血吸虫病的免疫学检验方法分析

1、血吸虫病的免疫学检验方法分析关键词 血吸虫病；免疫学检验；细胞 在血吸虫病的免疫学诊断中，除试用过几乎所有的各种免疫学检验方法外，还有以血吸虫尾蚴和虫卵作为抗原的尾蚴膜试验和环卵沉淀试验。敏感性、特异性较高且使用广泛的主要的试验方法有皮内试验、环卵沉淀试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验。 1 资料与方法 1.1 一般资料 为型变态反应试验。当经皮内注入血吸虫抗原时，抗原与相应IgE抗体结合，引起肥大细胞和嗜碱粒细胞脱颗粒，释放组织胺使毛细血管扩张，血管壁通透性增强，出现丘疹和红晕等反应。成熟虫卵内毛蚴的分泌排泄物具有良好的抗原性，它从虫卵内渗出后；如与血吸虫感染者的血清作用时，可在虫卵周围形

2、成特异性沉淀物。用可溶性血吸虫卵抗原致敏的绵羊红细胞与患者血清中的相应抗体，可呈现凝集反应。同间接ELISA，用日本血吸虫卵可溶性抗原包板，检测血清标本中的抗体。 1.2 方法 有2种。一种为18 000成虫干粉冷热浸抗原，另一种为13 000新鲜成虫匀浆抗原。按无菌操作用结核菌素注射器，26号皮试针头于受试者前臂屈侧面注入血吸虫抗原0.03 ml。亦可用一直径0.5 cm的印章在前臂做一印记，注入抗原布满整个圆面积，注射量相当于0.03 ml。15 min后观察结果，测量丘疹的最大直径，凡等于或大于0.8 cm即为阳性反应1。 国内有成品供应。 国内有相应的供应。操作方法：严格按试剂盒说明书

3、操作。用微量滴管加4滴（25 l/滴）0.9%氯化钠溶液于U型微量血凝板第一排、第二孔内，第三孔空白，第四孔加1滴。第一孔内加待检血清，混匀，从中吸取血清1滴加入第二孔内，充分混匀后吸出2滴，于第三孔和第四孔各加1滴，在第四孔混匀后弃去1滴，使第三孔和第四孔血清稀释度为15和110。将冻干致敏红细胞试剂按说明书用蒸馏水稀释后；用定量吸管吸取致敏红细胞悬液，于第三孔和第四孔各加1滴（25/l），立即旋转震摇2 min，室温下静置1 h左右，观察结果。判读标准同一般间接血凝试验，以血清大于或等于110稀释出现阳性反应判为血吸虫病患者。 包被抗原，国内有成品供应。其余试剂同一般ELISA。操作方法：

4、同间接ELISA，原则上用13 000稀释的1%日本血吸虫可溶性虫卵粗抗原包被聚苯乙烯板，每孔200 l，置4过夜，洗涤后，分别加用吐温-PBS作1200稀释的血清标本，阴、阳性参考血清每孔200 l。每个标本至少作双份。对照组不加血清，仅加PBS吐温，保温洗涤后，加适当稀释的酶标记抗人IgG，每孔200 l。再经保温洗涤后，按常规加底物显色后，用酶标比色计，读取A492值。以4份邻苯二胺（OPD）底物及1份2 mol/L硫酸的混合液校正零点3。 2 结果 加入虫卵数量要适当，虫卵过多或过少对反应结果都有一定影响。计算虫卵时，均不计未成熟卵和破卵。检验每批血清标本，应同时做一阳性血清对照。本试

5、验可用于滴血滤纸代替血清进行反应；但将血滴洗脱时，血液被稀释反应强度因而下降。在我国一般不推荐干血滤纸方法乙目前有采用热处理超声干卵，PVC薄膜片环卵反应以及双面胶纸条环卵反应等。 3 讨论 皮内试验的临床意义：本试验具有较高敏感性。粪检阳性者皮试阳性率95%左右，健康人的假阳性反应为2%3%。与肺吸虫的交叉反应为7%15%，儿童有时出现假阴性反应。本试验一般作为一种普查过筛方法，阳性者再做进一步的检查。对低年龄组人群进行皮内试验可检查有无新感染，和用以考核防治效果。临床上对无血吸虫病史的疑似血吸虫患者，可先用皮内试验作为辅助诊断，如皮内试验阳性再考虑进一步确诊。患者治愈后，在较长时间内皮内试

6、验始终保持阳性反应，因此该法不能用于考核疗效。环卵沉淀试验的临床意义：患者阳性率平均为97.3%（94.1%100.0%），假阳性率平均为3.1%（2.5%5.6%），对华支睾吸虫病和丝虫病患者血清有0.5%严重的交叉反应，肺吸虫患者的交叉反应为6.4%。患者接受有效治疗后，环卵反应强度逐渐下降。在流行区，人群环卵反应阳性率的变化可作为评价治疗效果，但反应阴转需时较长。 间接血凝试验的临床意义：本法敏感性在93%左右，假阳性率约为2%，肺吸虫病患者血清可出现交叉反应，治疗后本法阴转亦较缓慢。 酶联免疫吸附试验的临床意义：粪检虫卵阳性者的检出率为97%100%，正常人假阳性率为2%3%。与一般常

7、见寄生虫无明显交叉反应。用本法检测曼氏血吸虫患者时，发现与旋毛虫有明显交叉反应。 检测血吸虫的各种试验成为临床辅助诊断的有效手段，在流行病学调查中尤具重要作用。 参考文献 1邹安琪,周东伟,江志群,等.脑血吸虫病的免疫诊断与治疗J.江西医学院学报,2001,45(1):116-117. 2孙骏谟,田志雄,张在鹏,等.脑血吸虫病CT分型探讨J.临床放射学杂志,1999,17(9):523-525. 3吴文泽,杜新华.螺旋CT延迟重复扫描对脑血吸虫性肉芽肿的诊断价值(附49例分析)J.实用放射学杂志,2002,17(7):574-575. 4赵纯明,况小波.非限盐结合中药治疗晚期血吸虫病难治性腹腔积液的疗效观察J.中国医药导报,2009,7(26):27.