铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响资料解读

1、本科生毕业论文（设计）题目 铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响专业生物技术院部生命科学与技术学院学号姓名xxxxxxxxxx指导教师xxxxxxxxxxxxxxxxxx答辩时间xxxxxxxxxx论文工作时间： 2011 年 9 月 至 2012 年 5 月铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响学生： xxxxxx指导教师： xxxxxx摘 要：本研究以四川德阳市中江县地区的丹参为实验原材， 模拟盆栽试验， 研究了丹参在不同浓度铅胁迫条件下的含水量、 叶绿素、脯胺酸、丙二醛和生物酶的变化。结果显示，随铅浓度的上升和胁迫时间的增长，含水量下降；在低浓度铅时，叶绿素含量有小程度上升，当铅浓度高时，叶绿

2、素呈下降趋势；在低浓度铅时，丙二醛、脯氨酸、酶活性都随胁迫时间的增长而有一定的上升，维持在相对稳定的水平；当铅的浓度升高时，则含量会有极速的增长。说明了低浓度( 0400mg/L) 铅对植物生长伤害不明显，而高浓度 ( 400mg/L 以上 ) 铅对植物的伤害明显。关键词： 丹参；铅；酶；叶绿素Effect of Pb2+ stress on physiological indices of salvia miltiorrhizaUndergraduate:WangJunlongSupervisor: LuoMinghuaAbstract: In the paper, the Salvia m

3、iltiorrhizawhich are planted in Zhongjiang County area inDeyang, Sichuan province were used as eaperimental materials. The moisture content, content of chlorophyll ,content of proline, content of MDA and activity of peroxidase(POD) of theSalvia miltiorrhiza is studied under different levels of lead

4、stress in this paper. At last, the results display as follows: With the growth of stress time and the concentration of lead, the moisture content will decrease. At low lead concentrations, chlorophyll content will increase in a small degree; at the high lead concentrations, the chlorophyll content w

5、ill deacreasein a large scale. At low lead concentration, the content of proline, content of MDA and activity of peroxidase will increase with the growth of stress time and stand in a stable level relatively; at high lead concentration, those will increase quickly. The results showed that the low co

6、ncentration of lead can promote the growth of plants, however, the high concentration of lead damage the plants obviously.Key words: Salvia miltiorrhiza ; lead; POD; chlorophyll目录1前 言 .01.1丹参的研究现状 .01.2试验目的 .01.3试验意义 .02试验材料 .02.1试验样品 .02.2主要仪器及试剂 .02.3主要试剂的配置 .13试验方法 .13.1试验流程 .13.2试验步骤 .13.2.1丹参的种

7、植及胁迫 .13.2.2测定含水量 .13.2.3叶绿素含量的测定 .23.2.4脯氨酸含量的测定 .23.2.5丙二醛的含量测定 .33.2.6酶活性的测定 .44结果及分析 .44.1含水量的变化 .44.2叶绿素含量的测定结果 .54.3脯氨酸含量的测定结果 .74.3.1脯氨酸的标准曲线 .74.3.2脯氨的测定结果 .74.4丙二醛含量的测定结果 .84.5酶活性的测定结果 .95讨论 .96结论 .107本实验的不足之处 .10参考文献 .11致谢.13绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响1 前言1.1 丹参的研究现状丹参为唇形科植物 1 Salvia m

8、iltiorrhiza 的干燥根及根茎，始载于神农本草经，被列为上品，历代本草均有收载。其味苦、性微寒，归心、肝二经。具祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效，是一种临床应用广泛的中药。其现代药理作用 3,4 主要包括舒张冠脉、增加冠脉血流量，具有明显的钙拮抗剂作用；提高心室的顺应性，改善心脏的舒张功能， 对缺血心肌和再灌注心脏具有保护作用；抑制内源性胆固醇的合成； 增加微循环流速和流量， 消除局部静脉血液瘀滞， 改善组织细胞缺血、缺氧所致的代谢障碍；具有抗体外血栓形成、抗血小板聚集、抗内外凝血系统功能、 减少血小板、 促进纤维蛋白原降解作用； 具有很强的清除自由基和抗氧化作用等 7 。随着人类疾

9、病谱的变化，丹参作为能够预防和治疗人类面临的几大危险疾病的植物药之一，它的应用将会更加广泛8 。由于人类早期对环境问题的忽略 9 ，产生了一系列的环境问题，特别是重金属的污染已成为一大公害。 直接或间接的重金属污染物在自然界中沉积， 毒性较大，储蓄性强，难降解，对人类健康具有潜在的危害性。1.2 试验目的本研究旨在通过研究铅离子对丹参的生长的影响来确定不同浓度的铅对丹参的作用效果， 测定出对丹参生长最为有利的铅离子浓度， 从而对丹参的种植做出一定的指导。1.3 试验意义本实验所用丹参来源于四川省德阳市中江县地区的丹参根种植所得， 因中江地区的丹参为道地药材。研究铅对中江产丹参的影响，有利于合理

10、种植的推广，对提高药品整体水平的质量有很大的帮助。2 试验材料2.1 试验样品丹参幼苗2.2 主要仪器及试剂移液管；申溢牌电热不绣钢蒸馏水器（上海三中医疗器械有限公司出产） ；双燕牌冰箱（博西华家用电器有限公司出产） ；恒温鼓风干燥箱（上海精宏试验设备有限公司出产）；高速冷冻离心机（贝克曼库尔特实验系统有限公司广州分公司） ；电子万用炉（北京市永光明医疗仪器厂） ； FA1104A 电子天平（上海精天电子仪器有限公司） ；0绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响Sartorius BP211D电子天平（德国赛多利斯公司） HHS-2 数显恒温水浴（上海康华生化仪器制造有

11、限公司） ；UL trospec 3300 pro 型紫外可见分光光度计（ Amersham biosciences）；硝酸铅；95%乙醇；2.3 主要试剂的配置反应混合液 10100mmol/L 磷酸缓冲液 (pH6.0)50mL，加入愈创木酚28uL，加热搅拌，直至愈创木酚溶解，待溶液冷却后，加入 30%过氧化氢 19uL，混合均匀保存于冰箱中。营养液2.00mmol/LCa(NO 3)2·4H2O 、 0.10mmol/LKH 2PO4 、 0.50mmol/LMgSO 4 ·7H2O 、0.10mmol/LKCI 、0.70mmol/LK 2 SO4、10.00um

12、ol/LH 3BO3、0.5umol/LMnSO 4·H2O 、1.00umol/LZnSO4·7H2O 、0.20umol/LCuSO4·5H2O、0.01umol/L(NH 4)6Mo 7O243 试验方法3.1 试验流程实验定流程下方案设计 丹参种植 铅胁迫 试验测定生理指标 再胁迫 第二次测定 胁迫 第三次测定图 -1 生理指标测定流程3.2 试验步骤丹参的种植及胁迫于绵阳市购得培养丹参所需的各种材料，如营养土、珍珠岩、花盆等；店购实验所需药品，如硝酸铅、甲苯、冰醋酸等。于德阳市中江县丹参种植基地购买的丹参根，折断为每段 4-5cm 插于绵阳师范学院北校区

13、果园松软的土中，待其长出幼嫩叶子时，移植进装有培养土（营养土：珍珠岩：纯土=1:1:3）的花盆中培养，每 3 珠一盆，花盆放于露天的土地上。一共设定6 个组，编号： ( 对照 ) 、 , 其 Pb2+浓度分别为0、100 mg/L 、 200 mg/L 、400 mg/L 、800 mg/L、1600mg/L。对照组定时加入不含铅的营养液，其他分组同时加入不同浓度的含铅培养液。测定含水量将叶片从丹参植株上取下后， 迅速剪成小块，置于称量纸上用电子天平称重，记为 Wf。将称重后的叶片装入洁净培养皿中，于 105烘箱中干燥 46h( 注意培养皿不能盖盖子 ) 。取出培养皿和叶片冷却至室温， 用电子

14、天平称叶片的重量。然后将叶片放入培养皿中再烘 2 小时，取出烧杯和叶片冷却至室温， 用电子天平1绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响称叶片的重量，这样重复几次，直至恒重为止。称得叶片干重Wd。烘时注意防止植物材料焦化，如所取材料为幼嫩组织可先用l00 105杀死组织后，再在80下烘至恒重。计算：鲜重含水量（）（ Wf - Wd ） / Wf * 100%干重含水量（）（ Wf - Wd ） / Wd * 100%叶绿素含量的测定取不同浓度等量丹参叶片 10,12,14，擦净组织表面污物，分别剪碎（去掉中脉），混匀。称取剪碎的新鲜样品 0.5g ，放入研钵中，加少量碳酸

15、钙和石英砂及 23ml95乙醇，研成均浆，再加乙醇 10ml，暗处静置 3 5min。取滤纸 1 张，置漏斗中，用乙醇湿润， 沿玻棒把提取液倒入漏斗中， 过滤到 25ml 棕色容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、 研棒及残渣数次， 最后连同残渣一起倒入漏斗中， 用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。 直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至 25ml，摇匀，把叶绿体色素提取液稀释 5 倍后倒入光径 1cm的比色杯内。以 95乙醇为参比，在波长 663nm、645nm下测定光密度。将测定得到的吸光值代入下面的式子：Lambert-Bee 定律Ca=12.7 D6632.69D645

16、(3)Cb=22.9 D6454.68 D663(4)G 总=Ca+Cb=8.02D663+20.2D645 (5) 式中的 D663、D645为叶绿素溶液在波长 663nm和 645nm时的光密度。 Ca、 Cb 为叶绿素 a、b 浓度，单位为 :mg/L 。分别计算叶绿素 a、 b 和总叶绿素的含量叶绿素含量等于叶绿素的浓度提取液体积稀释倍数样品鲜重1000脯氨酸含量的测定脯氨酸标准曲线的制作取 7 支试管 10,17，编号，按下表配制每管含量为 0 6 g 的脯氨酸标准液。加入表中试剂后， 置于沸水浴中加热 30min。取出冷却， 各试管再加入 4ml 甲苯，振荡 30 秒钟，静置片刻，

17、使色素全部转至甲苯溶液轻轻吸取各管上层脯氨酸甲苯溶液至比色杯中，以甲苯溶液为空白对照，在 520mm 波长处测定吸光度（ A ）值。以 1 5 号管脯氨酸含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。2绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响表 1标准样的配制Tab. 1Confecting of the standard samples试剂管号123456710 g· ml-1 脯氨酸标准液（ ml）00.10.20.30.40.50.6蒸馏水（ ml）21.91.81.71.61.51.4冰醋酸（ ml）22222222.5 酸性茚三酮（ ml）222222

18、2每管脯氨酸含量（g）0123456脯氨酸的提取和测定取不同处理的植物材料各0.5g10,19 ，分别置大试管中， 然后向各管分别加入5ml 3的磺基水杨酸溶液，在沸水浴中提取10min（提取过程中要经常摇动） ，冷却后过滤于干净的试管中， 滤液即为脯氨酸的提取液。 吸取 2ml 提取液于带玻塞试管中，加入 2ml 冰醋酸及 2ml 2.5酸性茚三酮试剂，在沸水浴中加热 30min，溶液即呈红色。冷却后加入 4ml 甲苯，摇荡 30 秒钟，静置片刻，取上层液至 10ml 离心管中，在 3000r/min 离心 5min。用吸管轻轻吸取上层脯氨酸红色甲苯溶液于比色杯中，以甲苯溶液为空白对照，在

19、520mm 波长处测定吸光度（ A ）值。计算从标准曲线上查出样品测定液中脯氨酸的含量 14 ，按下公式计算样品中脯氨酸含量：脯氨酸含量（ g·g1Fw） X ×提取液总量（ ml）/ 样品鲜重（ g）× 测定时提取液用量（ ml ）公式中： X 从标准曲线中查得的脯氨酸含量（ g）丙二醛的含量测定采用二硫代巴比妥酸显色法 10,18,29,21。分别称取不同浓度植物叶片 0.5g ，加入少量石英砂和 10%三氯乙酸 2ml，研磨至匀浆，再加 8ml 10%三氯乙酸进一步研磨，匀浆以 4000r/min 离心 10min，其上清液为丙二醛提取液。取 8 支干净试管

20、，编号， 7 只为样品管（七个重复），各加入提取液 2ml。对照管加蒸馏水 2ml，迅速各管再加入 2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，摇匀，混合液在沸水浴中反应 15min，迅速冷却后再离心，取上清液分别在 532、600、450nm波长下测定吸光度（ A）值。由于蔗糖 TBA 反应产物的最大吸收波长为450nm，毫摩尔吸收系数为85.4 ×10-3.MDA TBA 反应产物在 532nm的毫摩尔吸收系数分别为7.4 ×10-3 和155×10-3。532nm非特异性吸光值可以 600nm波长处的吸光值代替。按双组分分光光度法原理，建立方程组，解此方程组A453=(

21、85.4 ×10-3）×C 糖A532A600= （155×10-3)××-3)× 糖CMDA+(7.410C3绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响酶活性的测定酶液提取取 5g 洗净的丹参叶片 10,20,24,25，放入研钵中，加入适量的磷酸缓冲液，研磨成匀浆。将匀浆液全部转入离心管中， 于 3000g 离心 10min，上清液转入 25ml容量瓶中。沉淀用 5ml 磷酸缓冲液再提取 2 次，上清液并入容量瓶中， 定容至刻度，低温下保存备用。过氧化物酶活性测定酶 活 性 测 定 的 反 应 体 系 包 括

22、25,28 ：磷 酸 缓 冲 液 ；1.0ml2%H2O2；愈创木酚溶液和 0.1ml 酶液。以加热煮沸 5min 的酶液为对照，反应体系加入酶液后，立即于 34水浴中保温 3min，然后迅速稀释 1 倍，470nm波长下比色，每隔1min 记录 1 次吸光度（ A 470），共记录 5 次。结果计算以每分钟内 A 470 变化 0.01 为 1 个酶活力单位（ U）。过氧化物酶活力（ U×g-1 鲜重× min-1） =A470 * VTW * VS * 0.01* t式中， A 470 为反应时间内吸光度的变化； W为丹参叶片鲜重 (g) ；t 为反应时间 (min)

23、；VT 为提取酶液总体积 (ml) ；V S 为测定时取用酶液体积 (ml) 。解 C 糖=A453/85.4 ×10-3=11.71A453(mol/L)CMDA +=6.45(A532A600) 0.56A450(umol/L)公式中 1.55 ×10-3 为摩尔比吸收系数 C糖、CMDA分别是反应混合液中可溶性糖、 MDA的浓度提取液中 MDA浓度（ umol/ml)=(CMDA*反应液体积） / 测定时提取液用量× 1000MDA含量（ umol/gfw ）=提取液中 MDA浓度×提取液总量 / 植物组织鲜重。4 结果及分析4.1 含水量的变化由

24、图 -2 可以看出，对照组的含水量基本没变化随着胁迫时间的增加， 含水量的百分比逐渐降低。且随 Pb2+浓度的增加而下降的越快； 同等浓度的 Pb2+条件下，随着胁迫时间的增长，含水量的下降越明显。由此可知： Pb2+对丹参叶片的保水能力有破坏，并且随着浓度的增加，胁迫时间的增长，叶片中的含水量就越低，说明 Pb2+对丹参叶片的伤害与时间，浓度的变化成正比例。4绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响含水量变化95.00%90.00%0mg/L85.00%100mg/L量 80.00%200mg/L水400mg/L含 75.00%70.00%800mg/L1600mg/L

25、65.00%60.00%0天5天10天15天胁迫时间图 -2 含水量的变化Fig-2The situation of Relative Water Content4.2 叶绿素含量的测定结果由图 -3 和图 -4 可以看出，就对照组而言， 随着时间的增长， 叶绿素含量呈现增加的趋势，说明该在该营养液中，丹参可正常生长。另外，叶绿素a 和叶绿素b 在 Pb2+浓度较低时会有一定程度的上升，说明低浓度的Pb2+可以 增加叶片叶绿素含量随着铅处理浓度的增加及时间的延长，叶绿素的增加量开始下降。叶绿素含量的高低直接反映植物光合作用能力的强弱。高铅浓度时，叶绿素含量的降低是植物受重金属毒害的重要特征之一

26、。 叶绿素含量随着铅浓度的增加不断减少，这与很多植物在受到重金属污染时叶绿素的变化规律想一致。 叶绿素含量的降低有多方面的原因， 与合成叶绿素所需酶受重金属破坏有关， 可能是铅离子被植物吸收后， 细胞内的铅离子作用于叶绿素生物合成途径的几种酶的肽链中富含 SH 的部分，改变了正常构型，从而抑制了酶的活性，阻碍叶绿素的不可逆损伤。叶绿素在不同浓度铅胁迫下参与叶绿素合成的矿物质吸收受阴也可能是植株叶绿素含量变化的原因。5绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响叶绿素 a变化1.6001.4000.000量 1.200100mg/L含1.000200mg/La素0.800400

27、mg/L绿叶 0.600800mg/L0.4001600mg/L0.2000天5天10天15天胁迫时间图 -3 叶绿素 a 含量的测定Fig-3The situation of Content of Chla叶绿素 b变化0.9000.8000.7000mg/L量 0.600100mg/L含0.500200mg/Lb素0.400400mg/L绿800mg/L叶 0.3000.2001600mg/L0.1000.0000天5天10天15天胁迫时间图 -4 叶绿素 b 的含量测定Fig-4The situation of Content of Chlb6绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参

28、幼苗生理活性的影响4.3 脯氨酸含量的测定结果脯氨酸的标准曲线0.50.4y = 0.0776x - 0.009R2 = 0.99520.30.20.1001234567-0.1图-5脯氨酸标准曲线Fig-5 The free pralinein standard curve脯氨酸含量变化)70g60k/g500天m(405天量3010天含酸2015天氨脯 1000mg/L100mg/L200mg/L400mg/L800mg/L1600mg/Lpb2+浓度图 -6脯氨酸含量的测定情况Fig-6The situation of Content of free pralinein脯氨的测定结果随着

29、 Pb2+含量的增加，丹参叶片中脯氨酸的含量呈现增加趋势（见图 -6 ）。当铅离子浓度小于 400mg/L时，脯氨酸含量增加不显著。 当 Pb2+浓度达到 400mg/L 及大于该浓度时， 脯氨酸含量的增加越来越显著， 且随时间的增长， 几乎成倍的增长。脯氨酸是植物蛋白质的组分之一，并以游离状态广泛的存在于植物体中。在逆境条件下， 认为脯氨酸是一种植物渗透调节剂、 膜和酶的保护物质以及自由基清除剂等而对植物起保护作用， 抗逆性强的植物能积累较多的脯氨酸。 本研究结果表明，在铅胁迫时， 低浓度时丹参脯氨酸含量变化不大， 这可能是胁迫程度较轻，并未影响到丹参体内的游离脯氨酸的正常积累。 而当胁迫浓

30、度增加时， 脯氨酸含量大量增加， 可能是脯氨酸对铅胁迫逆境下积累更多的游离脯氨酸以保持7绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响渗透作用。从中可以看出脯氨酸含量在一定范围内与铅浓度有较好的剂量 - 效应关系。4.4 丙二醛含量的测定结果丙二醛含量变化4035量 300mg/L100mg/L含200mg/L醛 25400mg/L二丙20800mg/L1600mg/L15100天5天10天15天胁迫时间图-7丙二醛的测定结果Fig-7The situation of Content of MDA由图 -7 可以看出，对照组中丙二醛的含量几乎不变，这说明在正常生长条件下丹参中的

31、丙二醛含量趋于稳定，而随着铅离子浓度的增加和培养时间的增长，丹参叶中丙二醛的含量呈现增加的趋势，且浓度小于400mg/L 时增加的量较小，当浓度增大的时候，丙二醛的增加量也随之增加。这与夏建国 18 ，徐燕云 23等的研究结果相一致。植物器官衰老或在逆境条件下发生膜脂过氧化作用， 丙二醛通常作为脂质过氧化指标，表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件下膜系统受损程度的指标。丙二醛的积累来自不饱和脂肪酸的降解， 它的生成是由体内自由基引发而产生的，丙二醛的积累能够反映植物体内自由基的活动状况。 本研究中，在铅浓度小于 400mg/L 的条件下，丙二醛含量变化不大，说明丹参在这一浓度下没有受到铅的污

32、染带来的伤害。而在铅浓度在 4001600mg/L 的条件下，比对照升高显著。说明铅胁迫在高浓度铅时， 丹参受伤害较为明显； 且胁迫时间对丙二醛的含量的影响较浓度不明显，说明影响丙二醛含量的主要因素为Pb2+浓度。8绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响4.5 酶活性的测定结果POD酶活性变化)WF500(g4000天·ni3005天m10天/200U15天100性活 0酶/ L/L/ L/L/ L/Lgggggg100m200m400m800m0m1600m胁迫浓度图 - 8POD 酶活性测定结果Fig-8The situation of Content o

33、f the activities of POD由图 -8 可以看出，酶活性随着铅浓度的增加而呈增长趋势，铅浓度在0800mg/L时维持在相对稳定的水平，当铅浓度达到 1600mg/L时，酶的活性相对于对照组有明显的增加，是对照组的 2.26倍。这说明 POD清除活性氧的能力加强，有利于抵抗铅的污染。POD是一种含铁的金属蛋白质，是植物体内常见的氧化还原酶。 POD作为细胞内清除活性氧系统中的重要酶，能催化 H2O2与酚类的反应，达到清除过氧化物的作用。5 讨论叶绿素含量降低与合成叶绿素所需的酶受重金属破坏有关，可能是重金属离子被植物吸收后， 改变了作用于叶绿素生物合成途径的正常构型，从而抑制了

34、酶的活性，阻碍了叶绿素的合成。另外，重金属能使叶绿素被膜消失，造成对叶绿体的不可逆损伤。 本实验中，叶绿素 a 的变化比叶绿素b 明显，说明高浓度的铅胁迫对丹参幼苗叶片中叶绿素a 的影响较大，其机理和显著程度需要进一步研2127究。同时低浓度铅胁迫处理出现叶绿素含量升高现象，与巢丽仪等和徐勤松过氧化物酶 (POD)是一种含 Fe 的金属蛋白质 25,28，其作用如同氢的接受体一样，是植物体内重要的代谢酶，参与许多重要的生理活动，如细胞分裂，生长发育等 28。同时也是植物体内抗氧化酶系统的重要组成部分，它能催化有毒物质的分解，其活性的高低能反映植物受毒害的程度。植物器官衰老时或逆境条件下15,1

35、8，往往发生膜脂过氧化作用， 而 MDA是其9绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响产物之一，因此，通常利用它作为脂质过氧化指标， 表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。通过丙二醛含量的测定可了解膜脂氧化伤害的程度，比较植物抗逆性的差异。该研究中，丹参受到铅污染后，体内的丙二醛含量发生了变化， 由此表明，丹参处于高浓度铅胁迫时， 丹参叶内活性氧的产生和清除平衡受到破坏， 体内产生并积累大量活性氧会引发膜脂过氧化， 产生 MDA等有害的膜脂过氧化物，并且 MDA的含量常会随胁迫浓度的增加而增加 23 。游离脯氨酸的植物体内最重要的渗透调节物质之一 14 。根据

36、 Csonka(1991) 和 J.Pang(2003)等的报道，脯氨酸的积累对细胞的渗透调节、细胞结构的稳定、氧化的降低具有非常重要的作用。丹参叶片脯氨酸含量在高铅胁迫下急剧增加，从而支持了以往对于脯氨酸具有清除活性氧的作用，与植物抗氧化关系十分密切，是植物对逆境的一种适应性反应的论点。由于当植物遭受逆境时， 体内游离脯氨酸的含量增高，常以游离脯氨酸含量作为植物多重抗逆性的指标 25 。结果还说明，丹参在受到铅低浓度处理时，生长旺盛，生长状况较好。随处理时间的延长及处理浓度的增加，游离脯氨酸含量增加，丹参生长受到一定的抑制27 。6 结论综合各项研究结果，本研究结论如下：(1) 含水量随铅浓

37、度的上升和胁迫时间的增长而呈下降趋势；(2) 低浓度铅 (100mg/L) 时，叶绿素 a 和叶绿素 b 含量都有一定程度的上升， 且维持在相对稳定的水平，当铅浓度升高 ( 大于 200mg/L)时，叶绿素 a 和叶绿素 b 含量下降，且叶绿素 a 下降的弧度更大；(3) 丙二醛含量、脯氨酸含量， POD酶活性在铅浓度在 0800mg/L 时维持在相对正常水平，当铅浓度为 8001600mg/L 时，则会出现快速升高。综上可得，低浓度铅 ( 小于 100mg/L)对丹参幼苗的伤害不明显，但当铅浓度升高后，幼苗受到的伤害明显，高浓度铅不利于丹参幼苗的正常生长。7 本实验的不足之处于时间和实验室条

38、件的限制， 本研究还存在许多不足： 没有对不同产地的丹参进行各项生理指标的测定； 实验室仪器的精准度的影响， 使得测定的结果存在较大的误差。建议今后在以下几方面开展进一步的工作：(1)以不同产地的丹参作为实验材料进行各项生理指标的测定。(2)测定更多的相关指标，如：导电率，可溶性糖等。10绵阳师范学2012 届毕业论铅离子胁迫对丹参幼苗生理活性的影响参考文献1 叶红，袁野，李远伟，等 . 丹参在 Cu 胁迫下的耐性机理研究 J. 农业环境科学学报 , 2009, 28(10) : 2009 2034.2 张莹莹，王修林，杨汝君，等. 铅离子对海洋浮游植物生长影响的研究 J. 海洋科学 , 20

39、05, 29(6) : 28 34.3宋瑜，金樑，曹宗英，等 . 植物对重金属镉的响应及其耐受机理J. 草业学报 , 2008, 5(17) :84 91.4铁柏清，孙健，秦普丰，等.单一重金属污染对灯心草生长及重金属积累特性的影响J. 生态与农村环境学报 . 2006, 22(2) : 65 70.5李德明， 郑昕，张秀娟 . 重金属对植物生长发育的影响 J.安徽农业科学 , 2009, 37(1): 74 75.6李秀珍，李彬 . 重金属对植物生长发育及品质的影响J. 安徽农业科学 , 2008, 36(14),5742 57467沙尔比亚·阿合尼亚孜. 重金属对植物影响及其解决

40、措施J.现代农业科学 , 2009, 5(16) :182 183.8刘万玲 . 重金属污染及其对植物生长发育的影响J. 安徽农业 , 2006, 34(16) : 4026 4027,4030.9 何俊瑜,任艳芳. 镉胁迫对莴苣幼苗生长和光合性能的影响J. 西南农业学报, 2009, 4(22): 922 926.10 熊庆娥 .植物生理学实验教程 M. 成都：四川科学技术出版社， 2003.XIONG Qing-e.Plant physiology experimental courseM. Chengdu:Sichuan Science and Technology Press,2003.11 郭艳丽，台培东，韩艳萍. 镉胁迫对向日葵幼苗生长和生理特性的影响J. 环境工程学报 , 2009, 12(3) : 2291 229612姚广，高辉远，王未未，等. 铅胁迫对玉米幼苗叶片光系统功能及光合作用的影响J.