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文档简介

1、发酵工程试题库 一、名词解释1. 代谢控制发酵:人为地改变微生物的代谢调控机制,使有用中间代谢产物过量积累,这种发酵称为代谢控制发酵。2. 临界氧浓度:微生物的耗氧速率受发酵液中氧的浓度的影响,各种微生物对发酵液中溶氧浓度有一个最低要求,这一溶氧浓度叫做临界氧浓度。3. 固定化酶:在酶促反响过程中,将酶定位或限制在一定的空间范围内,使其在反响后易于与反响物和产物分开,从而到达反复使用和连续化生产的新型酶制剂。4. 营养缺陷型突变株:指某一菌株丧失了合成某种营养物质的能力,在培养基中假设不外加这种营养成分就不能正常生长的变异菌株。5. 巴氏消毒法:将物料加热至 60C维持60min,以杀死不耐高

2、温的物料中的微生物营养细胞。6. 发酵工程:是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,或直接把微生物应用于工业生产过程,为人类生产有用产品的一种技术。7. 初级代谢产物:微生物细胞在其对数生长期所产生的产物,往往是细胞生长和繁殖中所必需的物质,如糖、氨基酸、脂肪酸、 核苷酸以及由这些化合物聚合而成的高分子化合物, 如多糖、蛋白质、 脂类和核酸等,这些化合物称为初级代谢产物。8. 培养基:是人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。根据微生物对营养的要求,培养基都根本包括碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分,此外,还应根据微生物的要求,有一定的酸碱度和渗透压。9. 发酵

3、:指微生物在无氧条件下,分解各种有机物质产生能量的一种方式。或者更严格地说,发酵是以有机物作为电子受体的氧化复原产能反响。如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出二氧化碳,同时获得能量。10. 酵母的第三型发酵,又称碱法甘油发酵。即在碱性条件下pH7.6 , 2 分子乙醛发生歧 化反响,生成 1 分子乙醇和 1 分子乙酸,而磷酸二羟丙酮那么复原为甘油。 总反响式: 2 葡 萄糖 + H2O2 甘油 + 乙醇 + 乙酸 + 2CO2作葡11. DE 值葡萄糖值 :表示淀粉水解程度及糖化程度,指葡萄糖所有测定的复原糖都当 萄糖来计算占干物质的百分率。12. 发酵热:引起发酵过程温度变化的原因

4、是发酵过程所产生的热量,称为发酵热。发酵热包括生物热、搅拌热、蒸发 汽化 热和辐射热等。13. 生物膜法废水处理:使微生物群体附着在固体介质滤料的外表形成生物膜,废水与生物膜接触过程中,有机污染物质被吸附且氧化分解,使废水得到净化的废水处理方法。14. 耗氧速率:指单位体积培养液在单位时间内的吸氧量,单位为 mmolO2/L?h 。15. 酶合成调节:酶合成的调节是通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制, 这类调 节在基因转录水平上进行。酶合成调节主要有酶的诱导和酶的阻遏两种类型。16?呼吸强度:指单位重量的干菌体在单位时间内所吸取的氧量,单位为 mmolO2/g 干菌体 ?h。17

5、. 连续培养:是指以一定的速度向发酵罐内添加新鲜培养基,同时以相同的速度流出培养 液,从 而使发酵罐内的液量维持恒定,使培养物在近似恒定状态下生长的培养方法。18. 固定化技术 : 通过化学或物理的手段将游离细胞或酶定位于限定的空间区域内, 并保持 其固有 的催化活性,使其活性能被反复利用的技术。19. B0D 指 1L 废水中的有机污染物在好氧微生物作用下进行氧化分解时所消耗的溶氧量。实际测定水样在 20C下培养5d的需氧量B0D520. 碳源:凡可构成微生物细胞和代谢产物中碳素来源的营养物质,统称为碳源。21. 酶活性调节:通过改变酶分子的活性来调节代谢速度的调节方式称为酶活性的调节,是发

6、生在蛋白质水平上的调节。22. COD 指用强氧化剂使被测废水中有机物进行化学氧化时所消耗的氧量。常用重铬酸钾测得的耗氧量 CODC 值表示。23. 介质过滤除菌:是使空气通过经高温灭菌的介质过滤层,将空气中的微生物等颗粒阻截在介质层中,而到达除菌的目的 二、判断改错题?X1. 人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造3. 精确定量某些成分而配制的培养基是所有成分的性质和数量的培养基,称为天然培养基。 X4.环境条件的变化不仅会影响微生物的生长繁殖,也会影响微生物的代谢途径5.发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢产物的形成都与搅拌速度有关6.微生物的最适生长繁殖温度就是积累代谢产物的最

7、适温度7.通过调节根底培养基的配方和补料控制可以调控发酵醪的pH 值。 V8. 灭菌就是杀死一定环境中所有微生物的营养细胞、孢子和胚芽。 X9. 巴斯德消毒法能杀死牛奶或奶制品中存在的所有微生物。 X10. 发酵产物的提取和精制过程也就是产物浓缩和纯化过程。 V11. 细菌分裂繁殖一代所需时间为代时。 V12. 但凡影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子。 V13. 在最适生长温度下,微生物生长繁殖速度最快,因此生产单细胞蛋白的发酵温度应选择 最适生 长温度。 X14. 参与淀粉酶法水解的酶包括淀粉酶、麦芽糖酶和纤维素酶等。 X15. EMP 和 HMP 弋谢途径往往同时存在于同一种微

8、生物的糖代谢中。 X16. 同功酶是行使同一功能、结构不同的一组酶 V17. 最适的生长繁殖温度就是微生物代谢的最适温度。 X18. 微生物的次级代谢产物是初级代谢不畅通时,由支路代谢产生的。 X19. 底物水平磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生 ATP X20. 分批培养时,细菌首先经历一个适应期,此期间细胞处于代谢活动的低潮,所以细胞数 目并不明显增加。 V21.电子受体进行有氧呼吸作用产生能化能异养菌以有机物作为呼吸底物,以 02 作为最终量。V 三、单项选择题1. 以下关于发酵工程的说法,错误的选项是 C A 发酵工程产品主要是指微生物的代谢产物、酶和菌体本身B 可以通过人

9、工诱变选育新菌株C 培养基、发酵设备和菌种必须经过严格的灭菌D 环境条件的变化既影响菌种的生长繁殖又影响菌体代谢产物的形成2. 以下关于单细胞蛋白的表达,正确的选项是 B A 是微生物细胞中提取的蛋白质B 是通过发酵生产的微生物菌体C 是微生物细胞分泌的抗生素D 单细胞蛋白不能作为食品3. 关于菌种的选育不正确的选项是 C A 自然选育菌种费时且盲目性大B 诱变育种原理的根底是基因突变C 代谢控制育种方法有转化、转导及杂交D 采用基因工程的方法可构建工程菌4. 当培养基 pH 发生变化时,应该C A 加酸 B 加碱 C 加缓冲液 D 加无机盐5. 以下营养物质中,不同时含有碳源、氮源和生长因子

10、的是 C A 牛肉膏 B 蛋白胨 C 生物素 D 酵母粉6. 平板划线别离法不需要下面哪个物品或设备A 接种环 B 琼脂培养基平板 C 超净工作台 D 电泳仪7. 在培养基的配制过程中,具有如下步骤,其正确顺序为溶化调 pH 加棉塞包扎培养基的分装 称量A B C 8. 甘油生物合成主要由以下哪种物质引起A 尿素 B 硫酸铵 C 酶 D 亚硫酸盐9. 对谷氨酸发酵的表达正确的选项是C 谷氨酸的形成与搅A 菌体是异养厌氧型微生物 B 生物素对谷氨酸生成无影响10. 代谢中如发生复原反响时,A 从底物分子丧失电子 B 通常获得大量的能量D 底物分子被氧化11. 下面哪项特征不适合于三羧酸循环A C

11、02 分子以废物释放 BC 电子加到底物分子上循环时形成柠檬酸.D C 所有的反响都要酶催化拌速度无关 D 产物可用离子交换法提取D 反响导致葡萄糖合成12. 当一个 NADF 分子被代谢和它的电子通过电子传递链传递时,产生 C A 6 个氨基酸 分子 B 1 个葡萄糖分子 C 3 个 ATP 分子D 1个甘油三酯和 2 个甘油二酯13. 为使淀粉和纤维素进行代谢而提供能量, B A 它们必须第一步变成脂肪分子 B 它们的葡萄糖单位必须被释放 C 环境中必须有游 离氧存在 D 遗 传密码必须起促进作用14. 常作为生产菌种和科研材料的细菌群体,应该是代谢旺盛、个体形态和生理特性比拟稳定的。所以

12、应选择在它的A 迟滞期 B 对数期 C 稳定期 D 衰亡期15. 某些放线菌产生的抗生素,是它们的A 初级代谢产物 B 次级代谢产物 C 代谢中间产物 D 代谢废物A 为菌体提供碳源 B 为菌体提供氮源 C 使培养基保持水分16. 固体培养基中需要参加琼脂的目的是D 使培养基凝固17. 微生物代谢的调节属于 C A 神经调节 B. 激素调节 C 酶的调节 D. 基因调节18. 关于微生物代谢产物的说法中不正确的选项是 D A 初级代谢产物是微生物生长和繁殖所必须的B 次级代谢产物并非是微生物生长和繁殖所必须的C 初级代谢产物在代谢调节下产生D 次级代谢产物的合成无需代谢调节19. 在发酵中有关

13、氧的利用正确的选项是 B A 微生物可直接利用空气中的氧 B 微生物只能利用发酵液中溶解氧C 温度升高,发酵液中溶解氧增多 D 机械搅拌与溶氧浓度无关酸,20. 某药厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸, 结果代谢产物没有谷氨酸而产生乳酸及琥珀 其原因可能是 B A 温度控制不适 B 通气量过多 C pH 呈酸性 D 溶氧缺乏21. 以下可用于生产谷氨酸的菌种是A 谷氨酸棒状杆菌、金黄色葡萄球菌 B 链球菌、大肠杆菌 C 谷氨酸棒状杆菌,黄色短 杆菌肠杆菌、乳酸菌A 营养物质的消耗 微生物呼出的 C02 C 微生物细胞数目的增加22. 发酵过程中,不会直接引起 pH 变化的是D 代谢产物的积累23

14、. 关于灭菌和消毒的不正确的理解是A 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B 消毒和灭菌实质上是相同的C 接种环用烧灼法灭菌D 常用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法24. 加热灭菌时,一般营养细胞的致死温度是多少度 B A 32 C B 60 C C 100 C D 120 C25. 以下反响中,消耗 1 摩尔葡萄糖产生 ATP 最多的是 A A 柠檬酸发酵 B 甘油发酵 C 乳酸发酵 D 酒精发酵A 氧气参与下B 无机氧化物参与下C 有外源电子最终受体26. 生物学意义上的发酵作用是在什么条件下的生物氧化作用 D D 无外源电子最终受体27. 营养缺陷型菌株是指A

15、有营养不良症的菌株 B 在完全培养基上也不能生长良好的菌株 分缺少时 C 培养基中营养成 获得的菌株 D 丧失了合成某种营养成分能力的菌株28. 血糖快速测试仪上的酶传感器,使用的是 B A 复合酶 B 固定化酶 C 游离的酶 D 一般酶制剂29. 使用高压锅灭菌时,翻开排汽阀的目的是 D A 防止高压锅内压力过高,使培养基成分受到破坏 锅内压 B 排尽锅内有害气体 C 防止 力过高,造成灭菌锅爆炸 D 排尽锅内冷空气30. 巴斯德效应是指A 乳酸对微生物的抑制 酒精对葡萄糖分解的抑制 C 氧气对呼吸作用的抑制D 氧气对发酵作用的抑制31. 微生物群体生长状况的测定方法可以是 测定样 定样品的

16、细胞重量A. B . C. D. 32. 酵母菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖,但当葡萄糖浓度过高时,反而会抑制微生物的生长,原因是A. 碳源供给太充足 了酵母菌的 pH 值 D .葡 萄糖不是酵母菌的原料B .细胞会发生质壁别离C .改变33. 以下微生物代谢产物中没有菌种特异性的一组是A. 氨基酸、核苷酸、多糖、毒素、激素B. 核苷酸、维生素、多糖、脂类、氨基酸C. 多糖、脂类、维生素、抗生素、氨基酸D. 氨基酸、多糖、维生素、色素、抗生素34. 通过影响微生物膜的稳定性,从而影响营养物质吸收的因素是 B A. 温度 B. pH C. 氧含量 D .前三者的共同作用35. 以下生理过程中,

17、释放能量最多的是A A. 葡萄糖氧化分解为 C02 和 H2OB. 葡萄糖分解为酒精和 CO2C. 葡萄糖分解为乳酸D. 葡萄糖分解为甘油36. 实验室常用的培养细菌的培养基是A 牛肉膏蛋白胨培养基 B 马铃薯培养基 C 高氏一号培养基D 麦芽汁培养基37. 在实验中我们所用到的淀粉水解培养基是一种AA 根底培养基 B 富集培养基 C 选择培养基 D 鉴别培养基38. 以下物质属于生长因子的是ATP ( C )( D )( C )D 100 C, 5 小时( C )D 只消灭体表的微生物( C )A. 葡萄糖 B . 蛋白胨 C . NaCI D . 维生素39.1 摩尔葡萄糖通 EMF 和

18、TCA 循环彻底氧化共产生多少摩尔A 34 B 36 C 38 D 3940. 以下抗生素作用机制中,抑制细胞壁合成的是A 利福霉素 B 四环素 C 氯霉素 D 青霉素41. 实验室常规高压蒸汽灭菌的条件是A 135 C 140C, 515 秒 B 72 C、15 秒 C 121 C, 30 分钟42. 出于控制微生物的目的,灭菌一词指的是A 除去病原微生物 B 降卑微生物的数量 C 消灭所有的生物43. 紫外线辐射主要作用于微生物的A 糖类 B 酶类 C 核酸 D 细胞壁44. 发酵工程是生物技术实现以下哪项的关键环节(A )A 产业化 B 商品化 C 社会化 D45. 酶活性调节速度比酶合

19、成调节速度A 快 B 慢 C 相等 D46. 受反响调节的酶一般是A 同功酶 B 组成酶 C 变构酶47. 通气搅拌技术的建立是发酵技术进步的A 第一个转折 期D 第四个转折期48. 酵母菌的川型发酵的产物是A 酒精 B 甘油 C 乳酸平安化(B )无法比拟(C )D 激酶(C )B 第 二 个 转 折期 C 第 三 个 转 折期49. 目前发酵工业常用的处理菌体、D 衰亡期AD 菌体BD发酵液体积BD衰亡期C B马铃薯培养基C高氏一号培养基AA A离心和过滤B离心和萃取 C蒸馏和萃取 D离子交换和过滤50. 抗生素的合成是在微生物生长的A延滞期B对数生长期C稳定期51. 发酵液中含量最高的成

20、分为A水分 B 蛋白质 C 发酵产物52. 连续发酵中的恒浊培养所控制的对象为A培养液流速 B菌液密度 C生长速度53. 诱变处理时所用的出发菌细胞应处于A延迟期 B 对数生长期C稳定期54. 实验室常用的培养放线菌的培养基是A牛肉膏蛋白胨培养基D麦芽汁培养基55. 酵母菌适宜的生长pH值为A 3.8-6.0 B 3.0-4.0 C 8.0-9.0 D 56. 发酵有不同的类型,谷氨酸发酵属于A. 液体发酵和需氧发酵 B .液体发酵和厌氧发酵C 固体发酵和需氧发酵D 固体发酵和厌氧发57. 如果发酵工程生产的产品是菌体,菌体别离采用的方法是BA.蒸馏B .过滤C .萃取D .离子交换58. 以

21、下关于生长因子的说法中,不正确的一项为哪一项B A.是微生物生长不可缺少的微量有机物B.是微生物生长不可缺少的微量矿质兀素C.主要包括维生素、氨基酸和碱基等D .是微生物自身不能合成的59. 以下对连续培养优点的表达,不正确的选项是B A. 能及时补充微生物所需的营养物质,提高产量B. 有利于微生物尽快将代谢产物释放到培养基中C. 能消除不利于微生物生长的某些环境因素D. 能提高发酵设备的利用率60. 谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸,以下说法合理的是A. 谷氨酸对谷氨酸脱氢酶的抑制作用属于酶合成的调节B. 谷氨酸与谷氨酸脱氢酶的结合可以使酶结构产生不可逆改变C. 促使谷氨酸释放到细胞外的措施可以

22、促进谷氨酸的发酵生产D. 谷氨酸只能由a-酮戊二酸发生复原氨基化作用生成61. 发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。 消灭杂菌, C A. 根据微生物对碳源需求的差异,使用含不同碳源的培养基B. 根据微生物缺乏生长因子的种类,在培养基中增减不同的生长因子C. 根据微生物遗传组成的差异,在培养基中参加不同比例的核酸D. 根据微生物对抗菌素敏感性的差异,在培养基中参加不同的抗菌素62. 谷氨酸棒杆菌合成天冬氨酸族氨基酸时,天冬氨 氨酸的A A 协同反响抑制 B 累积反响抑制 C 顺序反响抑制 D 协作反响抑制63. 在微生物生长的过程中,细胞形态最多和数目最多的时期是 B A. 对数期、

23、稳定期 B. 衰亡期、稳定期 C. 稳定期、衰亡期 衰亡期、对数期64. 在实际生产中,对数期的长短取决于 培养罐的大小 接种量的大小 代谢产物合成的多少获得纯种的方法不包括酸激酶受赖氨酸和苏D.A 培养基的多少A. B . C . D . 65. 以下有关酶的固定化的表达,正确的选项是A. 别离后的酶加填充剂 B 别离纯化后的酶加稳定剂构成 中 D 固 C. 别离后的酶包埋在凝胶 定化酶的形状单一66. 以下属于微生物不可缺少的微量有机物是 D A.B .C .D . 67. 以下不属于发酵工程应用的是A. 生产抗生素、维生素、药用氨基酸等C.用于化学检测和水质监测D68. 大多数芽孢细菌形

24、成芽孢在哪个时期A 调整期 B 对数期 C 稳定期牛肉膏蛋白胨氨基酸维生素碱基生物素69. 以下有关谷氨酸棒状杆菌的生长和谷氨酸发酵的表达,错误的选项是 B A. 组成酶是维持菌体根本生活的必要条件 B. 菌体能合成各种生长因子,无需从外界补 充 C. 发酵 液 pH 呈酸性时,不会生成乙酰谷氨酰胺 D. 细胞膜透性的改变,可解除代 谢产物对有关酶活性的 抑制四、多项选择题1. 典型的发酵过程包括以下哪几个根本组成局部ABCDE A 繁殖菌种和发酵生产所用的培养基的配制B 培养基、发酵罐以及辅助设备的消毒灭菌C 控制发酵罐中的菌株在最适条件下生长并形成代谢产物D 产物的提取和精制,以得到合格的

25、产品E 回收或处理发酵过程中所产生的废物、废水2. 糖酵解途径的调节因素包括ABCDE A 糖酵解途径的关键酶 B 能荷 C 无机磷 D 环腺苷酸 E柠檬酸、脂肪酸、乙酰 CoAABC ), 正确的选项是3. 以下有关有氧呼吸与发酵的相同点A 都有从葡萄糖分解成丙酮酸的过程 B 都有有机物的氧化分解 C 都有能量释放 , 并有ATP 的生成 D 分解产物中都有 CO2 E 最终电子受体都是有机物4. 微生物的次级代谢产物, ( BCDE )d微量元素或ABC盐eA 是微生物生长繁殖所必需的物质 B 对微生物无明显的生理功能 C 可以积累在细胞 内 D 具有菌A.能源和酵过程已经实现在线测量和控

26、制的参数是 酶制剂A 温度 B pH值 C 溶解氧浓度 D 消泡 E流量6. 发酵过程中,补料有利于控制微生物的中间代谢,补料的内容有( ABDE株特异性 E 是以初级代谢产物作为前体衍生而来7. 发酵过程中污染杂菌的途径可能有A 种子带菌 B无菌空气带菌E 操作不当8. 灭菌方法主要有A 干热灭菌法 B湿热灭菌法ABCDE )设备渗漏 D 培养基和设备灭菌不彻底ABCDE )射线灭菌法化学药品灭菌法E 过滤除菌法9. 固定化酶的特点是ABCD )导酶的底物可以反复屡次使用易与产物别离使生产管道化、 连续A 稳定、寿命长 B化及自动化 E 专一性差、催化效率低10. 近代微生物工业具有以下特点

27、ABCDE )A 由自然发酵转为代谢控制发酵和人工支配遗传因子的发酵微生物酶反响生物合成和化学合成相结合 C 向大型发酵和连续化、自动化方向开展D 微生物工业涉及国民经济的各个领域 E 从糖质原料转到利用石油、天然气、空气及纤维素资源11. 异型乳酸发酵的产物有 ACDE A 微生物菌体A 乙醇 B 甘油 C 乳酸 D CO2 E 乙酸12. 按微生物发酵产品的性质,现代发酵工业涉及的范围包括 ABCDE 发酵 B 微生物酶发酵 C 微生物代谢产物发酵 D 微生物的生物转化发酵 E溶氧控制微生物特殊机能的利用13. 固定化细胞的制备方法包括A 层析法 B 吸附法 C 共价法14. 液态深层好氧

28、发酵根本操作的控制点包括 控制 C pH 控制 D15. 酶合成阻遏包括A 末端代谢产物阻遏 B 底物阻遏 CE 酶量阻遏16. 分批培养过程中,细菌生长阶段包括 A 迟滞期 对数生长期 C 期17. 以下不是微生物生长、繁殖所必须的物质的是 A 、激素B 、核苷酸 C18. 高温对培养基成分的有害影响,表现在A 形成沉淀 B 破坏营养 C 降低培养基浓度19. 目前发酵过程已经实现在线测量和控制的参数是B pH13.BCDE 包埋法 D 交联法 EB 温度ABCDE A 泡沫控制E 补料控制 ACD 结构类似物阻遏 D 分解代谢物阻遏ABCD 稳定期 D 衰亡期 E 孢子形成 DE 、维生素

29、 D 、色素 E 抗生素 ABCDE 提高色泽 D 改变培养基的 pH 值 EABCDE 溶解氧浓度 D 消泡 E 流量ABCDE)2)01. 影能响影响培养发酵基灭过程菌效中温果度的变因素化有的因素是A. 微生物分解有机物释放的能量 B机械搅拌 C 水分蒸发 D 发酵罐散热 E 菌体自溶A 温度时间C pH值 D 培养基成分和颗粒物质E 泡沫ABDE )22. 补料有利于控制微生物的中间代谢, 补料的内容有A 能源和碳源 氮源 C 消泡剂 D 微量元素或无机盐E 诱导酶的底物 五、填空题1. 淀粉水解糖的制备可分为酸解法、酶解法和酸酶结合法 三种。2. 糖酵解途径中的三个重要的关键酶是己糖激

30、酶、磷酸丙糖激酶、丙酮酸激酶。3. 甘油的生物合成机制包括在酵母发酵醪中参加亚硫酸氢钠 与乙醛起加成反响和在碱性 条件下乙醛起歧化反响。4. 微 生 物 的 吸 氧 量 常 用 呼 吸 强 度 ; 耗 氧 速 率 两 种 方 法 来 表 示 , 二 者 的 关系5. 发酵热包括生物热;搅拌热;蒸发热和辐射热等几种热。6. 发酵过程中调节 pH 值的方法主要有添加碳酸钙法;氨水流加法和尿素流加法。7. 微生物工业上消除泡沫常用的方法有化学消泡;机械消泡 两种。8. 谷氨酸等电点提取工艺是根据在等电点时氨基酸的溶解度最小的原理确定的。9. 固定化酶的制备方法可分物理吸附法、载体偶联法、交联法和包埋

31、法等。10. 可比喻成细胞内流通的能量货币是ATP 。11. 一条典型的微生物群体生长曲线可分为迟滞期、 对数期;稳定期;衰亡期四个生长时期12. 常用菌种保藏方法有斜面保藏法、 沙土管保藏法、 液体石蜡保藏法; 真空冷冻保藏法等。13. 培养基应具备微生物生长所需要的五大营养要素是碳源、 氮源;无机盐;生长因子和水。14. 电子通过电子传递链传递的最终命运是和_氧 02 分子结合。15. 提高细胞膜的谷氨酸通透性,必须从控制磷脂的合成着手或者使细胞膜受损伤。16. 根据微生物与氧的关系,发酵可分为 _ 有需氧发酵;厌氧发酵 _两大类。17. 在三羧酸循环和糖酵解反响中,一个吸收电子的重要辅酶

32、是_ NAD+_ _ 。18. 工业微生物育种的根本方法包括自然选育、诱变育种; 代谢控制育种;基因重组定向 育种 等。19. 肠膜明串珠菌进行异型乳酸发酵时,产物为 乳酸;乙醇; C02 。20. 诱导酶指存在底物时才能产生的酶,它是转录水平上调节酶浓度的一种方式。21. 谷氨酸对糖的重量理论转化率为 81.7% 。22. 发酵工业的开展经历了自然发酵,纯培养技术的建立,通气搅拌的好气性发酵技术的建 立,人工 诱变育种代谢控制发酵技术的建立,开拓新型发酵原料时期,与基因操作技术相 结合的现代发酵工 程技术 等六个阶段。23. 去除代谢终产物主要是通过改变细胞的 . 膜的通透性来实现。24.

33、谷氨酸的生物合成的途径包括 EMP, HMP TCA 循环, DCA 循环, C02 固定作用。25. 获得纯培养的方法有稀释法,划线法,单细胞挑选法,利用选择培养基别离法等方法。26. 生长因子主要包括维生素,氨基酸,碱基,它们对微生物所起的作用是供给微生物自身 不能合成 但又是其生长必需的有机物质。27. 微生物生长和培养方式,可以分为 分批培养,连续培养,补料分批培养三种类型。28. 影响种子质量的主要因素包括培养基, 种龄与接种量,温度, pH 值,通气和搅拌,泡沫 , 染菌的控制和种子罐级数确实定。29. 抗生素形成的主要代谢调节机制有分解代谢物调节,磷酸盐调节, NH4 啲抑制作用

34、,次 级代谢的反响调节和次级代谢的能荷调节等。30. 空气除菌的方法有 . 加热杀菌法,静电除菌法,介质过滤除菌法31. 发酵产物的浓缩和纯化过程一般包括发酵液预处理,提取,精制32. 菌种扩大培养的目的是为每次发酵罐的投料提供数量相当的代谢旺盛的种子。33. 碳源物对微生物的功能是构成细胞物质和代谢产物、异养微生物的主要能源物质 _ 。34. 微生物的营养类型可分为光能自养型,光能异养型,化能自养型,化能异养型。35. 在微生物研究和生长实践中,选用和设计培养基的最根本要求是 _ 目的明确,营养 协调,物理 化学条件适宜和价廉易得。36. 液体培养基中参加 CaC03 勺目的通常是为了 调节

35、 pH 值。37. 实验室常用的有机氮源有牛肉膏,蛋白胨 _等,无机氮源有 硫酸铵,硝酸钠, 等。为 节约本钱,工厂中常用 _尿素等作为有机氮源。38. 呼吸作用与发酵作用的根本区别在于 电子的最终受体不同。39. 乳酸菌进行同型乳酸发酵时通过 EMP 途径,产物为 乳酸 ,肠膜明串珠菌进行异型 乳酸发酵时通过 HMP 途径,产物为乳酸、 乙醇和 二氧化碳 。40. 操纵子是由 结构基因,操纵基因,启动子组成。六、简答题1. 简述菌种保藏的根本原理及措施 答:菌种保藏的根本原理主要是根据菌种的生理生化特点,人工地创造条件,使菌种的代 谢活动处于不活泼状态,同时,使菌种防止污染、死亡和变异。保藏

36、菌种时首先要挑选优良纯种,最好是它们的休眠体 ( 孢子、芽胞等 ) ;其次,要创造一个有利于休眠的环 境条件, 如低温、枯燥、缺氧和缺乏营养物质等,即可以到达降低其代谢活动,延长保存 期的目的。2. 简述温度对发酵的影响 答:温度对发酵的影响是多方面的,对菌体生长和代谢产物形成的影响是 由各种因素综合 表现的结果。 1) 温度升高,酶促反响速度加大,生长代谢加快,产物生成提前。但 温度 愈高酶失活愈快,菌体易于衰老影响产物生成。2) 温度通过影响发酵液中溶解氧从而影响发酵。 3 温度能影响生物合成方向4 温度能影响微生物酶系的组成及酶的特性5 同一种生产菌,菌体生长和积累代谢产物的最适温度往往

37、不同。3. 简述大规模发酵生产对菌种选择的要求 答:发酵生产对菌种选择的要求包括: 1 能在易得、价 廉的原料制成的培养基上迅速生 长,且代谢产物产量高。目标产物最好能分泌到胞外,以降低产物 抑制并利于产物别离。2 发酵条件粗放、易于控制,且所需的酶活性高。3 菌种生长和发酵速度较快,发酵 周期短。发酵周期短的优点在于感染杂菌的时机减少;提高设备的利用率。4 根据代谢 控制的要求,选择单产高的营养缺陷型突变菌株或调节突变菌株或野生菌株。5 抗杂菌、 抗噬菌体能力强。 6 菌种纯粹,遗传性状稳定,以保证发酵生产和产品质量的稳定性。 菌种退化,生产性能下降是生产中 常碰到的问题。 7 菌体不是病源

38、菌,不产生任何有害 的生物活性物质和毒素包括抗生素、激素 和毒素等 ,以保证平安。4. 简述发酵热产生的原因 .答:微生物分解有机物释放的能量, 一局部用于合成 ATP, 另一局部散发到培养基中时,会 引起发酵温度升高生物热 ;机械搅拌也会产生一局部热量引起温度升高搅拌热 。此 外, 发酵罐壁散热 辐射热 、水分蒸发蒸发热会带走局部热量,使发酵温度降低5. 简述发酵过程进行中间补料的原那么 . 答:菌体生长代谢需要一个适宜的浓度,过高的浓度对菌体生 长有抑制作用,过低,不能 满足产物合成的需要。中间补料的原那么是使生产菌在分泌期有足够多而 不过多的养料,使 代谢活动朝着有利于合成产物的方向开展

39、。6. 简述发酵生产中如何调节 pH 值答:在实际发酵生产中,调节 pH 值的方法应根据具体情况加以选用。 1 调节培养基的 初始 pH 值。初始 pH 值是指发酵液配制完毕后、灭菌前的pH 值 注意:灭菌前与灭菌后 pH值有所不同 。或参加缓冲剂如磷酸盐制成缓冲能力强、pH 值改变不大的培养基。2在发酵过程中加弱酸或弱碱进行 pH 值的调节,合理地控制发酵条件,如添加CaC03 或调节通气量来控制 pH 值。 3进行中间补料是调节 pH 值较好的方法,既调节培养液的 pHpH 值来提高发酵产率已在酶制值,又可补充营养,如氨水、尿素流加法等。通过补料调节 剂发酵和抗生素发酵生产上取得明显的效果

40、。7. 简述发酵工业经历的几个不同阶段答:发酵工业经历了以下几个不同阶段:1 自然天然发酵时期 2 纯培养技术的建 立 3 通气搅拌好气性发酵工程技术的建立 4 人工诱变育种与代谢控制发酵工 程技术的建立 5 开 拓新型发酵原料时期 6 与基因操作技术相结合的现代发酵工程技术阶段8. 简述反响阻遏和反响抑制答:在微生物合成代谢过程中,反响阻遏和反响抑制往往共同对代谢起着调节作用,它们通过对酶的合成和酶的活性进行调节,使细胞内各种代谢物浓度保持在适当的水平。反响 阻遏是转录水平的 调节,产生效应慢,反响抑制是酶活性水平调节,产生效应快。此外,前者的作用往往会影响催化一系列反响的多个酶,而后者往往

41、只对是一系列反响中的第一个酶起作用。9. 简述谷氨酸的生物合成途径答:大致是:葡萄糖经糖酵解 EMP 途径和己糖磷酸支路 HMP 途径生成丙酮酸,再氧 化成乙 酰辅酶A 乙酰COA,然后进入三羧酸循环,生成 a酮戊二酸°酮戊二酸在 谷氨酸脱氢酶的催化 及有 NH+4 存在的条件下,生成谷氨酸。10. 简述发酵工业对微生物菌种的要求答:发酵工业对微生物菌种的要求是:1 能在易得、价廉的原料制成的培养基上迅速生长,且代谢产物产量高。 目标产物最好能分泌到胞外, 以降低产物抑制并利于产物别离。2发酵条件粗放、易于控制,且所需的酶活性高。3 菌种生长和发酵速度较快,发酵周期短。发酵周期短的优

42、点在于感染杂菌的时机减少;提高设备的利用率。4 根据代谢控制5 抗杂菌、抗 噬的要求,选择单产高的营养缺陷型突变菌株或调节突变菌株或野生菌株菌体能力强。 6) 菌种纯粹,遗传性状稳定 ( 不易变异退化 ) ,以保证发酵生产和产品 质量的稳定性。 菌种退化,生产性能下降是生产中常碰到的问题。 7) 菌体不是病源菌, 不产生任何有害的生物活性 物质和毒素,以保证平安。11. 简述代谢网络假说的要点答:代谢网络假说的要点包括: 1) 代谢途径 (中心、注入、发散 )交织形成网络; 2) 分 解代谢和合 成代谢具有单向性; 3) ATP 是通用的能量载体; 4) NAD(P)H 以复原当量形 式携带能

43、量。12. 简述发酵醪的一般特征答:发酵醪的一般特征是: 1) 发酵醪大局部是水; 2) 发酵醪中发酵产物浓度较低; 3) 发酵醪中的 悬浮固体物主要含有菌体和蛋白质胶状物; 4) 培养基残留成分中含有无机盐 类、非蛋白质大分子杂 质及其降解产物; 5) 除发酵产物外, 伴有一些代谢副产物; 6) 发 酵醪中含有色素、热原质、毒性 物质等有机杂质。13. 简述生物传感器的工作原理 答:生物传感器的工作原理:将酶、细胞,甚至细胞器、组织或抗体 固定于透性膜上构成 生物敏感膜。待测物质经扩散作用进入生物膜层,经分子识别,发生特异性的 生化反响, 产生的信号继而被相应的化学或物理换能器转换成可定量、

44、可处理的电信号,再经放大 输 出,就可从仪表上读取待测物的浓度。14. 简述泡沫给发酵造成的影响答:泡沫给发酵造成的影响包括: 1) 泡沫过多, 升到罐顶从轴封渗出, 易造成染菌; 2) 使发酵罐 装填系数减少, 降低了设备利用率; 3) 影响通风搅拌正常进行, 影响氧的传递, 阻碍菌的呼吸; 4) 增加菌群的非均一性, 微生物随泡沫漂浮; 5) 造成产物的损失; 6) 参加消泡剂给下游提取工序 带来困难。15. 简述实验室用压力锅进行培养基灭菌时的考前须知 答:压力锅是实验室进行培养基灭菌最常用的 设备,使用时应注意以下几点: 6) 实验室 常采用 1 公斤/厘米 2(约 15 磅/?英寸

45、2)的蒸汽压(蒸汽温度约121 C处理15? 30分钟,?即可杀死各种微生物及其芽孢。7在使用高压灭菌锅时,必须将灭菌锅内的冷空气完全 赶光,否那么压力表所表示的压力是水蒸汽压力和空气压力的总和, 不是 水蒸汽的实际压力, 它所相当的温度与灭菌锅内的温度是不一致的。 8 灭菌完毕应缓慢减压放 汽 ,假设急 速减压,那么容器内装的液体必然会突然沸腾,将试管或三角瓶棉塞顶出或弄温,造成污 染。 应在压力下降至零后再翻开灭菌锅的盖子,否那么蒸汽外溢会烫伤人16. 简述包埋法制备固定化酶细胞的方法及特点答:包埋法是将酶或细胞包埋在凝胶的微小空格内或埋于半透膜的微型胶囊内。该法操作简单,又不会明显影响生

46、物活性,是比拟理想的方法,目前应用最多。但其包埋材料即载体会一定程度地阻碍底物和氧的扩散,影响催化效果。17. 简述氧化塘生物处理法的原理 答:氧化塘法处理废水中污染物,主要是由于好氧性微生物的代谢 活动而氧化降解,氧化 有机物所需的溶解氧,由塘内藻类的光合作用以及塘面的复氧作用提供。氧 化塘内发生光合作用和共生作用,即好氧微生物利用藻类光合作用所生成的氧,对BOD 物质进行分解,另一方面,藻类又利用在这一氧化分解过程中所产生的 C02 进行光合作用。藻类和微生物 在氧和 CO2 的互相接收状态下共生,也就在此过程中,有机性污水得到净化。18. 举例说明生物化学意义上的“发酵和工业意义上的“发

47、酵概念的异同。答:生物化学意义上的“发酵 ,指微生物在无氧条件下分解各种有机物质产生能量的一种 方式。如葡萄糖在无氧条件 下被微生物利用产生酒精并放出二氧化碳,同时获得能量;丙 酮酸被复原为乳酸而获得能量等。而 工业意义上的“发酵 ,它泛指利用微生物制造成生产 某些产品的过程。它包括厌氧培养的生产过 程, 如酒精、乳酸、丙酮丁醇等, 以及通气 有 氧培养的生产过程,如抗生素、氨基酸、酶制 剂等的生产。产品既有微生物细胞代谢产物,也包括菌体细胞如单细胞蛋白SCP 、酶等。19. 简述选择和配制发酵培养基应遵循哪些根本原那么1) 必须提供合成微生物细胞和 发酵产物的答:选择和配制发酵培养基时应遵循

48、以下几项根本原那么: 根本成份; 2) 所用的单位营养物质能产生最大量的微生物体或发酵产物; 能形成最大浓度的微 生物体或产物; 3) 能形成最大产物生成率, 从而缩短发酵周期; 4) 尽量减少副产物的形成,便于 产物的他离纯化; 5) 对生产中除发酵以外的其他方面如通 气、搅拌、精制、废弃物的处理等所带来 的困难最少; 6) 原料价格低廉、质量稳定、取 材容易。20. 简述固定化酶的特点答:固定化酶的特点有: 1) 固相的酶作用于液相的底物; 2) 仍具有酶的高度专一性、 催化效率高 及作用条件温和等特点; 3) 较水溶性酶稳定、使用寿命长; 4) 易用过滤或 离心的方法与反响液分 离,可以

49、反复使用屡次; 5) 可装成酶柱,实现生产管道化、连续 化及自动化; 6) 不污染反响液, 产物的别离提纯简单,收率高。 缺点:固定化过程中往 往会引起酶的七、论述题1. 分析影响谷氨酸发酵产量的因素及其调控机制答:在谷氨酸发酵过程中,影响菌种代谢途径的因素有氧、温度、 pH 和磷酸盐等,并且谷 氨酸产生菌需要生长因子生物素。当生物素缺乏时,菌种生长十分缓慢;当生物素过 量时,那么 转为乳酸发酵。因此,一般将生物素控制在亚适量条件下,才能得到高产量的谷 氨酸。 在谷氨酸 发酵中,如果能够改变细胞膜的通透性,使谷氨酸不断地排到细胞外 面,就会大量生成谷氨酸。研究说明,影响细胞膜通透性的主要因素是

50、细胞膜中的磷脂含量。因此,对谷氨酸产生菌的选育,往往从控制磷脂的合成或使细胞膜受损伤入手,如生物素缺陷型菌种的选育。生物素是不饱和脂肪酸合成过程中所需的乙酰CoA 的辅酶。生物素缺陷型菌种因不能合成生物素,从而抑制了不饱和脂肪酸的合成。而不饱和脂肪酸是磷脂的组成成分之一。因此,磷脂的合成量也相应减少,这就会导致细胞膜结构不完整,提 高细胞膜对谷氨酸的通透性。 在发酵过程中,氧、温度、 pH 和磷酸盐等的调节和控 制如下:氧。谷氨酸产生菌是好氧菌,通风和搅拌不仅会影响菌种对氮源和碳源的利用率,而且 会影响发酵周期和谷氨酸的合成量。尤其是在发酵后期,加大通气量有利于谷氨酸的合成。温度。菌种生长的最

51、适温度为30? 32 Co当菌体生长到稳定期,适当提高温 度有利于产酸,因此,在发酵后期,可将温度提高到34? 37 CopH谷氨酸产生菌发酵 的最适pH在7.0? 8.0。 但在发酵过程中,随着营养物质的利用,代谢产物的积累,培养液 的 pH 会不断变化。如随着氮源的利用,放出氨,pH 会上升;当糖被利用生成有机酸时, pH会下降。磷酸盐。它是谷氨酸发酵过程中必需的,但浓度不能过高,否那么会转向缬氨酸发酵。2. 分析发酵生产中杂菌污染的途径以及一旦发现染菌应采取的挽救措施答:发酵生产中杂菌污染途径包括以下几个方面:1种子带菌。原因主要有:培养基及用具灭菌不彻底;菌种在移接过程中受污染;菌种在

52、培养或保藏过程中受污染等。2无菌空气带菌。杜绝无菌空气带菌,必须从空气净化流程和设备的设计、过滤介质的选用和装填、过滤介质的灭菌和管理等方面完善空气净化系统。3培养基和设备灭菌不彻底导致染菌。原因主要有:原料性状影响灭菌效果;实罐灭菌时未能充分排出罐内空气;培养基连续灭菌时,蒸汽压力波动大, 培养基未到达灭菌温度, 导致灭菌不彻底而污染; 设备、 管道存在“死角。4设备渗漏引起染菌。发酵设备、管道、阀门、的长期使用,由于 腐蚀、磨擦和振动等原因,往往 造成渗漏。5操作失误和技术管理不善也会引起染菌。如移种时或发酵过程罐内压力跌零,使外界空气进入而染菌;泡沫顶盖而造成污染;压缩空气压力突然下降,

53、使发酵液倒流入空气过滤器而造成污染等等。发酵生产中一旦发现污染杂菌,应考虑采取以下措施:1 首先应尽力寻找染菌的原因和途径,杜绝后患。 2 同时,对染菌的发酵液要根据具体情况做出处理。例如:发现种子 染菌,应 立即加热灭菌后废弃,绝对不能将染菌种子接入发酵罐,以免造成更大损失,如 果是发现早期染菌, 那么可采取适当补充营养物,重新灭菌,再接种发酵;如果在发酵中后 期染菌,而杂菌又不影响生产菌株的正常发酵或不阻碍产品的别离、提纯,那么可让其“共3 分 3 染菌后的挽救措施要生共长、“和平共处至发酵终了,否那么就应提前放罐 根据不同生产菌株的特点、产品性质以及各工厂的具体情况,采取可行方法。3.

54、分析影响谷氨酸发酵产量的因素及其调控机制 答:在谷氨酸发酵过程中,影响菌种代 谢途径的因 素有氧、温度、 pH 和磷酸盐等,并且谷氨酸产生菌需要生长因子一一生物素。 当生物素缺乏时,菌 种生长十分缓慢;当生物素过量时,那么转为乳酸发酵。因此,一般将 生物素控制在亚适量条件下, 才能得到高产量的谷氨酸。 在谷氨酸发酵中,如果能够 改变细胞膜的通透性,使谷氨酸不断地排到细胞外面,就会大量生成谷氨酸。研究说明, 影响细胞 膜通透性的主要因素是细胞膜中的磷脂含量。因此,对谷氨酸产生菌的选育,往 往从控制磷脂的合 成或使细胞膜受损伤入手,如生物素缺陷型菌种的选育。生物素是不饱 和脂肪酸合成过程中所需的

55、乙酰 CoA 的辅酶。生物素缺陷型菌种因不能合成生物素,从而 抑制了不饱和脂肪酸的合成。而不饱 和脂肪酸是磷脂的组成成分之一。因此,磷脂的合成 量也相应减少,这就会导致细胞膜结构不完整, 提高细胞膜对谷氨酸的通透性。在发酵过程中,氧、温度、pH和磷酸盐等的调节和控制如下:氧。谷氨酸产生菌是好氧 菌,通风和搅拌不仅会影响菌种对氮源和碳源的利用率,而且会影响发酵周期和谷氨酸的合成量。尤其是在发酵后期,加大通气量有利于谷氨酸的合成。温度。菌种生长的最适温度为30? 32 °。当菌体生长到稳定期,适当提高温度有利于产酸,因此,在发酵后期,可将温度提高到34? 37 C。pHo谷氨酸产生菌发酵的最适 pH在7.0? 8.0。但在发酵过 程中,随着营养物质的利用, 代谢产物的积累,培养液的pH 会不断变化。如随着氮源的利用,放出氨

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