBSAg、抗一HBS、HBeAg临界值（C.O）二阴性对照孔A值的均值NX 2.1 （阴性对照A值V 0.05时按0.05计）;标本 A值 S/C.

3、O > 1 为 HBsAg 抗一HBs HBeAg阳性（S/N> 2.1 );标本 A值 S/C.O v 1 为 HBsAg 抗一HBs HBeAg阴性(S/N v 2.1 )。2 .抗一HBe 抗一 HBb;临界值(C.O)二阴性对照孔A值的均值NX 0.5 ;标本A值S/C.O < 1者为抗一HBe抗一 HB阳性(S/N< 0.50 );标本A值S/C.O > 1者为抗一HBe抗一 HEC阴性(S/N >0.50 )。抗甲型肝炎病毒免疫球蛋白 M( Anti-HAV-IgM )测定【 方 法 】ELISA 法。【 试 剂 】市售合格试剂、要求同 HBV两

4、对半；【 操 作 】按试剂说明书要求进行，要求可参考HBV两对半；结果判断 】要求同HBV两对半中HBsAg抗丙型肝炎病毒免疫球蛋白G(Anti-HCV-IgG )测定【 方 法 】ELISA 法。【 试剂 】市售合格试剂、要求同 HBV两对半。【 操作 】按试剂盒说明书进行、要求可参考HBV两对半。【 结果判断 】1 .阴性对照：正常情况下， A值W 0.08 ;2 .阳性对照：正常情况下， A值0.50 ;3 .临界值(C.O)=阴性对照均值X 2.8。阴性对照孔A值0.08应舍弃、如所有阴性对照孔 A值 均0.08，试验应重做。阴性对照孔 A值0.05时以0.05计 算。标本A值S/C.

5、0 1者为阳性。 标本 A 值 S/C.O<1 为阴性。抗 HIV（ 1+2）测定在选用测定方法时、需根据自身条件和需要加以综合考虑、尽管所述方法灵敏度特异性都很高、但在实际工作中， 假阳性仍然可见，为达到最佳的检测目的，一般需采用下列 程序。ELISA 、金标等过筛试验阴性排除后；阳性者应以同类另一方法或另类某种方法重新过筛试验，以排除假阳性，若仍为阳性，可用免疫印迹法证实，再次排除假阳性，经重复 检测均为阳性者，方可慎重发出阳性结果报告。【 方 法 】1 筛选： ELISA 法、金标法、明胶凝集试验、免疫荧光 法和乳胶凝集试验等。试剂：必须使用经中国药品生物制品检定所检定并贴有 “中国药品生物制品检定所检定合格”防伪标签的商品试剂 盒。2 确认：免疫印迹法和放射免疫沉淀试验。试剂：使用经国家卫生部正式批准的快速免疫转印试剂盒和相应的放射免疫沉淀试剂盒。【 操 作 】按试剂说明书要求进行。【 结果判断 】按试剂说明书要求判定。【 附 注 】1 判断是否感染 HIV 应十分慎重，对可能是阳性的样 品还应结合其它测定项目的结果和临床情况作出判断。2 金标法必须