全国艾滋病检测技术规范

1、全国艾滋病检测技术内容抗体筛查方法及策略确证检测方法及策略确证结果判读及报告123一一HIV筛查方法及策略1样本的采集和处理23实验室检测方法HIV抗体筛查策略样本的采集和处理2009版2015版全血、血清、血浆、唾液、尿液以及DBS样品可用于HIV抗体检测。全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品可用于HIV抗体检测。样品的采集和处理尿液和口腔黏膜渗出液1.尿液：推荐使用专用采尿管，保持尿液稳定。尿液样品可采集随机尿，女性经期应取中段尿。2.口腔黏膜渗出液：使用试剂盒提供的容器收集样品。存放时间和是否冻存以试剂盒说明书为准。口腔黏膜渗出液应采集口腔渗出液,不是唾液。样本的采集和处

2、理1. 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于28， 一周以上应存放于-20以下。2. 口腔黏膜渗出液样品应即刻使用，需要保存应以产品说明书为准。. 尿液样品，使用专用采尿管，室温下可保存2周，一年之内存放宜在28。长期保存（一年以上）的样本冻存条件、是否添加防腐剂等以产品说明书为准。34. 筛查阳性样品应及时进行补充试验，筛查阴性样品，可根据具体需要决定保存时间，建议至少保存1个月。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。补充试验阳性样品按照国家生物样品管理的有关规定执行。样本的采集和处理12. 应符合生物安全要求；要获得相应部门批准并由具 有资质的人

3、员专程护送。. 全血、血浆的运送应符合生物安全要求，参照可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定(卫生部第45号令,2006年2月1日执行)。样本的采集和处理第三条 本规定适用于可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理工作。第四条 运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本，应当经省级以上卫生行政部门批准。未经批准，不得运输。样本的采集和处理第九条 申请在省、自治区、直辖市行政区域内运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，由省、自治区、直辖市卫生行政部门审批。第十条 申请跨省、自治区、直辖市运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的，应当将申请材料提交运输出发地省级

4、卫生行政部门进行初审；对符合要求的，省级卫生行政部门应当在3个工作日内出具初审意见，并将初审意见和申报材料上报卫生部审批。样本的采集和处理运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的交通工具：1、民航托运：由民航主管部门批准的航空承运人(国航、东方）和机场实施运输。2、第十三条 专车运输：要求两人以上护送9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。22.3.622.3.6Sunday, March 06, 202210、低头要有勇气，抬头要有低气。20:07:0720:07:0720:073/6/2022 8:07:07 PM11、人总是珍惜为得到。22.3.620:07:0720:07Mar-22

5、6-Mar-2212、人乱于心，不宽余请。20:07:0720:07:0720:07Sunday, March 06, 202213、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。22.3.622.3.620:07:0720:07:07March 6, 202214、抱最大的希望，作最大的努力。2022年3月6日星期日下午8时7分7秒20:07:0722.3.615、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。2022年3月下午8时7分22.3.620:07March 6, 202216、业余生活要有意义，不要越轨。2022年3月6日星期日20时07分7秒20:07:076 March 202217、一个人即使已登

6、上顶峰，也仍要自强不息。下午8时7分7秒下午8时7分20:07:0722.3.6样本的采集和处理 对于违反本规定的行为，依照病原微生物实验室生物安全管理条例第六十二条、六十七条的有关规定予以处罚。第六十二条 未经批准运输高致病性病原微生物菌（毒种或者样本，或者承运单位经批准运输高致病性病原微）生物菌（毒）种或者样本未履行保护义务，导致高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本被盗、被抢、丢失、泄漏的，由县级以上地方人民政府卫生主管部门、兽医主管部门依照各自职责，责令采取措施，消除隐患，给予警告；造成传染病传播、流行或者其他严重后果的，由托运单位和承运单位的主管部门对主要负责人、直接负责的主管人员和其

7、他直接责任人员，依法给予撤职、开除的处分；构成犯罪的，依法追究刑事责任。12 第六十七 条发生病原微生物被盗、被抢、丢失、泄漏，承运单位、护送人、保藏机构和实验室的设立单位未依照本条例的规定报告的，由所在地的县级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门给予警告；造成传染病传播、流行或者其他严重后果的，由实验室的设立单位或者承运单位、保藏机构的上级主管部门对主要负责人、直接负责的主管人员和其他直接责任人员，依法给予撤职、开除的处分构成犯罪的，依法追究刑事责任。；13样本的采集和处理1. 样品种类由唾液变为口腔粘膜渗出液，专门介绍了口腔黏膜渗出液和尿液样本；23. 筛查阴性样品由建议保存1-2月变为建

8、议至少保存1个月；. 确证样本由至少保存10年，变为按照国家生物样品管理的相关规定执行。4. 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定(卫生部第45号令,2006年2月1日执行)筛查方法1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）这类试验可使用血液（包含血清、血浆和滤纸干血斑）、尿液样品 ，HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体。. 快速检测（RT）这类试验可使用血液、口腔黏膜渗出液，操作简便快速，2适用于应急检测、门诊急诊检测。一般可在1030分钟内得出结果。明胶颗粒凝集试验（PA），免疫渗滤试验，免疫层析试验。大家熟悉的HIV抗体筛查检

9、测流程样 品选用筛查试剂初筛试验阳性反应阴性反应原有试剂另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂复检试验一阴一阳报告阴性均阳性反应均阴性反应报告阴性确证试验16HIV抗体检测策略通过检测样本中是否存在艾滋病病毒抗体、抗原或者核酸而确定艾滋病病毒感染的检测方法。补充试验包括抗体确证试验（免疫印迹试验，条带/线性免疫试验，特定条件下的替代检测，免疫层析或免疫渗滤试验）和核酸试验（核酸定性和核酸定量试验）补充实验补充实验HIV抗体检测策略试剂-1有反应无反应试剂1双份或双孔检测或两种试剂*均有反应一有反应 ,一无反应均无反应报告HIV抗体阴性补充实验图2 使用抗体检测试剂的检测流程

10、HIV抗体检测策略不区分抗原抗体的检测试剂有反应无反应抗体检测有反应无反应报告HIV抗体阴性P24抗原阴性补充试验HIV-1核酸试验或P24抗原试验或2-4周后随访图3 使用不区分抗原抗体联合检测试剂的检测*双份或双孔区分抗原抗体检测试剂抗体有反应抗原有反应抗体有反应抗原无反应抗体无反应抗原有反应抗体无反应抗原无反应抗体检测*有反应无反应抗体确证试验HIV-1核酸试验或24周后随访报告HIV抗体阴性，HIV P24抗原阴性图4 区分抗原抗体检测试剂检测流程*双份或双孔附表1HIV抗体筛查检测报告编号送检日期送检单位年月日全血 血浆 血清口腔黏膜渗出液 尿 其它：送检人群送检样品姓名性别民族年龄

11、职业婚姻状况国籍文化程度身份证现住址联系电话_省_市_县_乡（镇、街道）_村_（门牌号）户籍地址_省_市_县_乡（镇、街道）_村_（门牌号）筛查复检（第一次）复检（第二次）ELISA PA化学发光 RT其它实验：_ELISA PA化ELISA PA化学发光 RT检测方法学发光 RT实验：_其它其它实验：_检测日期试剂厂家年 月 日年 月 日年 月 日批 号有效日期检测结果有反应 无反应抗体 阴性有反应 无反应有反应 无反应筛查结论检测者HIV感染待确定审核者检测单位（公章）：备注：电话:邮编:二一二一确证检测方法及策略12实验方法确证策略3结果判读及报告抗体确证方法123. 免疫印迹试验（WB

12、）. 条带/线性免疫试验（RIBA/LIA）. 其他方法：可用于确证的特定条件下的三种酶联免疫、三种快速实验或酶联加快速试验，免疫层析和免疫渗滤试验。HIV抗体确证策略筛查试验阳性反应样品确证试剂阴性反应报告阴性HIV-1阳性反应 不确定反应报告HIV-1阳性出现HIV-2指示条带根据具体情况进一步检测HIV-2组合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带型有进展但不满足阳性标准，应继续随访直8周。如带型没有进展或呈阴性反应，则报告阴性；满足HIV阳性抗体判断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可根据具体情况决定是

13、否继续随访。HIV抗体检测策略免疫印迹试验(WB/RIBA)不确定阴性阳性出现HIV-2指示带核酸试验或24周后随访报告HIV-1抗体阴性报告HIV-1抗体阳性根据情况进一步检测HIV-2图5 免疫印迹试验流程三一三一确证结果判读及报告在进行WB条带判读及结果解释前，回顾一下HIV病毒的主要结构蛋白HIV病毒主要结构蛋白 ENV (包膜蛋白) ：GP160、GP120、GP41GAG (组抗原蛋白) :P55、P24、P17POL (聚合酶蛋白) ：P66、P51、P31完整带型 - HIV Blot 2.2Early HIV Infection11142086420p24 antigengp

14、160p24windowgp120gp4- 101030507090110Days典型带型 早期感染有有ENV和和GAG印迹，没有印迹，没有POLgp 160gp 120感染后前感染后前30天天,p24和和gp160强强度比例大约相等度比例大约相等gp160/p24 = 1)p 55(gp 41在非常早期有抗原没有抗体时在非常早期有抗原没有抗体时ENV(gp160)或或GAG(p24)任任何一个可以单独出现何一个可以单独出现p 24p 17IgG ControlLate HIV Infection11142086420p24gp160gp120gp41P66p55020040060080010

15、0012001400160018002000days典型带型 - 感染晚期gp 160强 ENV印迹和弱的或阴性GAG和/或 POL 印迹gp 120p 66gp 41p 31p 24IgG Control不典型血清图谱-只有GAG条带不典型血清图谱-只有ENV条带不典型血清图谱-只有POL条带结果判读按照试剂盒说明书判定标准，判断待测样品为阳性、阴性或不确定。国际组织推荐的判定标准组织机构WB检测阳性判定标准美国ASTPHLD和CDC，1989p24,gp41,gp120/gp160之中任何二条法国全国输血中心世界卫生组织二条ENV（2）带和GAG或POL带二条ENV（2）带，有或无GAG或

16、POL带美国泛美逆转录病毒血清标准协 一条ENV带和p24或p31带会（CRSS），1988美国红十字会（ARC），1988中国CDC，2004GAG、POL和ENV各一条带2条ENV带（gp41和gp160/gp120）或1条ENV带和p24带澳大利亚国家参比实验室（NRL） 一条ENV带和任何三个GAG和POL1987带德国病毒疾控协会（DVV）DIN 58969，第41部分一条ENV带和至少一条GAG和POL带结果判读我们（MP）推荐使用下列标准对MPD HIVBLOT 2.2检测结果进行分析。对显现的每条条带均应记录，并将结果分析为阴性、阳性或不确定。显现条带分析结果阴性没有病毒的特异

17、性条带只检测出p17抗体，没有其它条带阴性检测出2条ENV（gp160/gp41和gp120）及GAG（p17、p24、p55）或POL（p31、p51、p66）HIV-1阳性检测出2条ENV（gp160/gp41和gp120）及GAG（p17、p24、p55）或POL（p31、p51、p66）且HIV-2特异性条带清晰可见。HIV-1阳性且提示HIV-2阳性感染出现任何特异性条带，但不足以被判为阳性不确定不确定但提示HIV-2阳性感染出现任何特异性条带，但不足于被判为阳性，且HIV-2特异性条带清晰可见结果判读如果出现HIV-2指示带，根据情况进一步检测HIV-2。HIV-2检测有两种方法，

18、使用能够区分HIV-1和HIV-2的抗体确证试剂，根据试剂盒说明书直接判定结果; 使用以检测HIV-1抗体为主的抗体确证试剂，只有1条HIV-2指示带，当检测结果出现HIV-2指示带时，根据具体情况决定是否进一步检测HIV-2：（1）HIV-1抗体阳性，报告HIV-1抗体阳性，不推荐再检测HIV-2；2）HIV-1抗体不确定或阴性，需再用单纯的HIV-2抗体确证试剂或（能区分HIV-1与HIV-2感染的确证试剂检测。报告发出时间1. 2015年以前10个工作日。. HIV抗体确证检测报告应在收到样品后的7个工作2日发出。陕疾控艾防发201537号3.HIV抗体确证检测报告应在收到样品后的7个工

19、作日发出。（2015版全国艾滋病检测技术规范）9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。22.3.622.3.6Sunday, March 06, 202210、低头要有勇气，抬头要有低气。20:07:1020:07:1020:073/6/2022 8:07:10 PM11、人总是珍惜为得到。22.3.620:07:1020:07Mar-226-Mar-2212、人乱于心，不宽余请。20:07:1020:07:1020:07Sunday, March 06, 202213、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。22.3.622.3.620:07:1020:07:10March 6, 202214、抱最大的希望，作最大的努力。2022年3月6日星期日下午8时7分10秒20:07:1022.3.615、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。2022年3月下午8时7