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文档简介
1、VWD和DAD两种检测器的区别 1.VWD和DAD两种检测器都属于高效液相色谱仪器的组成部分,只是两者设计有区别,使用有差异而已; 2.VWD只能进行某一特定波长的检测,即事先设定好某一波长,然后在此波长下对流经色谱柱的样品进行检测;DAD检测器可以进行全波长检测,一般是从190nm到400nm的范围扫描,扫描结束后得到一张三维图谱,坐标分别是运行时间、吸收值和波长值,当然你也可以从中调出任何一张波长范围在190nm到400nm的色谱图,此三维图对有关物质检查时的波长选择比较有帮助; 3.关于峰纯度的问题,在DAD检测器上,检查某一色谱峰(A)的峰纯度,首先要对A进行恰当
2、的积分,然后选择合适的参比(分自动和手动,一般选自动,特殊情况下选手动),再选择波长范围(210nm-400nm较合适吧,再低会有基质的末端吸收干扰,会影响峰纯度检查的可信度,当然这要看具体的流动相及等梯度情况啦),之后选择固定阈值(国家局要求在990及以上),最后点一下要测的主峰就可以了。我简单的说一下峰纯度检查的原理吧,是这样的,当要检查某一色谱峰的峰纯度(A)时,软件会在A的起始点、前半中点、顶点、后半中点和结束点(共5点)分别取紫外全扫描图来进行拟合度检查,当拟合度大于阈值(即上述的990)时,软件默认为A的五个点都是一种物质,即A是一种物质的紫外吸收峰,纯的,相反,当拟合度低于阈值时,软件默认A的五个点不是一种物质,即A是两种或两种以上的物质的紫外吸收峰,不纯,就要再进行条件的优化分开它们了。所以峰纯度检查是选择有关物质检查色谱条件的重要环节之一,也就是方法的专属性啦。安捷伦一般是选择光谱归一化法计算峰纯度,简单的说就是从色谱峰上选择5个点(峰起始点、峰上升一半处的点,峰顶点、峰下降一半处的点及峰的结束点,当然作为DAD也可以选择更多),提取这5个点的光谱图进行叠放,看其重合程度来判断色谱峰纯度。取这5个点的纯度因子平均值和阈值比较(一般采用固定阈值
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