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文档简介

1、牛奶中酪蛋白和乳糖的分离、原理牛奶是一种乳状液，主要由水、脂肪、蛋白质、乳糖等组成。牛奶蛋白分为四种：B-乳球蛋白、丫-乳清蛋白、乳清蛋白和酪蛋白。其中酪蛋白对牛奶蛋白的贡献最大，占了80给有10%的磷，对促进大脑发育起至关重要的作用；乳清蛋白分子比较小，相对酪蛋白更加易消化；而乳球蛋白多是牛奶中的生物活性物质，如免疫球蛋白、乳铁蛋白、溶菌酶等。酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质，是含磷蛋白质的复杂混合物。蛋白质是两性化合物，当调节牛奶的pH达到酪蛋白的等电点(pH=4.8)时，蛋白质所带正、负电荷相等，呈电中性，此时酪蛋白的溶解度最小，会从牛奶中沉淀出来，以此分离酪蛋白。因酪蛋白不溶于乙醇和乙醛,可

2、用此两种溶剂除去酪蛋白中的脂肪。乳糖是一种二糖，由一分子B-D-半乳糖的半缩醛羟基与另一分子葡萄糖C4k的醇性羟基缩去一分子水通过B-1,4糖昔键结合而成。乳糖也不溶于乙醇，当乙醇混入乳糖水溶液中，乳糖会结晶出来，从而达到分离的目的。CHOHtt-D- ( + )-葡萄糖(占 36%)orD-葡萄糖CH20HCH20HHOHp-D-半乳糖残基D-葡萄糖残基、实验材料和试剂脱脂乳或脱脂奶粉醛酸-醛酸钠缓冲溶液（PH=4.7）,9511醇，乙触，碳酸钙粉末，苯肌试剂。三、实验步骤1. 从牛奶中分离酪蛋白在烧杯中加入2g脱脂奶粉，再加入40m140C,PH=4.7的醛酸-醛酸钠缓冲溶液40ml,用P

3、H精密试纸检验液体的Pfi（使牛奶pH=4.8）,放置冷却、澄清后，用尼龙布过滤酪蛋白。（在滤液中加入少量粉状碳酸钙，留作乳糖的分离。）依次用乙醇、乙醇和乙醛的等体积混合液、乙酸洗涤酪蛋白，去除脂肪，待酪蛋白充分干燥后称量其重量，并计算牛奶中酪蛋白的含量。2. 从牛奶中分离乳糖在除去酪蛋白的乳清中，加入1.5gCaCO3粉末，搅拌均匀后加热至沸。加CaCO勺目的一方面是中和溶液的酸性，防止加热时乳糖水解，另方面又能使乳白蛋白沉淀。过滤除去沉淀，在滤液中加入1?2粒沸石，加热浓缩至3?5ml,加入10ml95%乙醇（注意离开火焰）和少量活性炭，搅拌均匀后在水浴上加热至沸腾，趁热过滤，滤液必须澄清

4、。加塞放置过夜，乳糖结晶析出，抽滤，用95%噂洗涤产品。3. 乳糖成朕试验取自制乳糖溶于少量水中，浓度约为5%E试管中加入1ml乳糖溶液，1ml苯肌试剂，摇匀，试管口用棉花塞住，在沸水浴中加热，并不时振摇，加热10?15分钟后，取出放置冷却，乳糖朕成结晶析出。取少量乳糖朕在显微镜下观察其结晶形态，可证实为乳糖苯阱试剂有毒，小心使用，勿触及皮肤，如触及皮肤先用稀醋酸洗，再用水洗。四、实验注意事项 酪蛋白等电点随温度不同而变化，等电点pH为4.6?4.8。分离酪蛋白时，边加醋酸，边搅拌，边测pH,同时观察沉淀。开始快搅拌，接近等电点时，应慢搅拌。 酪蛋白沉淀用200目的尼龙布过滤比较好,同时进行抽滤。用滤纸很难过滤;而用纱布过滤,酪蛋白容易粘在其上。

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