药品包装材料与b型流感嗜血杆菌结合疫苗相容性研究.docx

1、论著药品包装材料与b型流感嗜血杆菌结合疫苗相容性研究钱秋娟，赵小洁，马庆华，蒋井明，魏然，陈刚，傅林锋(兰州生物制品研究所有限责任公司，兰州730046)摘要：目的考察不同组合的内包装材料对Hib结合疫苗的影响，选出最适合的包装材料。方法对所选药品包装材料按照生产厂家的不同来搭配，共得到12种组合，根据相容性试验设计，将样品置于25±2X.环境下，分别在1、2、3、6个月时取样，进行pH值、内毒素、不溶性微粒3个项目的检测。结果对pH值、内毒素含嵬:、不溶性微粒检测数据进行分析，选出了对Hib结合疫苗影响最小的包装材料组合C+Y组。结论一个适宜的包装内环境对产品的稳定性十分重要。关键

2、词：相容性试验;包装材料;b型流感嗜血杆菌结合疫苗中图分类号：R378.4-1文献标志码：A文章编号：】0055673(2012)05-0042-05StudyoncompatibilityinbetweenpackagingmaterialsandHaemophilusinfluenzaetypebconjugatevaccineQIANQiu-juan,ZHAOXiao-jie,MAQing-hua,JIANGJing-ming,WEIRan,CHENGang,FULin-feng(LanzhouInstituteofBiologicalProductsCo.Ltd,Lanzhou7300

3、46,China)Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsinbetweenthecombinationsfordifferentpackagingmaterials(groups)andHaemophilusinfluenzaetypebconjugatevaccine(Hibvaccine),selecttheoptimalpackagingmaterialsinpackagingofthevaccine.Methods12combinationgroupswereselectedbasedonmaterialsfromdifferentmanufacture

4、rs,thesampleswerekeptat25±2,samplingtestswereperformedaftersamplesstoredfor1,2,3,6months,respectively,andthepH,endotoxinandinsolableparticlesweredeterminated.ResultsThegroupC+Ywasselected,whichhadthesmallestinfluenceuponpackagedHibvaccineaccordingtoanalysisofthedeterminations.ConclusionAsuitabl

5、einnerenvinm-mentforpackagingiscrucialtothestabilityforHibvaccine.Keywords:Testforcompatibility;Packagingmaterials;Hibconjugatevaccine相容性试验是考察药品包装材料与药物之间是否发生迁移或吸附等现象进而影响药物质量而进行的一种试验，该试验的目的是为筛选出适宜的药品包装材料提供数据支持。b型流感嗜血杆菌结合疫苗（简称Hib结合疫苗）是将b型流感嗜血杆菌荚膜多糖与具有载体效应的蛋白质分子通过化学方法连接起来的液体疫苗，多年来，它在预防婴幼儿Hib侵袭性疾病方面效果和安

6、全性显著。为保证该疫苗在贮存和使用期间质量的稳定性，我们选用4个厂家的西林瓶和3个厂家的丁基胶塞对拟包装的收稿日期：2012-0610;修回日期：2012-07-25作者简介:钱秋娟（1963-）女，医学生物学工程师，主要从事生物制品的质量控制工作。同一批疫苗进行相容性试验，以考察不同组合的内包装材料对Hib结合疫苗pH、内毒素、不溶性微粒的影响，从中选择出最适合的包装材料C1材料和方法1.1材料1.1.1试验材料b型流感嗜血杆菌结合疫苗由兰州生物制品研究所有限责任公司提供;西林瓶由4个不同玻璃制品生产厂家提供（简称为A、B、C、D）;丁基胶塞由3个不同胶塞生产厂家提供（简称为X、Y、Z）。以

7、上4种西林瓶和3种胶塞均符合国食药监注2003389号国家药品包装材料标准。1.1.2仪器设备雷磁PHS-3C型pH计购自上海精密科学仪器有限公司；BET-72细菌内毒素测定仪为天津市天大天发科技有限公司产品;GWF-8JA微粒分析仪购自天津天河医疗仪器有限公司。1.1.3试剂标准细菌内毒素由中国食品药品检定研究院提供;鲨试剂购自湛江安度斯生物有限公司。1.2方法1.2.1实验设计按照Hib结合疫苗分装生产工艺规程，在正常生产的过程中利用同一批制品、4种不同厂家的西林瓶及3种不同厂家的胶塞，分别进行灌装、压塞，并做标识，最后轧盖。4种不同的西林瓶及3种不同的胶塞诃以有12种组合方式，即得到12

8、批次的制品，见表1。制品分装后按照中华人民共和国药典二部附录2010年版原料药与药物制剂稳定性试验指导原则和药品包装材料与药物相容性试验指导"的要求进行加速试验，以了解上述不同组合的包装材料分装后对b型流感嗜血杆菌结合疫苗质量的影响程度。1.2.2实验过程1.2.2.1分装前样品检测按照Hib结合疫苗质量标准要求，对分装前所留样品pH、内毒素含量、不溶性微粒数进行检测。表1试验分组Tab.1Theexperimentgroups序号批号西林瓶胶塞组合号1S20110501AXA+X2S20)10502BXB+X3S20110503CXC+X4S20H0504DXD+X5S201105

9、05AYA+Y6S20110506BYB+Y7S20110507CYC+Y8S20110508DYD+Y9S20110509AZA+Z10S20110510BZB+Z11S20110511CZC+Z12S201105120ZD+Z1.2.2.2加速试毁将分装后的12组制品倒置在温度（25±2）Y环境中，在试验第1月末、2月末、3月末和6月末分别取样一次,进行上述项目检测。2结果2.1对于pH值数据的分析2.1.1同一厂家的胶塞与不同厂家的西林瓶的组合组合后的试验数据见表2。对于使用X胶塞的样本，标准差在X、Y、Z3个分组中最小，为0.18,表明其波动最小;且平均值为6.59,接近初始

10、pH。对于使用Y胶塞的样本,虽然标准差并不是最小的，为0.22。但与C西林瓶搭配时,pH波动幅度最小，其标准差仅为0.07,为12个样本中最小者,故可认为该种搭配为pH测试样本中的最优组合0对于使用z胶塞的样本，从其波动情况看，该组样本稳定性最差，其标准差为0.25,且平均值为6.71,偏离初始值最远。综上所述,按胶塞分组对pH的影响情况来看，X胶塞表现最好，其次为Y和Z。2.1.2同一厂家的西林瓶与不同厂家的胶塞的组合组合后的试验数据见表3。对于使用A西林瓶的样本,与3种胶塞搭配pH波动幅度较大（标准差为0.29），表明其在检测期不稳定。对于使用B西林瓶的样本，波动幅度小，稳定性在4组样本中

11、最好（标准差0.15）o对于使用C西林瓶的样本，稳定性较好（标准差0.16），旦平均值是6.54,在4个分组中最接近初始pHo对于使用D西林瓶的样本，标准差为0.31,是4个分组中的最大值;且平均pH为6.76,为4组中偏离初始值最大者。综上所述，按西林瓶分组对pH影响的总体情况来看,pH波动相对平稳的西林瓶是B和C,其次为A和D。在胶塞与西林瓶的12种搭配中，S20110507（C+Y）组合在pH检测项目中表现最优，波动最为平稳，而且平均值与初始pH极为接近。2.2对于内毒素数据的分析2.2.1同一厂家的胶塞与不同厂家的西林瓶的组合组合后的试验数据见表2。对于使用X胶塞的样本，标准差为3.8

12、9,从其波动情况看，该组样本稳定性在3个分组中最差。对于使用Y胶塞的样本，标准差为2.17,内毒素波动幅度最小,稳定性最好。表2按不同生产厂家的胶蹇进行分组后数据汇总Tab.2Summarizeddatefromthegroupingofdifferentrubberclosuremadebythedifferentmanu/acturerspH内毒素含量直径A10"的微粒数直径25pn的微粒数组合号01236标准差01236标准差1236标准菱1236标准差A+X6.507.036.256.806.400.327.584.671.650.67L012.955.4018.105.60

13、22.508.730.802.500.602.801.14B+X6.506.886.566.816.310.235.253.901.400.630.232.198.7011.206.5030.9011.220.400.900.607.803.59C+X6.506.486.576.436.260.124.3710.651.130.852.014.0719.1016.803.709.307.064.502.801.201.201.58D+X6.506.946.826.856.5!0.206.6119.722.001.071.687.861.2022.1025.0023.7011.260.004.3

14、04.300.902.25均值6.506.836.556.726.370.185.959.741.540.801.233.898.6017.0510.2021.606.061.432.631.673.】80.82A+Y6.507.406.696.576.280.436.504.171.630.942.172.268.7012.5014.3015.002.820.002.100.600.900.88B+Y6.506.806.686.506.620.135.965.061.802.540.632.245.4030.3015.0011.5010.600.409.603.401.504.11SY6.5

15、06.636.596.606.460.077.065.673.651.462.762.2513.709.307.805.303.531.603.701.200.601.35D+Y6.507.306.626.926.490.345.545.862.130.831.872.298.307.806.8096.5044.440.802.102.8011.504.87均值6.507.036.646.656.460.226.265.192.301.441.862.179.0214.9710.9732.0710.500.704.372.003.631.65A+Z6.506.896.597.176.540.2

16、95.4312.202.561.472.234.4160.8012.808.4021.2023.938.703.400.601.503.63B+Z6.506.676.797.056.500.234.041.111.010.391.431.424.1020.308.4013.406.960.005.000.901.502.19C+Z6.506.986.966.256.330.359.423.180.870.630.643.777.0023.708.1019.008.210.405.300.001.802.41D+Z6.507.156.847.226.200.433.852.311.630.581

17、.171.254.1013.1013.4016.205.260.402.805.000.802.11均值6.506.926.806.926.390.255.684.701.520.771.372.2219.0017.479.5717.454.262.374.131.631.401.24注:表头中1、2、3、6分别指试验第1月末、第2月末、第3月末、第6月末，表3同。表3按不同生产厂家的西林瓶进行分组后数据汇总Tab.3SummarizeddatefromthegroupingofdifferentvialmadebythedifferentmanufacturerspH内毒素含It直径N10&

18、#187;un的微敦数直径m25|un的微粒数组合号01236标准差01236标准差1236标准差1236标准差A+X6.507.036.256.806.400.327.584.671.650.671.012.955.4018.105.6022.508.730.802.500.602.801.14A+Y6.507.406.696.576.280.436.504.171.630.942.172.268.7012.5014.3015.002.820.002.100.600.900.88A+Z6.506.896.597.176.540.295.4312.202.561.472.234.4160.80

19、12.808.4021.2023.938.703.400.601.503.63均值6.507.116.516.856.410.296.507.011.951.031.802.8524.9714.479.4319.576.683.172.670.601.731.13B+X6.506.886.566.816.310.235.253.901.400.630.232.198.7011.206.5030.9011.220.400.900.607.803.59B+Y6.506.806.686.506.620.135.965.061.802.540.632.245.4030.3015.0011.5010.6

20、00.409.603.401.504.11B+Z6.506.676.797.056.500.234.041.111.010.391.431.424J020.308.4013.406.960.005.000.901.502.19均值6.506.786.686.796.480.155.083.361.401.190.761.826.0720.609.9718.606.920.275.171.633.602.16C+X6.506.486.576.436.260.124.3710.651.130.852.014.0719.1016.803.709.307.064.502.801.201.201.58C

21、+Y6.506.636.596.606.460.077.065.673.651.462.762.2513.709.307.805.303.531.603.701.200.601.35C+Z6.506.986.966.256.330.359.423.180.870.630.643.777.0023.708.1019.008.210.405.300.001.802.41均值6.506.706.716.436.350.166.956.501.880.981.802.8613.2716.66.5311.24.212.173.930.801.201.39D+X6.506.946.826.856.510.

22、206.6119.722.001.071.687.861.2022.1025.0023.7011.260.004.304.300.902.25D+Y6.507.306.626.926.490.345.545.862.130.831.872.298.307.806.8096.5044.440.802.102.8011.504.87D+Z6.507.156.847.226.200.433.852.311.630.581.171.254.1013.1013.4016.205.260.402.805.000.802.11均值6.507.136.767.006.400.315.339.301.920.8

23、31.573.534.5314.3315.0745.4717.740.403.074.034.401.80对于使用z胶塞的样本，其标准差为2.22,稳定性较好。与D西林瓶搭配时，其标准差为1.25,为12个样本中最小。按胶塞分组对内毒素影响的总体情况看,Y胶塞指标表现的最好,其次为Z和X。2.2.2同一厂家的西林瓶与不同厂家的胶塞的组合组合后的试验数据见表3。对于使用A西林瓶的样本，就其搭配3种胶塞的总体内毒素变化而言,波动幅度较小（标准差为2.85）0对于使用B西林瓶的样本，标准差为1.82,波动幅度最小，稳定性在4组样本中最好。对于使用C西林瓶的样本，稳定性较好（标准差2.86）0对于使用

24、D西林瓶的样本，标准差为3.53,是4组中最大值,波动幅度最大，稳定性在4组样本中最差。综上所述,按西林瓶分组对内毒素影响的总体情况来看，最好的西林瓶是B，其次为A、C和Do2.3对微粒直径（10呻）和（25呻）数据的分析2.3.1同一厂家的胶塞与不同厂家的西林瓶的组合组合后的试验数据见表2。对于使用X胶塞的样本，微粒直径（N10呻）和（225网）标准差分别为6.06和0.82,稳定性较好。对于使用Y胶塞的样本，从其波动情况看，该组样本稳定性最差，其标准差分别为10.50和1.65,是3组中最大者。但它与A西林瓶搭配时，微粒数波动幅度最小（2.82和0.88）,在12个样本中表现最好。对于使用

25、Z胶塞的样本，微粒直径（N10jim）和（"25叩1）标准差分别为4.26和1.24,稳定性较好。综上所述,就按胶塞分组对不溶性微粒影响的总体情况来看,X、Z胶塞指标均好于Y胶塞。2.3.2同一厂家的西林瓶与不同厂家的胶塞的组合组合后的试验数据见表3。对于使用A西林瓶的样本，微粒直径（N10呻）和（N25呻）标准差分别为6.68和1.13,稳定性较好。对于使用B西林瓶的样本，标准差分别为6.92和2.16,从其波动情况看，该组样本稳定性较差。对于使用C西林瓶的样本，微粒直径（N10呻）和（25呻）标准差分别为4.21和1.39,在4个分组中相对较好。对于使用D西林瓶的样本，标准差分别

26、为17.74和1.80,从其波动情况看，该组样本稳定性也较差。按西林瓶分组对不溶性微粒影响的总体情况来看,波动相对较平稳的西林瓶是C和A,其次为B和D。就12种搭配而言,S20110505（A+Y）在不溶性微粒检测项目中表现最优，波动最为平稳。2.43种检测指标综合比较得出最优组合根据标准差的统计数据，将pH值与内毒素含量2个检测指标的12个组合的标准差数据按照由低到高的顺序排列，并依次给出分值（121分）；不溶性微粒检测包含N10am和"25jun2项，给2个项目赋予相等的权重，该指标评分为此两项评分相加后的均值。将同一组合的3项检测项目分值相加，可以得出西林瓶和胶塞搭配的初步结果

27、（见表4）。评分最高的应为最佳组合，为C+Y组。表412个组合的标准差结果评分Tab.4Scoringresultsofthestandarddeviationin12combinationgroups组合号C+YB+ZC+XB+YD+ZB+XA+YA+XD+XC+ZD+YA+Z分值30.52622.522.522212018.514.5131110.53讨论胶塞是药品包装的重要组成部分，其中卤化丁基胶塞因具有吸湿率低，化学性好，气密性好，无生理毒副作用等特点而广为应用。所选择的胶塞应不产生杂质或有毒物质，也不应吸附制品中的蛋白质成分，而导致制品迅速失效，但由于卤化丁基胶塞本身成分的复杂性，给

28、我们研究其与疫苗的相容性问题带来了一些困难。在胶塞的加工过程中，不仅要经过硫化过程，还添加了多种化学助剂,而那些胶塞本体内残存的未被化学键合的反应剩余物可能会通过各种接触方式与疫苗发生相互作用，通过渗透、吸附、抽提等方式影响和污染制品。丁基胶塞虽化学稳定性好，但若配方不合理、工艺不可靠,可使胶塞中的杂质、异性蛋白、硫化剂在与药品接触时易逸出至溶液中产生不溶性微粒，影响澄明度。与国外千余种配方胶塞相比，国内的胶塞企业只能生产几十种胶塞°,目前还无法满足不同成分药品的针对性需求。生物制品在不同的pH值下，生物活性,分子聚合水平，离子强度，制品溶解度会有不同程度的改变,这些改变会直接影响制

29、品的质量。酸性条件下，加速玻璃中碱性离子的析出，包括硅、钠、钾、钙、铝等,造成内环境的pH值升高；碱性条件下，溶解玻璃内硅键，造成玻璃表面脱片，影响制品澄明度。因此要确保制品在贮存期和使用期内不因内环境的变化而变质或失效，控制其包装材料碱性离子的释放，减少玻璃与药物之间发生迁移、吸附、脱片、离子交换等影响，这些是我们选用玻璃包装材料时应着重考虑的方面。在整个检测期内，内毒素含量一直呈下降趋势,玻璃包装材料内壁是否对内毒素有吸附作用还有待进一步试验证明和分析。本文根据pH值、内毒素含量和不溶性微粒3个试验项目得出的数据，对Hib多糖蛋白结合疫苗和包装材料的相容性做了初步的探讨并得到了最优的组合，

30、设计的3项试验反映了该疫苗的化学、生物和物理3类指标，能客观的显示不同组合的包装材料对Hib结合疫苗质量的潜在影响。如何准确的界定这3项试验各自的权重则是本实验的一个难点，目前我们只能假设这3项试验权重相等，具体哪个指标的结果对评价该疫苗和包装材料的相容性更重要还有待进一步的研究。在今后的研究工作中我们需借助更多的技术手段全方位的考察药品包装材料和生物制品之间的相互作用，筛选出针对不同特性生物制品的包装材料，以确保药品质量和用药安全。参考文献(U赵箱.章以洁,李河民，等.医学生物制品学M.北京:人民卫生出版社,2007,540-559.21国家药典委员会，编.中华人民共和国药典2010年版二部S.北京:化学工业出版社,2010.1XIXC原料药与药物制剂稳定性试验指导原则:附录199-201.3 直接接触药品的包装材料和容器标准(试行)S.国家药品监督管理局,2004-7-20,YBB00142002.4 Prim