实验四酶的特性实验

1、说明:本实验由四个小实验组成 ,其中第一个实验 （酶的专一性 ）必做, 其她三个小实验选做 （ 至少做一个 ）写实验报告时 , 可以只写需要做的实验内容 ！ 实验四 酶的特性实验一、实验目的酶就是生物催化剂 ,生物体内化学反应基本上都就是在酶的催化下进行的。通过本实验 了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、 PH 对酶活力的影响、激活剂与抑制剂对酶活 力的影响 ,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验内容本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、 PH 对酶活力的影响、激活剂与抑制 剂对酶活力的影响 4 个小实验组成。（一）酶的专一性1、实验原理本实验以唾液淀粉酶对

2、淀粉与蔗糖的作用为例,来说明酶的专一性。淀粉与蔗糖无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖, 但不能催化蔗糖的水解。 用班氏试剂检查糖的还原性。班氏试剂为碱性硫酸铜,能氧化具还原性的糖 ,生成砖红色沉淀氧化亚铜。2、材料、仪器与试剂（1）材料 :新鲜配制的唾液及其稀释液（2）仪器:恒温水浴 ;沸水浴 ;试管及试管架 ;试剂:2%蔗糖溶液;溶于0、3% NaCI的0、5%淀粉溶液；班氏试剂。3、实验操作（1） 稀释唾液的制备 唾液的获取用一次性杯取一定量的饮用水 ,漱口以清洁口腔 ,然后在嘴中含 10-20mI 饮用水 ,轻漱2min 左右时间 , 即可获得唾液的原液 , 内含唾液淀

3、粉酶。 不同稀释度唾液的制备 （用大试管 ）本实验需制备 1:1、 1:5、 1:20 、 1:50、 1:200 等五个不同浓度的稀释唾液。举例说明 :1:5 指的就是稀释了 5倍的唾液 ,制备方法为 1份原液+4份蒸馏水。1:20指的就是稀释了 20倍的唾液,制备方法为1份1:5的稀释液+3分蒸馏水。（2）唾液淀粉酶最佳稀释度的确定（严格按表1添加顺序做实验，用小试管做实验）表1唾液淀粉酶稀释度的确定AvV 口吕号1(1:1)2(1:5)3(1:20)4(1:50)5(1:200)0、5%淀粉溶液（滴）44444稀释唾液（ml）1111137 C恒温水浴中保温 5分钟班氏试剂（ml）111

4、11沸水浴23分钟实验结果（2）淀粉酶的专一性表2淀粉酶专一性实验AvV 口吕号1234560、5%淀粉溶液（滴）4一4一4一2%蔗糖溶液（滴）一4一4一4最佳稀释度唾液（ml）一一11煮沸过的最佳稀释度唾液（ml）一一一一11蒸馏水（ml）11一一一一37 C恒温水浴中保温5分钟班氏试剂（ml）111111沸水浴23分钟实验结果（二）温度对酶活力的影响1、实验原理酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下，酶的反应速度最高。淀粉与可溶性淀粉遇碘呈蓝色，糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不 呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色，在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水

5、解混合物遇碘呈现的颜色来判断。2、材料、仪器与试剂(1) 材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2) 仪器:试管及试管架；恒温水浴；冰浴;沸水浴；试剂:溶于0、3% NaCI的0、5%淀粉溶液；KI I2碘溶液;3、实验操作取4支干燥的试管，编号后按下表加入试剂：表3温度对酶活力影响实验加样顺序AvV 口吕号1230、5%淀粉溶液(ml)1、51、51、5最佳稀释度唾液(ml)11煮沸过的稀释唾液(ml)1实验结果摇匀后，将1、3号试管放入37C恒温水浴中,2号试管放入冰水中。10分钟后1、2、3 管均取出(将2号内液体分两半)，用KI 12溶液来检验1、2、3号管内淀粉被唾液淀粉酶水 解的程度。记

6、录并解释结果。将2号管剩下的一半溶液放入 37C水浴中继续保温10分钟后,再用KI 12液实验，记录实验结果。(三) PH对酶活力的影响1、实验原理酶的活力受环境 PH值的影响极为显著。不同酶的最适 PH不同。本实验观察 PH对唾液淀粉酶活性的影响。唾液淀粉酶的最适PH约为6、8。2、材料、仪器与试剂(1) 材料:新配制的 溶于0、3%NaCl的0、5%定粉溶液(2) 仪器:试管及试管架；吸管;滴管;恒温水浴试剂:PH为5、0、5、8、6、8、8、0的缓冲溶液；KI I2碘溶液;PH试纸3、实验操作表4 PH对酶活性的影响实验PH55.86.88、0缓冲液（ml）33330、5%淀粉溶液（ml

7、）1111向第一个试管加入稀释唾液后 ，置于37 C的恒温水浴；等待1min后向第二个试管加入稀释唾液，置于37C的恒温水浴；依次类推！最佳稀释度的唾液（ml）1111检查淀粉水解程度待向第四只试管加入唾液 2min后，每隔1分钟从第3管中取出1滴反 应液于白瓷板上，加碘液检查反应进行情况，直至反应液变为淡棕黄色（颜色有点淡即可）。即可从第一只试管依次添加碘液，时间间隔也为1min。碘液（滴）12121212现象为了更好的理解表格内容，下面对实验过程进行说明各取缓冲液3ml,分别注入4支带有号码的试管，随后于各个试管中添加 0、5%淀粉溶液 1ml与最佳稀释度的唾液 1ml。向各试管中加入稀释

8、唾液的时间间隔为1分钟。将各试管中物质混匀”并依次置于37 C恒温水浴中保温。待向第4管加入唾液2ml后，每隔1分钟由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小 滴KI - 12溶液。添加KI - I2溶液，检验淀粉的水解程度。待混合变为淡棕黄色（颜色有点淡即可）后,向所有试管依次添加 1-2滴KI - 12溶液。添加滴KI I2溶液的时间间隔，从第1管起， 亦均为1分钟。观察各试管中物质呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。（四）唾液淀粉酶的活化及抑制1、实验原理酶的活性受活化剂或抑制剂的影响，氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。2、材料、仪器与试剂（1）材料：0、5%淀粉溶液；最佳稀释度的唾液（2）仪器:试管及试管架；恒温水浴试剂:1% NaCI溶液;1% CuSO4溶液；KI I2碘溶液；1%Na2SO4溶液3、 实验操作（注意本实验的淀粉溶液为无NaCI的淀粉溶液）表4唾液淀粉酶活化及抑制实验AvV 口吕号12340、5%淀粉溶液（ml）1、51、51、51、5最佳稀释度唾液（ml）0、50、50、50、51% NaCI 溶液(ml)0、5一一一1% CuS04 溶液(ml)一0、5一一1% Na 2SO4 溶液(ml)一一0、5一蒸馏水（ml）一一一0、537 C恒温水浴中保温 10分钟KI