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文档简介
1、实验五滴定法测定植物的呼吸强度、实验目的掌握用广口瓶法测定植物的呼吸速率,并比较不同萌发阶段小麦种子及幼芽的呼吸速 率。、实验原理在密闭容器中加入一定量碱液一般用 Ba(OH)z并悬挂新鲜植物材料,则植物材料呼吸放出的二氧化碳可为容器中Ba(OH)2吸收,然后用草酸滴定剩余的碱,从空白和样品二者消耗草酸溶液之差,可计算出呼吸释放的二氧化碳的量。其反应如下:Ba(OH )2CO2BaCO3H2OBa(OH )2(剩余)H2C2O4BaC2O42H2O三、实验器材广口瓶测呼吸装置(如实验图)、电子天平、酸式和碱式滴定管、滴定管架、温度计、尼1一龙网制小篮、1/44moL L 草酸溶液(准确称取重结
2、晶 H2C2O4 2f0 2.865g溶于蒸馏水中,定容至 I OOOmL,每毫升相当于ImgCO)、0.05moL L-氢氧化钡溶液Ba(OH)z 8.6g或Ba(OH)2 8H20 15.78g溶于 I OOOmL 蒸馏水中。如有浑浊,待溶液澄清后使用、酚酞指示剂(称取 lg酚酞,溶于 100mL 95%乙醇中,贮于滴瓶中)。四、实验步骤(一)呼吸强度的测定1.装配广口瓶测呼吸装置取 500mL 广口瓶1 个,加一个三孔橡皮塞。一孔插入一装有碱石灰 的干燥管,使吸收空气中的二氧化碳,保证在测定呼吸时进入呼吸瓶的空气中无二氧化碳;一孔插入温度计;另一孔直径约 1cm,供滴定用。平时用一 小橡
3、皮塞塞紧。在瓶塞下面装一小钩,供装植物材 料用。整个装置如下图。1.碱石衣 二温度计3小橡皮塞4.尼龙筐5一慷懣2.空白滴定拔出滴定孔上的小橡皮塞、用碱滴定管向瓶内准确加入0.05moL L-1Ba(0H)2溶液 20 mL,再把滴定孔塞紧。充分摇动广口瓶几分图 4.1 广口瓶测呼吸强度装置钟。待瓶内二氧化碳全部被吸收后,拔出小橡皮塞加入酚酞3 滴,把酸滴定管插入孔中,用l/44moL L-1草酸进行空白滴定,至红色刚刚消失为止,记下草酸溶液用量(mL),即为空白液滴定值。3.材料滴定值的测定取另一广口瓶测呼吸装置,加20mLBa(OH)2溶液于瓶内,取待测小麦种子 I00 粒,同时称出重量,
4、装入小筐中,打开橡皮塞,迅速挂于橡皮塞的小钩上,塞好塞子(加样操作时,应严格防止室内空气和口中呼出的气体进入瓶内),开始记录时间。经 30min,其间轻轻摇动数次, 使溶液表面的 BaCQ 薄膜破碎,有利于二氧化碳的充分吸收。 到预定时间后,轻轻打开瓶塞,迅速取出小筐,立即重新塞紧。充分摇动2min,使瓶中二氧化碳完全被吸收,拔出小橡皮塞,加入酚酞 3 滴,用草酸滴定如前记下草酸用量,即为样品滴定值。4.取出广口瓶中的小麦种子,放于烘箱中于80C下烘干,并称取干重。5.计算呼吸速率:呼吸速率=(空白滴定值-样品滴定值)*mg CO2/ml 草酸呼吸速率的单位一般可采用mgg -1h-1,式中滴
5、定值以毫升计,mgCOmL1草酸=1。(二)不同状态植物种子呼吸速率的比较用前面描述过的大小一致的广口瓶3 个(可三个实验小组合作),按步骤 3、4 分别测定以下材料的呼吸速率:吸胀的小麦种子 100 粒;萌动的小麦种子 100 粒;芽长 0.5cm 左右的小麦种子 100 粒。根据测定结果,按上述实验式计算以鲜重(或干重)为单位的呼吸速率。并计算每100粒小麦种子 lh 内放出的二氧化碳毫克数。呼吸速率测定记录表处理编号处理方式材料量测定时间(min)空白滴定植(mL)样品滴定植(mL)鲜重干重粒数1吸胀种子2萌动种子3芽长 0.5cm 种子五、注意事项实验课中由于人数多,室内空气中二氧化碳浓度不断升高,是本实验最大的误差来源。 若先做样本测定,后做空白滴定,测定结果甚至出现负值。克服的办法可将广口瓶装满水, 在室外迎风处将水倒净,换上室外空气(若用自来水,还应用无二氧化碳蒸馏水或煮沸过的冷开水洗涤广口瓶),塞好橡皮塞,带回室内进行加液、滴
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