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文档简介
1、整理课件DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定整理课件整理课件整理课件整理课件整理课件1、动物细胞动物细胞的破碎较易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水 ,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可整理课件讨论:加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解整理课件讨论:如果研磨不充分,会对讨论:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?实验结果产生怎样的影响?答:研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等为了纯化提取的
2、为了纯化提取的DNADNA,需,需要将滤液作进一步处理要将滤液作进一步处理讨论:此步骤获得的滤液中讨论:此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?可能含有哪些细胞成分?整理课件答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质?整理课件答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离讨论:方案二与方案三的原理有什么不同?整理课件DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却
3、的酒精溶液(体积分数为95 ) ,静置23min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水整理课件鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为2mol/L 的NaCl溶液5ml于两只试管中,其中一只加入DNA丝状物,各加入二苯胺4ml 试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两只试管中溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否有蓝色整理课件实验中对实验中对DNA进行鉴定时做如下操作进行鉴定时做如下操作:AB1加入加入2mol/L的的NaCl溶液溶液5mL加入加入2mol/L的的NaCl溶液溶液5mL2加丝状物并搅拌加丝状物并搅拌不加不加3加加4mL二苯胺二苯胺,混匀混匀 加加4mL二苯胺二苯胺,混匀混匀4沸水浴沸水浴5min沸水浴沸水浴5min实验
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