海洋植物木果楝种子化学成分的研究

1、海洋植物木果楝种子化学成分的研究霍长虹，尹宝伟，沈立茹，赵雷，董玫，史清文，王永利（河北医科大学 药学院，河北 石家庄 050017）摘 要: 目的 研究海洋植物木果楝 Xylocarpus granatum Koenig 种子的化学成分。方法 采用色谱法分离，根据化合物理化性质和波谱分析鉴定其结构；用MTT法测定单体化合物的抗肿瘤活性。 结果 从木果楝种子中分离鉴定了16个化合物，分别为过氧化麦角甾醇 (1)，xylocarpin G (2)，xylocarpin H (又名granaxylocarpin B, 3)，xylogranatin C (4)，3-detigloyoxy-2-me

2、thylbutanoyloxy xylogranatin B (5)，xylogranatin D (6)，hispidol B (7)，东莨菪葶 (8)，b-谷甾醇 (9)，胡萝卜苷 (10)，xylomexicanin A (11)，odoratone (12)，xylomexicanin B (13)，piscidinol G (14)，spicatin (15)，7-deacetyl-7-oxogedunin (16)。结论 化合物11和13为新化合物，化合物1，7，8，12和14为首次从木果楝属植物中分离得到，化合物16为首次从木果楝中分离得到。化合物3，4，11，14对人肿瘤细胞株

3、HLE，Hela，KT显示了不同程度的抑制活性。关键词: 木果楝；种子；化学成分；MT T木果楝Xylocarpus granatum Koenig为一种生长在热带沿海地带的海洋红树林植物，属楝科木果楝属，主要分布于亚洲和非洲的热带海岸及大洋洲北部，在我国海南省亦有分布。海南民间用其种皮治赤痢，种仁用作滋补品1。在东南亚国家民间用其治疗腹泻，霍乱和由疟疾引起的发烧，还可用做昆虫据食剂2。戴好富等报道木果楝的醋酸乙酯提取物对肿瘤 HeLa 细胞生长具有抑制活性3。为研究与开发该植物的有效成分，我们对其化学成分进行了研究，此论文报道从木果楝种子中分离并鉴定了16个化合物：过氧化麦角甾醇 (1)，x

4、ylocarpin G (2)，xylocarpin H (又名granaxylocarpin B, 3)，xylogranatin C (4)，3-detigloyoxy-2-methyl- butanoyloxy xylogranatin B (5)，xylogranatin D (6)，hispidol B (7)，东莨菪葶 (8)，b-谷甾醇 （9），胡萝卜苷 (10)，xylomexicanin A (11)，odoratone (12)，xylomexicanin B (13)，piscidinol G (14)，spicatin (15)，7-deacetyl-7-oxogedu

5、nin (16)。其中化合物11和13为新化合物，1，7，8，12和14为首次从木果楝属植物中分离得到，16为首次从木果楝中分离得到。同时采用MTT法评价了单体化合物对人肿瘤细胞株HLE，Hela，KT的抑制作用，3，4，11和14对上述细胞显示了不同程度的抑制活性。1 仪器与材料X4型显微熔点测定仪（温度未校正）；APEX 型傅立叶变换离子回旋质谱仪；Varian INOVA-500型核磁共振波谱仪（TMS为内标）；Waters制备高效液相色谱仪（600泵和2487紫外检测器，Whatman partisil 10 ODS-2，9.5 × 250 mm）；薄层色谱及柱色谱用硅胶（青

6、岛海洋化工厂产品）。木果楝种子采于海南省，由厦门大学生命科学学院王文卿教授鉴定为X. granatum。2 提取与分离木果楝种子粗粉3 kg，用95 %乙醇渗漉提取，渗漉液减压浓缩后用适量水溶解，依次以石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取，得到相应萃取物。二氯甲烷萃取物65.8 g经硅胶柱色谱分离（石油醚-丙酮梯度洗脱），共得到10个部份（Fr. 110）。Fr. 2经反复重结晶得到化合物9（124.6 mg）。Fr. 3经反复硅胶柱色谱分离纯化得化合物1（4.6 mg）。Fr. 5析出白色晶体，再经制备HPLC（甲醇：水 = 60：40）纯化得到化合物3（35.0 mg）和化合物11 (1

7、0.0 mg)。Fr. 10经反复重结晶得到化合物10（216.0 mg）。Fr. 6经反复硅胶柱色谱和葡聚糖凝胶色谱分离纯化得化合物4（105.1 mg），5（70.2 mg），12（35.0 mg）和16（38.1 mg）。Fr. 7经反复硅胶柱色谱和制备HPLC纯化得化合物2（7.6 mg），6（14.7 mg），13（3.2 mg）。Fr. 9经反复硅胶柱色谱和葡聚糖凝胶色谱分离纯化得化合物7（4.5 mg），8（4.6 mg），14（8.2 mg），15（60.0 mg）。3 结构鉴定化合物1：白色针状晶体（丙酮）；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.81(3H，s，H-

8、18)， 0.81(3H，d，J = 6.8 Hz，H-21)，0.83(3H，d，J = 7.5 Hz，H-27)，0.88(3H，s，H-19)，0.91(3H，d，J = 7.0 Hz，H-26)，1.00(3H，d，J = 6.5 Hz，H-28)，3.96(1H，m，H-3)，5.13(1H，dd，J = 15.5，8.0 Hz，H-22)，5.22(1H，dd，J = 15.5，7.5 Hz，H-23)，6.25(1H，d，J = 8.5 Hz，H-6)，6.51(1H，d，J = 8.5 Hz，H-7)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：34.6(C-1)，30.1(

9、C-2)，66.4(C-3)，36.9(C-4)，82.1(C-5)，135.4(C-6)，130.7(C-7)，79.4(C-8)，51.0(C-9)，36.9(C-10)，23.4(C-11)，39.3(C-12)，44.5(C-13)，51.6(C-14)，20.6(C-15)，28.6(C-16)，56.1(C-17)，12.8(C-18)，18.2(C-19)，39.7(C-20)，20.9(C-21)，135.2(C-22)，132.3(C-23)，42.7(C-24)，33.0(C-25)，19.9(C-26)，19.6(C-27)，17.5(C-28)。以上数据与文献报道的过氧

10、化麦角甾醇一致4。化合物2：白色粉末（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 215；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.82(3H，s，H-28)，1.07(3H，s，H-19)，1.21(3H，s，H-18)，1.26(3H，s，H-29)，1.40(1H，dd，J = 13.5，8.5 Hz，H-12)，1.79(1H，m，H-11)，1.80(3H，d，J =8.5 Hz，H-4)，1.78(3H，m，H-5)，1.90(s，3-OCOCH3)，2.14(1H，m，H-9)，2.16(1H，d，J =16.5 Hz，H-6b)，2.17(1H，m，H-12)，2.38(1H

11、，m，H-11)，2.39(1H，dd，J = 16.5，10.0 Hz，H-6a)，2.70(1H，d，J = 10.0 Hz，H-5)，2.97(1H，dd，J = 9.0，4.5 Hz，H-2)，3.70(3H，s，7-OCH3)，4.98(1H，s，H-17)，5.10(1H，d，J = 9.0 Hz，H-3)，5.56(1H，d，J = 4.5 Hz，H-30)，6.03(1H，s，H-15)，6.42(1H，s，H-22)，6.84(1H，m，H-3)，7.41(1H，s，H-23)，7.49(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：107.4(C-1)

12、，53.1(C-2)，74.0(C-3)，37.6(C-4)，40.8(C-5)，32.0(C-6)，174.0(C-7)，81.2(C-8)，51.5(C-9)，42.9(C-10)，14.8(C-11)，24.9(C-12)，39.0(C-13)，160.1(C-14)，117.4(C-15)，163.8(C-16)，81.5(C-17)，19.4(C-18)，20.9(C-19)，119.9(C-20)，141.2(C-21)，109.9(C-22)，142.8(C-23)，24.5(C-28)，21.9(C-29)，76.5(C-30)，51.9(7-OCH3)，166.9(C-1)，

13、127.8(C-2)，138.6(C-3)，11.9(C-4)，14.5(C-5)，170.2(3-OCOCH3)，20.4(3-OCOCH3)。以上数据与文献报道的xylocarpin G一致5。化合物3：白色针状晶体（丙酮）；UV (甲醇) lmax nm 215；HREI-MS m/z 582.2471 (calcd for M+ 582.2465)。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.97(3H，s，H-18)，1.03(3H，d，J = 5.0 Hz，H-19)，1.13(3H，s，H-29)，1.20(3H，s，H-28)，1.63(1H，m，H-12)，1.83(3H

14、，d，J = 7.5 Hz，H-4)，1.85(3H，s，H-5)，2.28(1H，m，H-6a)，2.30(1H，m，H-5)，2.30(1H，m，H-10)，2.47(1H，m，H-6b)，2.53(1H，m，H-11)，2.69(1H，m，H-12)，3.08(1H，dd，J = 17.5，7.0 Hz，H-11)，3.69(3H，s，7-OCH3)，3.89(1H，s，8-OH)，5.34(1H，s，H-17)，6.09(1H，s，H-15)，6.47(1H，s，H-22)，6.60(1H，s，H-30)，6.96(1H，m，H-3)，7.01(1H，s，H-3)，7.45(1H，s，

15、H-23)，7.56(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：198.8(C-1)，128.8(C-2)，161.9(C-3)，36.8(C-4)，45.2(C-5)，34.6(C-6)，173.4(C-7)，80.3(C-8)，208.8(C-9)，42.8(C-10)，33.0(C-11)，25.5(C-12)，38.3(C-13)，163.5(C-14)，118.4(C-15)，163.3(C-16)，80.1(C-17)，18.5(C-18)，11.6(C-19)，119.7(C-20)，141.4(C-21)，109.8(C-22)，143.2(C-23)

16、，27.9(C-28)，20.5(C-29)，67.5(C-30)，52.0(7-OCH3)，166.8(C-1)，127.7(C-2)，139.9(C-3)，12.1(C-4)，14.7(C-5)。以上数据与文献报道的xylocarpin H (在文献6中命名为granaxylocarpin B)一致5。化合物4：白色晶体（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 214；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.98(3H，s，H-18)，1.04(3H，d，J = 6.0 Hz，H-19)，1.12(3H，s，H-29)，1.21(3H，s，H-28)，1.65(1H，dd，J =

17、13.5，7.0 Hz，H-12)，2.11(3H，s，30-OCOCH3)，2.27(1H，m，H-6a)，2.28(1H，m，H-10)，2.29(1H，m，H-5)，2.47(1H，m，H-6b)，2.51(1H，m，H-11)，2.61(1H，m，H-12)，3.03(1H，dd，J = 19.5，6.0 Hz，H-11)，3.69(3H，s，7-OCH3)，3.89(1H，s，8-OH)，5.34(1H，s，H-17)，6.18(1H，s，H-15)，6.46(1H，d，J = 1.5 Hz，H-22)，6.54(1H，s，H-30)，7.00(1H，s，H-3)，7.44(1H，d

18、，J = 1.5 Hz，H-23)，7.55(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：198.8(C-1)，128.4(C-2)，162.0(C-3)，36.8(C-4)，45.2(C-5)，34.6(C-6)，173.4(C-7)，80.0(C-8)，208.6(C-9)，42.8(C-10)，33.0(C-11)，25.5(C-12)，38.4(C-13)，164.1(C-14)，118.2(C-15)，163.3(C-16)，80.1(C-17)，18.5(C-18)，11.6(C-19)，119.6(C-20)，141.4(C-21)，109.8(C-22)

19、，143.2(C-23)，27.8(C-28)，20.5(C-29)，67.4(C-30)，52.0(7-OCH3)，169.9(30-OCOCH3)，21.1(30-OCOCH3)。以上数据与文献报道的xylogranatin C一致7。化合物5：白色晶体（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 212；1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：0.78(3H，s，H-28)，0.89(3H，t，J =7.5 Hz，H-4)，1.06(3H，s，H-19)，1.05(3H，d，J =7.5 Hz，H-5)，1.21(3H，s，H-18)，1.24(3H，s，H-29)，1.38(1H，m，

20、H-3b)，1.42(1H，m，H-12)，1.64(1H，m，H-3a)，1.81(1H，m，H-11)，1.99(s，30-OCOCH3)，2.11(1H，m，H-12)，2.15(1H，m，H-9)，2.16(1H，d，J = 9.5 Hz，H-6b)，2.37(1H，m，H-11)，2.38(1H，dd，J = 16.0，9.5 Hz，H-6a)，2.64(1H，d，J = 9.5 Hz，H-5)，2.93(1H，dd，J = 9.5，4.5 Hz，H-2)，3.70(3H，s，7-OCH3)，5.00(1H，s，H-17)，5.08(1H，d，J = 9.0 Hz，H-3)，5.58

21、(1H，d，J = 4.0 Hz，H-30)，6.03(1H，s，H-15)，6.42(1H，s，H-22)，7.42(1H，s，H-23)，7.49(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：107.4(C-1)，53.3(C-2)，74.0(C-3)，37.4(C-4)，40.5(C-5)，32.1(C-6)，173.9(C-7)，81.3(C-8)，51.5(C-9)，42.9(C-10)，15.0(C-11)，25.1(C-12)，38.9(C-13)，159.4(C-14)，117.7(C-15)，163.7(C-16)，81.5(C-17)，19.5(C-

22、18)，20.5(C-19)，119.9(C-20)，141.2(C-21)，109.9(C-22)，142.9(C-23)，24.5(C-28)，21.7(C-29)，76.0(C-30)，51.9(7-OCH3)，175.9(C-1)，40.9(C-2)，26.5(C-3)，11.6(C-4)，16.4(C-5)，170.0(30-OCOCH3)，20.8(30-OCOCH3)。以上数据与文献报道的3-detigloyoxy-2-methylbutanoyloxy xylogranatin B一致8。化合物6：无色油状（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 237；1H-NMR（500

23、MHz，CDCl3）：1.08(3H，s，H-18)，1.10(3H，s，H-29)，1.15(3H，d，J = 6.5 Hz，H-19)，1.18(3H，s，H-28)，1.37(1H，m，H-12)，1.66(1H，ddd，J = 15.0，4.5，4.5 Hz，H-11)，1.79(1H，ddd，J = 15.0，15.0，4.0 Hz，H-11)，2.00(s，30-OCOCH3)，2.24(1H，m，H-12)，2.30(1H，m，H-6a)，2.31(1H，m，H-5)，2.41(1H，m，H-10)，2.49(1H，m，H-6b)，3.70(3H，s，7-OCH3)，3.78(1

24、H，s，9-OH)，5.52(1H，s，H-17)，6.27(1H，s，H-30)，6.36(1H，s，H-15)，6.50(1H，s，H-22)，7.01(1H，s，H-3)，7.45(1H，s，H-23)，7.61(1H，s，H-21)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：198.6(C-1)，130.2(C-2)，161.5(C-3)，36.7(C-4)，45.2(C-5)，34.7(C-6)，173.4(C-7)，200.9(C-8)，79.6(C-9)，43.1(C-10)，29.2(C-11)，28.3(C-12)，41.4(C-13)，156.2(C-14)，121.6

25、(C-15)，163.3(C-16)，81.3(C-17)，18.6(C-18)，12.2(C-19)，119.2(C-20)，141.4(C-21)，109.7(C-22)，143.3(C-23)，28.0(C-28)，20.5(C-29)，66.4(C-30)，52.0(7-OCH3)，168.8(3-OCOCH3)，20.7(3-OCOCH3)。以上数据与文献报道的xylogranatin D一致7。化合物 7：白色粉末（甲醇），UV (甲醇) lmax nm 212；ESI-MS m/z 477 M+H+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）：0.72(3H，s，H-18)，0.

26、79(3H，s，H-19)，0.80(3H，s，H-30)，0.89(3H，s，H-29)，0.89(3H，d，J = 6.5 Hz，H-21)，0.96(3H，s，H-28)，1.19(3H，s，H-26)，1.21(3H，s，H-27)，3.12(1H，br s，H-24)，4.01(1H，dd，J = 9.5，5.0 Hz，H-23)，5.22(1H，m，H-7)。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）：38.6(C-1)，29.4(C-2)，79.8(C-3)，40.0(C-4)，52.2(C-5)，22.5(C-6)，119.3(C-7)，146.9(C-8)，50.5(C-9

27、)，36.0(C-10)，17.3(C-11)，34.8(C-12)，44.8(C-13)，52.4(C-14)，35.1(C-15)，28.3(C-16)，55.3(C-17)，13.6(C-18)，19.5(C-19)，35.2(C-20)，19.3(C-21)，42.2(C-22)，69.9(C-23)，76.7(C-24)，74.8(C-25)，25.0(C-26)，27.0(C-27)，27.8(C-28)，15.4(C-29)，26.8(C-30)。以上数据与文献报道的hispidol B一致9。化合物 8：浅黄色针状结晶（二氯甲烷），1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：3

28、.96(3H，s，-OCH3)，6.15(1H，br s，7-OH)，6.27(1H，d，J = 9.5 Hz，H-3)，6.85(1H，s，H-5)，6.92(1H，s，H-8)，7.60(1H，d，J = 9.5 Hz，H-4)。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：161.4(C-2)，111.5(C-3)，144.0(C-4)，113.4(C-5)，143.3(C-6)，149.7(C-7)，103.2(C-8)，150.2(C-9)，107.5(C-10)，56.4(-OCH3)。以上数据与文献报道的东莨菪葶一致10。化合物 9：白色针状晶体（丙酮），mp 137 138 ，

29、Liebermann-Burchard 反应阳性，10%硫酸乙醇溶液显色为紫红色。与b-谷甾醇标准品薄层色谱对照，Rf值及显色行为均一致，且混合后熔点不下降，故确定为b-谷甾醇。化合物 10：白色粉末（甲醇），mp 288 290 （分解），Liebermann-Burchard 反应阳性，Molish反应阳性，10%硫酸乙醇溶液显色为紫红色。该化合物的NMR数据与文献报道的胡萝卜苷基本一致11，经与胡萝卜苷标准品薄层色谱对照，Rf值及显色行为均一致，且混合后熔点不下降，故确定为胡萝卜苷。化合物 11 白色晶体 (丙酮)，mp 172174 ，aD25 -27.9º (c 0.21，

30、MeOH)，UV (甲醇)lmax：212 nm，IR (KBr)nmax：3404，2984，2963，1722，1671，1369，1272，1245，1164，1151，1015 cm-1，HRFAB-MS m/z：570.2472，(calcd for M+ 570.2465)，确定分子式为C31H38O10，同时提示不饱和度为13。IR图谱显示，在3404和1722 cm-1 处有吸收峰，则表明羟基和酯基功能团的存在。由其1H NMR 和13C NMR 谱可知，13个不饱和度中有9个是由4个碳碳双键和5个羰基引起的，则其余的4个不饱和度推测可能是由4个环引起。从13C NMR 和 D

31、EPT图谱上可以观察到，化合物11有5个羰基，3个sp2 杂化的季碳原子，3个sp3杂化的季碳原子，5个sp2杂化的次甲基，5个sp3杂化的次甲基，3个sp3杂化的亚甲基和7个甲基（包括1个甲氧基）。另外，从NMR谱中还可以观察到柠檬苦素类化合物的特征吸收峰：2个酮基 (C 198.8和 208.7)；1个羟基峰 (H 3.87, s)；1个甲氧基峰 (H 3.69，s；C 52.0) 和一个呋喃环 (H 7.56，br s；7.45，br s和 6.47，br s；C 143.2，141.4，119.6 和 109.8)。以上的NMR数据和2D NMR（包括1H-1H COSY，HMQC和

32、HMBC）均表明，化合物11是一个B环开裂的墨西哥交酯类的柠檬苦素。将化合物11的NMR数据与9，10开裂的墨西哥交酯类的柠檬苦素类化合物xylogranatin C12 的NMR数据进行对照，两个化合物的数据基本吻合，唯一不同的是在化合物11的C-30位存在一个异丁酰基基团H 2.56 m，1.18 (d，J = 7.0 Hz)，1.16 (d，J = 7.0 Hz)；C 175.9，34.1，19.2，18.5，而xylogranatin C的C-30位是一个乙酰基。另外，HMBC谱中的H-30 (H 6.48，s)与C-1 (C 175.9)的相关可以证明该异丁酰基存在于C-30位。NO

33、ESY谱可以帮助推测化合物11的立体构型，H-30与H-11 (H 3.05，dd，J = 19.5，6.5 Hz)，H-12 (H 2.62，ddd，J = 14.0，14.0，7.0 Hz)的相关峰，以及H-17 (H 5.34，s)与H-12的相关峰可知H-30与H-17均为-构型。由于从1H NMR中可以观察到8-OH在H 3.87出现尖锐单峰，并且与18-Me(H 0.98，s)有强烈的NOESY相关，表明8-OH为a-构型。同时，H-5(H 2.27，m)与19-Me(H 1.04，d，J = 5.5 Hz)的NOESY相关可以证明这两个质子处在同一平面。通过以上分析可知化合物11

34、与xylogranatin C有着相同的骨架构型。因此，化合物11的结构确定为30-去乙酰基-30-异丁酰基-xylogranatin C，该化合物为新化合物，命名为xylomexicanin A，其结构式见图1，1D及2D NMR数据见表1。化合物12 白色针状晶体 (甲醇)，mp 236238 ，EI-MS m/z 472。1H-NMR (500 MHz，CDCl3) ：0.82(3H，s，H-18)，0.85(3H，d，J = 6.5 Hz，H-21)，1.01(3H，s，H-19)，1.04(6H，s，H-28，30)，1.12(3H，s，H-29)，1.22(6H，s，H-26，27

35、)，1.36(1H，m，H-16b)，1.46(1H，dd，J = 14.5，8.5 Hz，H-1a)，1.51(2H，dd，J = 18.0，8.0 Hz，H-15)，1.56(2H，m，H-11)，1.62(1H，m，H-12b)，1.65(1H，m，H-20)，1.72(1H，t，J = 8.5 Hz，H-5)，1.86(1H，m，H-17)，1.87(1H，m，H-12a)，2.00(1H，m，H-1b)，2.03(1H，m，H-16a)，2.09(2H，m，H-6)，2.24(1H，dt，J = 14.5，5.5Hz，H-2a)，2.28(1H，m，H-9)，2.76(1H，dt，J

36、 = 14.5，5.5Hz，H-2b)，3.67(1H，t，J = 5.5 Hz，H-24)，3.83(1H，d，J = 6.0 Hz，H-22)，3.98(1H，dd，J = 6.0，5.5 Hz，H-23)，5.31(1H，d，J = 3.0 Hz，H-7)。13C-NMR (125 MHz，CDCl3) ：38.6(C-1)，35.0(C-2)，217.1(C-3)，47.9(C-4)，52.4 (C-5)，24.3(C-6)，117.8(C-7)，146.0(C-8)，48.5(C-9)，34.9(C-10)，18.3(C-11)，33.5(C-12)，43.5(C-13)，51.2(

37、C-14)，34.0(C-15)，27.8(C-16)，49.3(C-17)，21.8(C-18)，12.8(C-19)，37.5(C-20)，12.4(C-21)，83.7(C-22)，72.9(C-23)，77.4(C-24)，80.9(C-25)，27.7(C-26)，21.3(C-27)，24.5(C-28)，21.6(C-29)，27.6(C-30)。以上数据与文献报道的odoratone13,14数据基本一致。化合物13 白色晶体 (甲醇)，aD25 -21.0º (c 0.12， MeOH)，UV (甲醇) lmax：215 nm，IR (KBr)nmax：3432，2

38、967，1723，1599，1383，1026 cm-1。HRFAB-MS m/z 570.2833，(calcd for M+ 570.2829)，确定分子式为C32H42O9，提示该化合物不饱和度为12。IR图谱在3432，2967和1723 cm-1处有吸收，表明分子结构中存在羟基基团，碳碳双键和羰基基团。由1H NMR和13C NMR谱可知，12个不饱和度中有7个是由3个碳碳双键和4个羰基（1个酮基碳和3个酯基碳）引起的，则其余的5个不饱和度推测是由5个环引起的。13C NMR中显示有32个碳信号，其中有7个甲基（包括1个甲氧基），5个亚甲基，10个次甲基（包括4个烯碳）和10个季碳（

39、包括4个羰基碳）。另外，NMR数据还显示分子结构中有如下基团：1个酮羰基(C 217.4)，1个甲酯基(H 3.72, s；C 52.1，173.9)和1个呋喃环H 7.51，br s；7.44，br s；6.50，br s；C 143.1，141.7，119.8，110.4。从NMR和2D NMR（包括1H-1H COSY，HMQC和 HMBC）数据中可推测，化合物13是一个正常的墨西哥交酯（含有一个14,15双键）类柠檬苦素。将化合物13与xylogranatin A15的NMR数据进行比较，可知化合物13中的2'-甲基丁酰基H 2.48，m；1.73，m；1.48，m；0.97，

40、(t，J = 7.0 Hz)；1.20，(d，J = 6.5 Hz)；C 175.4，41.3，26.6，11.7，16.8 代替了xylogranatin A中的异丁酰基基团。根据H-3的化学位移 (H 4.91，d，J = 8.0 Hz)可确定2'-甲基丁烷基与C-3相连。根据C-8的化学位移 (C 72.7)可以推测出羟基在C-8位。该化合物的立体构型可以参考xylogranatin A来确定。在NOESY谱中可以找到H-3与29-Me的明显相关，而不是H-3与H-5或H-3与H-30b的相关，由此可确定H-3为a-构型。H-9 (H 1.83，d，J = 13.0 Hz)与18

41、-Me (H 1.29，s)的明显NOESY相关，可以推测出H-9与18-Me均为a-构型。同理，H-30b (H 3.18，dd，J = 6.5，15.0 Hz)与H-5 (H 3.48，d，J = 8.5 Hz)的NOESY相关说明H-30与H-5为顺式结构。参考已知的墨西哥交酯类化合物，可知8-OH均为a-构型。根据以上的分析结果可确定化合物13的结构如附图1所示，此化合物为新化合物，命名为xylomexicanin B。1D 及2D NMR数据见表2。化合物14 白色粉末 (丙酮)，mp 184186 。1H-NMR (500 MHz，DMSO-d6) ：0.91(3H，s，H-18)

42、，0.98(3H，s，H-28)，1.00(3H，s，H-29)，1.04(6H，s，H-27, 30)，1.09(6H，s，H-19, 26)，1.50(1H，m，H-12a)，1.58(1H，m，H-6b,11b)，1.64(1H，m，H-22b)，1.78(1H，m，H-12b)，1.79(1H，m，H-17)，1.84(1H，m，H-22a)，1.85(1H，m，H-16a)，1.88(1H，m，H-6a)，1.89(1H，m，H-11a)，1.97(1H，m，H-20)，2.04(1H，m，H-16b)，2.10(1H，m，H-9)，2.28(1H，d，J = 11.5 Hz，H-5

43、)，2.96(1H，d，J = 5.0 Hz，H-24)，3.86(1H，s，H-7)，4.34(1H，t，J = 8.0 Hz，H-23)，5.15(1H，t，J = 4.5 Hz，H-21)，5.33(1H，br s，H-15)，5.71(1H，d，J = 10.0 Hz，H-2)，7.24(1H，d，J = 10.5 Hz，H-1)。13C-NMR (125 MHz，DMSO-d6) ：160.0(C-1)，124.4(C-2)，204.0(C-3)，43.6(C-4)，44.2 (C-5)，25.5(C-6)，70.6(C-7)，43.7(C-8)，36.4(C-9)，39.8(C-1

44、0)，15.9(C-11)，33.2(C-12)，45.9(C-13)，159.6(C-14)，118.6 (C-15)，34.7(C-16)，52.7(C-17)，19.7(C-18)，18.8(C-19)，44.6(C-20)，95.7(C-21)，31.8(C-22)，76.4(C-23)，77.3(C-24)，71.4(C-25)，28.2(C-26)，24.7(C-27)，21.3(C-28)，26.9(C-29)，27.6(C-30)。以上数据与文献报道的piscidinol G16数据基本一致。化合物15 白色粉末 (丙酮)，mp 117119 。ESI-MS m/z 545 M

45、+H+。1H-NMR (500 MHz，CDCl3) ：0.97(3H，s，H-19)，1.07(6H，s，H-18，28)，1.17(3H，d，J = 3.5 Hz，H-27)，1.21(3H，s，Me)，1.28(3H，s，H-26)，1.43(3H，s，Me)，1.52(1H，m，H-12b)，1.60(1H，m，H-17)，1.67(2H，m，H-22)，1.72(1H，m，H-11b)，1.78(1H，m，H-11a)，1.80(1H，m，H-6b)，1.92(1H，m，H-12a)，1.95(3H，s，7-OCH3)，1.96(1H，m，H-6a)，2.00(1H，m，H-16b)

46、，2.12(1H，m，H-20)，2.14(1H，m，H-9)，2.17(1H，m，H-16a)，2.20(1H，m，H-5)，3.15(1H，br s，23-OH)，3.63(1H，t，J = 11.0 Hz，H-21a)，3.84(1H，dd，J = 4.0，11.0 Hz，H-21b)，3.88(1H，br s，H-23)，5.22(1H，br s，H-7)，5.29(1H，d，J = 2.5 Hz，H-15)，5.86(1H，d，J = 10.0 Hz，H-2)，7.17(1H，d，J = 10.0 Hz，H-1)。13C-NMR (125 MHz，CDCl3) ：158.2(C-1)

47、，125.5(C-2)，204.7(C-3)，44.1(C-4)，46.1 (C-5)，23.8(C-6)，74.6(C-7)，42.7(C-8)，38.5(C-9)，39.8(C-10)，16.7(C-11)，33.9(C-12)，46.5(C-13)，158.7(C-14)，119.2 (C-15)，34.5(C-16)，57.1(C-17)，21.1(C-18)，19.1(C-19)，30.9(C-20)，65.4(C-21)，34.9(C-22)，67.5(C-23)，95.9(C-24)，76.3(C-25)，23.1(C-26)，24.4(C-27)，21.3(C-28)，27.0

48、(C-29)，27.3(C-30)，170.1(-OCOCH3)，19.9(-OCOCH3)。以上数据与文献报道的spicatin17数据基本一致。化合物16 白色晶体 (甲醇)，mp 265267 。1H-NMR (500 MHz，CDCl3) ：1.13(3H，s，H-29)，1.14(3H，s，H-18)，1.16(3H，s，H-28)，1.26(3H，s，H-30)，1.36(3H，s，H-19)，1.48(1H，m，H-12a)，1.80(1H，m，H-11a)，1.84(1H，m，H-12b)，2.00(1H，m，H-11b)，2.17(1H，d，J = 3.0 Hz，H-5)，2

49、.22(1H，d，J = 11.5 Hz，H-9)，2.42(1H，dd，J = 14.0，3.0 Hz，H-6a)，2.95 (1H，t，J = 14.0 Hz，H-6b)，3.87(1H，s，H-15)，5.47(1H，s，H-17)，5.94(1H，d，J = 10.0 Hz，H-2)，6.36(1H，s，H-22)，7.11(1H，d，J = 10.0 Hz，H-1)，7.40(1H，d，J = 1.5 Hz，H-23)，7.42(1H，s，H-21)。13C-NMR (125 MHz，CDCl3) ：155.9(C-1)，126.4(C-2)，203.2(C-3)，45.2(C-4)

50、，54.6 (C-5)，36.7(C-6)，208.1(C-7)，53.4(C-8)，47.6 (C-9)，39.6(C-10)，17.2(C-11)，32.2(C-12)，37.7(C-13)，65.5(C-14)， 53.6 (C-15)，166.8(C-16)，77.9(C-17)，20.9(C-18)，19.8(C-19)，120.2(C-20)，141.0(C-21)，109.8(C-22)，143.1(C-23)，26.9(C-28)，20.6(C-29)，17.4(C-30)。以上数据与文献报道的7-deacetyl-7-oxogedunin18数据一致。4 细胞毒活性筛选将He

51、la，KT，HLE细胞悬浮接种于96孔板，每孔50 L（1 ×104 个细胞/mL）， 分别加入磷酸盐缓冲液（PBS）、阳性对照顺铂（Cisplatin，终浓度0. 5% DMSO）和终浓度为10、1和0. 1mol/L的样品各50L，每组均设3复孔，置于饱和湿度、37 、5%CO2 培养箱中培养72 h。于培养结束前4 h，各培养孔加入5 mg/mL四氮唑盐（MTT）10L。培养结束后，弃去培养上清，每孔加入15% SDS 100 L，过夜。次日用酶联免疫检测仪测定各孔吸光度值（OD值），测定波长= 570 nm，参考波长 = 630 nm，并计算抑制率。其计算公式为：抑制率（%

52、）=（对照组OD值-实验组OD值）/对照组OD值×100。Table 3 Antiproliferative activities of isolates from Xylocarpus granatum Cell linesaCompounds/ED50 (mM)341114CisplatinHeLa30.001.8130.0030.0020.31KT30.001.594.5930.007.43HLE2.633.6830.0014.1130.00a HeLa = 子宫颈癌细胞; HLE = 肝癌细胞; KT = 乳腺癌脑转移细胞5 讨论 通过研究我们从木果楝种子中分离得到8个柠檬苦

53、素和4个前柠檬苦素。其中柠檬苦素11和13为新化合物，前柠檬苦素7，12和14在木果楝属植物中首次发现，这些化合物的发现对木果楝属植物的分类具有一定意义。同时，MTT的研究结果表明上述分离得到的8个柠檬苦素中只有9,10-开裂的墨西哥交酯型柠檬苦素对人肿瘤细胞株Hela，KT，HLE显示出不同程度的抑制作用，尤其是4对上述三种肿瘤细胞株均显示出很强的抑制作用。通过结构与活性的比较，我们发现，对于9,10-开裂的墨西哥交酯型柠檬苦素来说，C-30位上羟基氢的取代基较小的活性较好。而分离得到的4个前柠檬苦素中只有14显示了较强的抑制HLE细胞株的作用，提示其活性可能与C-17位上取代基的结构有关。

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