仔猪沙门氏菌病的诊断_防治药物筛选与防控

1、恩施职业技术学院学报 (综合版 Journal of Enshi Technical College (Comprehensive Edition 仔猪副伤寒(Paratyphus swine又称猪沙门氏菌 病(Swinesa lmonellosis, 是由沙门氏菌属的猪霍乱沙 门 氏 菌 (S.choleraesuis, 鼠 伤 寒 沙 门 氏 菌 (S. typhimurium 、 肠炎沙门氏菌(S.enteritidis等血清型 的菌株引起的一种仔猪的高热传染病 1。 本病多发 于1-4月龄的仔猪, 急性病例表现为败血症, 慢性病 例为坏死性肠炎, 或卡他性或干酪性肺炎 2, 给养猪 业

2、造成重大经济损失, 而具有多重耐性的猪霍乱沙 门氏菌流行对人类健康具有很大的潜在威胁 3, 本 文采用常规细菌分离培养和生化试验 、 血清学凝集 试验 、 动物实验对发病猪场疑似病料的细菌分离菌 株进行鉴定,结果分离菌株符合沙门氏菌检验标 准, 采用纸片法进行药敏试验, 筛选敏感药物进行 治疗, 从而降低了养殖户的经济损失 。1发病情况湖北恩施自治州某中型猪场,饲养总头数约 1,500头, 2008年5月24日发现保育小猪发病, 猪只精 神不振, 厌食, 其耳翼 、 四肢末端及腹部发绀, 并有 黄色泥状下痢现象,其发病率约16%,致死率约 40%, 畜主曾在饲料中添加磺胺嘧啶钠以及注射青 霉素

3、, 但病情并无改善, 请当地兽医用泰乐菌素 、 阿 莫西林作肌肉注射, 未见明显好转, 于2008年5月29 日向我院求援 。2临床诊断2.1流行病学调查病例为散发性,周边养殖户未见猪只发病, 2008年5月14日,畜主从恩施某种猪场购进一批仔 猪, 观察一个星期后合群, 合群4天后发病, 感染猪 多是2-3月龄断奶仔猪, 大猪与种猪未见发病, 同时 5月份以来, 恩施气候多变, 阴雨连绵, 早晚温差大, 加之猪场栏圈建设不合理, 饲养密度高, 严重拥挤, 猪舍潮湿较污秽, 由此推断, 引种 、 合群 、 气候多变 、 饲养管理不善是本次发病诱因 。2.2临床检查急性型病猪, 初期体温升高到4

4、1-42 , 精神沉 郁, 伏卧, 食欲废绝, 呼吸困难, 步行摇晃, 呕吐与腹 泻, 有时有腹疼症状, 耳尖 、 颈 、 嘴尖 、 前胸 、 腹下 、 蹄 尖 、 尾根皮肤有蓝紫色斑点 。 暴发初期, 少数病猪不 显任何病状死亡, 少数出现病状后24h 即死亡, 多数 病程为2-4d , 病死率很高, 经剖检发现有急性败血 症变化 。亚急性病猪, 体温40.5-41.5 , 精神不振, 食欲 减退, 寒颤喜卧扎堆, 上下眼睑粘附黏性或脓性分 泌物, 病初便秘后下痢, 粪便淡黄色或淡绿色, 带有仔猪沙门氏菌病的诊断 、 防治药物筛选与防控 龚云登 1周代军 2易志恩 3(1. 湖北恩施职业技术

5、学院 , 湖北 恩施 445000;2. 恩施市畜牧兽医局 , 湖北 恩施 445000;3. 恩施州畜牧兽医局 , 湖北 恩施 445000摘要:仔猪副伤寒是由猪霍乱沙门氏菌 、 鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌引起危害仔猪健康的传染病, 主要临床 症状表现为腹泻, 急性出现败血症 。 对发病猪场疑似病料的分离菌株进行鉴定, 结果分离菌株符合沙门氏菌检验标 准, 采用纸片法进行药敏试验, 筛选敏感药物进行治疗, 取得很好的效果, 降低了养殖户的经济损失 。关键词:沙门氏杆菌 诊断 防控中图分类号:S853文献标识码:A 文章编码:0000-2011/ES(200903-0061-03收稿日期 :

6、2009-06-15作者简介 :龚云登 (1965-, 男 , 恩施职业技术学院副教授 。 研究方向 :养殖技术推广及动物疫病防治 。61血液或假膜, 腹部皮肤出现弥漫性痂样湿疹, 少数 病猪有咳嗽, 呼吸困难等症状, 极少康复, 有些病猪 消瘦 、 营养不良 、 皮肤无弹性, 眼结膜苍白, 估计病 程已达10d以上, 病死率40%。2.3剖检病变急性型腹腔有少许积液, 胃底充血, 胃粘膜脱 落; 脾脏显著肿大, 边缘钝, 呈暗紫色或蓝色, 慢性 型有少量灰黄色结节病变, 切面呈蓝紫色, 质地如 橡皮样, 脾浆膜面密覆纤维素渗出物, 肝脏肿大, 胆 囊中有小溃疡;肠系膜淋巴结呈索状肿胀且出血,

7、 肠壁水肿呈紫色, 肠道粘膜严重脱落, 严重部位好 象里面又套了一段肠, 腥臭, 大肠粘膜有麸皮样坏 死物, 10d以上病例盲肠 、 结肠肠壁增厚, 粘膜上覆 盖着一层弥漫性腐乳状物质,剥开后底部红色, 为 纤维素性坏死性肠炎, 病变突出于肠粘膜, 周边似 堤状, 中央稍凹陷, 表面粗糙, 有的出现不规则陈旧 性溃疡灶, 肠管浆膜面也因纤维素及纤维附着而粘 连 。 肾肿大, 膀胱粘膜有出血点; 胸腔可见肺水肿, 心包膜与心外膜粘连, 心包腔充满纤维素使心脏呈 现绒毛心病变, 心内膜有出血斑点 。3实验室检查3.1涂片镜检无菌采取病猪心血 、 肝 、 脾涂片, 革兰氏染色, 镜检可见两端稍圆的细

8、长杆菌,革兰氏染色阴性, 根据临床症状 、 流行病学特征和剖检病变, 疑似沙 门氏菌感染 。3.2细菌分离培养无菌采取病猪心血 、 肝 、 脾 、 淋巴结接种普通琼 脂培养基 、 麦康凯琼脂培养基和SS琼脂平板培养 基 、 鲜血琼脂培养基经37 恒温箱中培养24h后观 察, 结果在普通琼脂培养基上生长良好, 可见细小 、 边缘光滑湿润半透明菌落; 在麦康凯琼脂上形成无 色 圆形 光滑 湿润 微隆起半透明 、 边缘整齐的灰白 色菌落,在SS琼脂培养基上有无色透明的圆形菌 落;在鲜血琼脂培养基上可见光滑稍隆起的菌落 。 根据培养特征, 初步诊断为沙门氏菌感染 。3.3细菌生化实验参考GB/T 47

9、89.4-2003食品卫生微生物学检验 有关沙门氏菌检验的标准进行生化鉴定, 取典型菌 落接种生化鉴定管 (杭州天和微生物试剂有限公司 生产, 37 培养18-24h,结果分离菌能发酵三糖铁 (TSI 、 葡萄糖 、 乳糖 、 木糖 、 卫矛醇 、 麦芽糖 、 鼠李糖和 山梨醇产酸产气, 不分解乳糖 、 棉籽糖 、 蔗糖; H:S产 生试验 、 M.R试验阳性; 尿素 、 靛基质 、 V-P试验阴性, 生化实验结果与沙门氏菌检验标准符合 4。3.4血清学反应采用玻板凝集法, 用白金耳挑取可疑沙门氏杆 菌培养物少许, 置于清洁载玻片上和蒸馏水混匀, , 在玻片上滴加l滴A F多价O血清 (兰州生

10、物研究所 生产, 在滴1滴蒸馏水作对照, 20min后在显微镜观 察, 可以看到四周呈透明 、 颗粒状 、 成絮状的凝集块 为阳性反应 5。3.5动物实验挑取分离培养好的菌落, 培养过夜, 用无菌生 理盐水无菌10倍稀释备用, 取5只成年健康小白鼠, 腹腔接种0.2ml 。 对照组5只小鼠用0.2ml无菌生理盐 水腹腔接种 7。 连续观察2周, 结果试验组小白鼠全 部死亡, 腹围增大, 剖检见腹水 。 肝脏质脆 、 肿大 、 出 血 、 坏死点 。 肾肿大 、 充血 。 胃幽门出血 、 粘膜脱落 、 变薄与肝粘连 、 表明有纤维素渗出 。 肺出血 、 有坏死 点 、 有纤维素性渗出 。 脾脏肿

11、大 、 充血 。 十二指出血 、 肠壁变薄 、 充满黄色水样内容物 。 肠系膜及肠系膜 淋巴结水肿 、 出血 。 无菌采取死亡小白鼠肝脏做细 菌分离培养, 经鉴定与原分离菌株特征相符 。 根据细菌的形态特征 、 生化试验 、 血清学反应 、 动物实验结果, 确诊为沙门氏菌感染 。3.6药敏试验按常规干纸片法进行 (杭州天和微生物试剂有 限公司生产, 结果盐酸环丙沙星 、 盐酸多西环素 、 乳 酸诺氟沙星 、 恩诺沙星 、 氟苯尼考高敏; 卡那霉素 、 呋喃唑酮 、 泰乐菌素 、 多粘菌素中敏; 青霉素 、 阿莫 西林 、 链霉素 、 土霉素 、 林肯霉素 、 磺胺类药低敏 。 4治疗方法发病仔

12、猪隔离治疗, 抗菌消炎选择敏感药物氟 苯尼考5-10ml 腹腔注射 (或后海穴注射 , l次/日, 连 注3-7d或盐酸环丙沙星注射液5mg/kg 体重, 作肌肉 注射, l 次/12h, 连用3-7d, 内服乳酸诺氟沙星10m/kg 体重, 每日2次连用5d, 同时内服复方新诺明片, 1片 /7kg, 每天2次, 连服3-7天 。辅助治疗则补充电解质防止脱水, 在饮水中添 加口服补液盐, 促进体液平街, 同时在饮水中加入 葡萄糖 、 电解多维补充能量和维生素 。 强心:使用安 那加注射液:肌注0.5-1.0g/头 。 解热:对于高热(41 发病猪可肌注安乃近注射液 。5防控措施疫苗接种:未发

13、病仔猪, 使用仔猪副伤寒弱毒 冻干菌苗, 按使用说明书, 用氢氧化铝生理盐水稀 释, 30日龄仔猪, 肌肉注射1毫升(1头份 。 口服免疫 时, 按规定稀释和拌料, 空腹喂苗, 用凉开水按每头 份5毫升稀释, 每头灌服5毫升, 或拌少量饲料喂服62并保证每头猪均能吃到足够的菌苗,确保免疫效 果 。药物预防:未发病猪群, 用盐酸多西环素 (每吨 饲料添加150g +阿散酸 (每吨饲料添加150g , 连续 使用5-7天, 然后将剂量减半, 再连续使用2周; 也可 用恩诺沙星 (或环丙沙星,诺氟沙星 、 氧氟沙星 +TMP:每吨饲料添加本类药物120g, TMP50g, 连续 使用5天, 然后剂量

14、减半, 继续使用1周 。消毒措施:确实做好消毒工作, 以消毒水对全 场猪只进行喷雾消毒, 来降低环境中的细菌量 。 对 病猪及带菌猪排泄物及污染的饲料 、 饮水 、 用具 、 食 槽 、 圈舍要彻底清洁并消毒, 经常保持圈干燥, 勤换 垫草, 对病死猪只应作无害化处理 。饲养管理:坚持自繁自养, 仔猪要提前补料, 断 乳仔猪根据体质强弱大小, 分槽饲喂, 给以优质而 易消化的多样化饲料, 适当补充矿物质, 增强仔猪 抵抗力; 防止突然更换饲料, 保持舍内通风, 降低饲 养密度, 以减少应激因素影响; 饲料中选择性添加 适量抗生素预防细菌性疾病 。通过采取针对性的治疗和防控措施后, 发病猪 场除

15、8头严重病例死亡外, 病情逐渐得到控制, 20天 后恢复正常 。6讨论沙门氏菌的致病机理与细菌的毒力质粒 、 产生 的内毒素和肠毒素有关, 毒力质粒主要引起沙门菌 性肠炎 。 当不良因素刺激使动物处于应激状态时, 肠道正常菌群失调, 肠蠕动缓慢, 促使沙门菌移居 于小肠下端和结肠段生长繁殖; 进而移居于小肠下 端和结肠后段, 肠黏膜组织中的树突状细胞从上皮 细胞间伸出树突, 直接将肠腔中的细菌摄入并增殖 6, 感染邻近细胞或进人固有层细胞, 也可被吞噬细 胞吞噬而进人局部淋巴结;机体受病菌侵害后, 刺 激前列腺素分泌, 从而激活腺苷酸环化酶, 使血管 内的水分 、 HCO-3和Cl-向肠道外渗

16、出,引起急性回 肠炎和结肠炎 。 内毒素主要引起沙门菌性败血症 。 沙门菌细胞壁中的脂多糖是一种毒力因子 。 它由一 种低聚糖芯 (称为0特异键 和一种脂质A成分所组 成 8, 是内毒素的主要成份, 可引发沙门菌性败血 症, 导致动物发热 、 黏膜出血 、 白细胞先减少后增 多 、 血小板减少 、 肝糖消耗 、 低血糖症, 造成微循环 障碍, 以致休克死亡 。 肠毒素是有些沙门菌如鼠伤 寒沙门菌某些菌株 、 都柏林沙门菌等产生, 是一种 使动物发生沙门菌性肠炎的毒力因子 9。仔猪副伤寒爆发常与继发感染 、 免疫抑制 、 环境因素 、 应激因素等有关 10。 继发感染是猪沙门氏菌 爆发的重要原因

17、, 尤其是继发于某些病毒和细菌性 疾病, 例如猪瘟 、 蓝耳病 、 猪传染性胃肠炎 、 猪流行 性腹泻 、 猪梭菌性肠炎 、 仔猪黄白痢等 。 免疫抑制性 因素如猪瘟 、 蓝耳病 、 圆环病毒病等会使猪体的抵 抗力降低, 从而使沙门氏菌入侵机体, 导致猪只发 病 。 环境因素是仔猪副伤寒爆发不可忽视的诱因, 猪场内病猪 、 带菌猪排泄物含大量沙门氏菌, 极易 污染饲料 、 饮水和器具, 形成强大的污染源; 另外从 空气中漂浮进来的病原菌也极易突破呼吸道粘膜 进一步感染猪群 11。 应激因素也应引起足够重视, 断 奶猪购进和运输造成车内拥挤 、 饮水不充足 、 车内 温度散发困难 、 缺氧等 1

18、2, 都会使猪体的抵抗力降 低, 从而使沙门氏菌入侵机体, 导致发病 。总之, 猪场控制仔猪副伤寒沙门氏菌病必须采 取自繁自养 、 严格隔离检疫 、 预防接种 、 定期消毒 、 药物预防 、 加强饲养管理等综合防控措施, 才能取 得满意的效果 。参考文献 :1蔡宝祥.家畜传染病学(第四版 M.北京:中国农业出版 社 , 2001:52-58.2潘耀谦, 张春杰, 刘思当. 猪病诊治彩色图谱M.北 京 :中国农业出版社 , 2004.3贾爱卿, 郭爱珍, 刘继红等.致病性猪源鼠伤寒沙门氏菌 的耐药特征鉴定及耐药性 消 除 研 究 J.微 生 物 学 报 , 2006, 46(5:789-795.4汪诚天, 叶祝年, 王云芳.兽医实验检验手册M.上 海 :上海科学技术出版社 , 1984.5张以芳.动物微生物学实验指导z.昆明:云南农业 大学 , 2001.6蔡宝祥.家畜传染病学(第四版 M.北京:中国农业出版 社 , 2001:52-58.7徐引弟, 郭爱珍, 贾爱卿等.猪霍乱沙门氏菌的快速分离 鉴定 J.畜牧与兽医 , 2007, 39