盐酸左氧氟沙星在前列腺炎大鼠体内的药代动力学研究

1、盐酸左氧氟沙星在前列腺炎大鼠体内的药代动力学研究马小林李英伦崔恒敏赵玲【摘要】目的研究细菌性前列腺炎病理模型下，盐酸左氧氟沙星(LevofloxacinHydrochloride)在大鼠体内的药代动力学特点。方式36只大鼠造成细菌性前列腺炎病理模型后,单剂量一次灌胃内服盐酸左氧氟沙星80mg/(kg-bw)；采纳高效液相色谱法测定血药浓度，血药浓度最低检测限Ug/ml,并以DAS药动学软件对所得数据进行分析。结果药物体内进程符合一级吸收二室模型(权重=1/CC),要紧动力学参数及拟合方程如下：Tl/2Ka为土min,Tl/2a为土min,T1/2B为土min,Tmax为(50±min

2、,Cmax为±mg/L,AUC(0-1440)为(2±(mgminL-l),Ka为±minT,MRT(0-1440)为(土)min,拟合方程为：C=+。结论盐酸左氧氟沙星在细菌性前列腺炎模型大鼠体内吸收迅速，血药浓度较高，散布普遍，排除较为缓慢。【关键词】盐酸左氧氟沙星细菌性前列腺炎药代动力学大鼠高效液相色谱Abstract:0bjectiveTostudythepharmacokineticsofLevofloxacinHydrochlorideinpathologicalmodelofratswithbacterialprostatitis.MethodsGi

3、vethedrugto36ratswithbacterialprostatitismodelatadosageof80mgperkilogramofbodyweightLevofloxacinHydrochlorideconcentrationsweredeterminedbyhighperformanceliquidchromatography,withalimitofdetectionofUgofLevofloxacinHydrochloridepermilliliterofLevofloxacinHydrochloridepharmacokineticdatawerecalculated

4、byusingpharmacokineticssoftware.ResultsThefateofdrugwasconsistentwithfinstorderabsorptionandtwocompartementmodels(weight=l/CC),majorkinetiaparametersofpharmacokineticsandequationwereasfollows:Tl/2ka=±min,Tl/2a=±min,Tl/23=±min,Tmax=(50±17)min,Cmax=±mg/L,AUC(01440)=±(mg*m

5、in-1LT),Ka二士(1/min),MRT(01440)=±min,C=+Hydrochlorideinpathologicalmodelofratswithbacterialprostatitsisquicklyabsorbedwithhighconcentrationinplasma,distributedwidespread,andeliminatedslowly.Keywords:LevofloxacinHydrochloride；Prostatitis；Pharmacokinetics；Rats；HPLC前列腺炎(prost软titis)是男性泌尿系统的常见病与多发病,

6、具有病因病理复杂，病症表现多样化，病程迁延，反复发作，经久难愈的特点，且有逐年增多的趋势，对男性健康有庞大的危害。由于前列腺特殊的解剖结构，目前，许多药物在前列腺的浓度都超级低，使得对人的前列腺炎的医治成效都不睬想。探讨和寻觅其有效的医治方式是目前临床研究的重点1。盐酸左氧氟沙星(LevofloxacinHydrochloride)系第3代氟喳诺酮类抗菌药物，为左旋氧氟沙星(Levofloxaein,LVFX)的盐酸盐，对革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌和非典型病原体均有良好的抗菌活性，且组织渗透性好，在体内吸收后普遍散布至各组织、体液，是目前医治前列腺炎的有效药物，临床利用较广，但其医治成效仍有待

7、于临床的进一步验证L2o目前，关于左氧氟沙星在动物体内的药代动力学方面的研究，人们仅对人3、狗4,5、鸡6、兔7、猪8和健康大鼠9,10等动物进行了研究。可是，关于左氧氟沙星在前列腺炎病理模型下动物体内的药代动力学研究国内外尚未见报导。本实验采纳细菌性前列腺炎病理模型研究，大鼠体内盐酸LVFX的药代动力学特点，旨在为左氧氟沙星在前列腺炎疾病医治的临床应用方面提供理论依据。1器材动物清洁级健康SD大鼠36只，雄性，体重(335±20)g,4月龄，四川大学实验动物中心提供。大鼠购进后常规饲养，观看2周无异样后进行实验。仪器日本岛津SHIMADZULC-2020CHT（CLASS-VP高效

8、液相色谱系统（含岛津色谱工作站软件）；JD100-3电子天平（沈阳龙腾电子）；800型离心沉淀器（上海手术器械十厂）；800B台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；SK250LH超声波清洗机（上海科导超声仪器）；XW-80A旋涡混合器（上海青浦沪西仪器厂）；D-37520osterode高速冷冻离心机（美国科峻仪器公司）；PHS-25型酸度计（成都方舟科技开发公司）。造模菌种大肠埃希氏杆菌（ATCC-25922）,由中国药品生物制品检定所提供，经本实验室增菌至XlOlOcfu/ml。药品与试剂盐酸左氧氟沙星原料药，购自浙江康裕制药，批号KY-LH-M,含量为。盐酸左氧氟沙星标准品，购自中国药品生物

9、制品检定所，编号。盐酸左氧氟沙星标准品及原粉在105c下烘干至恒重备用。甲醇、乙月青、四丁基澳化铁、磷酸二氢钾、磷酸均为色谱级；实验用水为超纯水；水合氯醛、三氯乙酸、盐酸等均为国产分析纯试剂。2方式细菌性前列腺炎模型的制作大鼠实验前禁食12h,但供给充沛饮水。参照文献11,12前列腺炎模型的制作方式，将72只大鼠以10%水合氯醛（350mg/kg）腹腔麻醉，麻醉成功后，用手术胶布将大鼠四肢固定在手术台上，剪毛，备皮，消毒，在无菌条件下于大鼠尿生殖膈上方行约cm大小纵形切口，沿腹中线切开腹壁，直达腹腔，暴露位于膀胱颈外侧的前列腺腹叶（分左右两叶），然后用镣子轻轻提出膀胱及双侧精囊，暴露附于精囊内

10、侧的前列腺背叶，再于前列腺左、右背侧叶包膜下别离注入标准大肠杆菌菌液X1010cfu/ml）各ml,%碘伏棉球轻轻按压针眼后，回纳前列腺于原位，分层缝合腹壁肌肉、皮肤，碘酊消毒创口，造模终止，放回鼠笼，自由饮食，术后5d即可形成大鼠细菌性前列腺炎模型12。分组及给药方式大鼠前列腺炎病理模型制作完成后,常规饲养，日粮不含任何抗生素。天天观看大鼠伤口愈合情形。术后第5天,将36只大鼠，按12个采样时刻点随机分为12组，每组各3只。按80mg/kg的给药剂量以灌胃方式（ig）给药。药液配制周密称取烘干的盐酸LVLX原料药（含量给以mol/L盐酸溶解后用蒸储水定容至500ml,即得8mg/mL的盐酸L

11、VLX药液（pH）o周密称取烘干的盐酸LVFX标准品30mg,先用适量mol/L的盐酸溶解，然后用流动相(甲醇一乙睛一mol/LKH2PO4-mol/L四丁基澳化铁，体积比为30：30：430：10)稀释定容至10ml,配制成3mg/ml的贮备液，再进一步稀释后制成不同浓度的标准品溶液。给药和血液采样给药前12h,大鼠禁食不由水。别离于给药前(0h)和给药后5,10,30min,1,2,4,6,8,10,12,24h大鼠心脏采血各ml于加有肝素钠的试管中,以4000r/min离心10min后，取血浆于ml塑料离心管中，-20冰箱中保留备用。血浆样品处置方式取解冻后血浆ml于ml塑料离心管中，加

12、入色谱级甲醇ml,漩涡混合60s,超声波振荡60s,再以13000r/min4离心15nlin后，取上清液过Um滤膜，上机进样10U1。色谱条件色谱柱为Diamonsil(TM)钻石C18柱(5Um,150mmXmm)。流动相为甲醇一乙厝一mol/LKH2P04L四丁基浪化镀二30：30:430：10(体积比)，mol/L的H3PO4调pH至。流速ml/min,柱温35；紫外检测波长295nm；进样量10U1。数据分析将盐酸LVFX在前列腺炎大鼠体内的血药浓度时刻数据用DAS药动学软件进行处置，依照R2最大，AIC最小的原那么选取最正确药代动力学模型，求算给药后，盐酸LVFX在大鼠体内的药代动

13、力学参数。3结果标准曲线取大鼠空白血浆各ml于ml塑料离心管中，别离加入适当浓度的盐酸LVFX标准品溶液ml,制成含药为50,10,Ug/ml的系列浓度，同照"”项下操作，别离记录峰面积。以盐酸LVFX峰面积（Y）与血浆药物浓度（X）进行线性回归，取得标准曲线方程为：Y=21875X+5,r=9o血药浓度在50ug/ml之间线性关系良好,最低检测限为Ug/ml。标准曲线见图1。样品提取方式回收率及周密度参照生物药物分析L13关于回收率及周密度的测定方式，选取高、中、低3个浓度测得方式回收率别离为%,%和%。日内及日间周密度别离为%,%和%和%,%和。结果见表1-2。表1血药浓度检测方

14、式回收率（略）表2血药浓度检测方式日内及日间周密度不同（略）标准品和样品色谱图见图24。血药浓度细菌性前列腺炎大鼠灌服盐酸LVFX（80mg/kg）的血浆药物浓度实测值和拟合值见表3o实测值的达峰时刻较拟合值短,且达峰浓度大于拟合值，在排除相二者转变趋势大体一致。药-时曲线图细菌性前列腺炎大鼠灌服盐酸LVLX（80mg/kg）后，药物体内进程符合一级吸收二室模型（权重口/CC）,其药-时曲线见图5。表3大鼠灌服盐酸LVLX(80mg/kg)后血浆中药物浓度实测值与拟合值(略)药代动力学参数细菌性前列腺炎大鼠，按80mg/kg单剂量灌服盐酸左氧氟沙星所得药时数据经药动学软件处置。其要紧药动学参数

15、见表4。表4药动学参数表(略)4讨论HPLC测定方式本实验采纳HPLC法测定细菌性前列腺炎大鼠血浆中的盐酸LVFX浓度，其检测灵敏度高，最低检测限为Pg/ml；检测方式重复性好；关于血浆样品的预处置采纳色谱级甲醇：血浆=1：1(体积比)直接沉淀，幸免了引入其他杂质的阻碍，并配合超声波振荡，提取加倍完全，和13000r/min4c超速离心，分离更完全。在本法色谱条件下,盐酸左氧氟沙星与杂质峰能够取得良好分离,而且测定一个样品一样只需要10min即可，快速方便。盐酸左氧氟沙星的药动学分析左旋氧氟沙星(Levofloxacin,LVFX)是第3代喳诺酮类药物，为氧氟沙(Ofloxacin,OFLX)

16、的光学活性L-型异构体S(-)-OFLX,对包括厌氧菌在内的革兰阳性菌和革兰阴性菌、支原体、衣原体均表现出较强的抗菌活性，其体外抗菌活性约为氧氟沙星右消旋体的8128倍14,为外消旋体OFLX的2倍15,又因其排除无抗菌活性而有副作用的右旋部份,使其副作用和不良反映大大减少16,而且左旋氧氟沙星能够在前列腺组织和前列腺液中达到足够的杀菌浓度17。因此，本研究选用盐酸左氧氟沙星作为实验药物。前列腺炎病理模型下，大鼠按80mg/kg单剂量灌服盐酸左氧氟沙星所得药时数据经DAS药动学软件处置，并选取最正确药动学模型。结果说明，盐酸左氧氟沙星在大鼠体内的药动学进程符合一级吸收二室模型(权重3/CC),

17、其药代动力学方程为：C二+,这与LVFX在人18,鸡6,犬19,猪8,兔7等动物体内的药代动力学进程相一致。前列腺炎模型下，大鼠灌胃内服盐酸LVLX后，经药时曲线分析发觉LVFX吸收迅速，其要紧药代动力学参数：Ka为土min-1；Tmax为(50±min；Cmax为±mg/L；AUC(0T440)为士(mgminLT);CL/F为(±)Lkg-1min-1；10,30,240min血浆药物浓度别离为(土)，(±),(±)mg/Lo宋坤改等9采纳微生物杯碟法测定了甲磺酸左氧氟沙星在大鼠体内散布和血清蛋白结合率，给健康大鼠按20mg/kg灌胃口服后

18、,10,30,240min血中药物浓度别离为(±),(土)，(±)mg/L；李晓天等10采纳反相高效液相色谱法测定了大鼠不同时刻(8：00,16：00,24：00)口服给予左氧氟沙星20mg/kg后，左氧氟沙星在大鼠体内的时辰药动学，其中8：00的要紧时辰药代动力学参数为Tmax为土h；Cmax为(士)mg/L；代C(力学0)为土(mghL-l)；CL/F为(±)(Lkg-1hT)。上述参数说明，前列|腺炎大鼠灌服盐酸LVLX后，在体内吸收迅速，血药浓度较高，达峰时刻短，吸收迅速；较正常健康大鼠，具有药物吸收更快、达峰更快、血药浓度更高、有效血药浓度维持时刻更长的

19、药动学特点。另据报导，狗按8mg/kg灌服甲磺酸左氧氟沙星后，Ka为h-l,Tmax为h,Cmax为mg/L,AUC为(mgminL_l)4；兔以左氧氟沙星滴眼液点眼后，Ka为min-1,Tmax为30min,Cmax为mg/L7；猪按20mg/kg口服左氧氟沙星后，Ka为土hT,Tmax为土h,Cmax为土mg/L,AUC为土(mghL-1为。鸡按lOmg/kg内服LVLX后的Ka为土卜1,Tmax为±h,Cmax为±mg/L,AUC为±/(mg*h*L-1)6。可见，前列腺炎模型下，大鼠内服盐酸LVLX后，吸收较兔、狗、猪、鸡都慢，血药峰浓度比兔、鸡、狗、猪都

20、高，达峰时刻较兔为慢，但比鸡、狗、猪都快。在前列腺病理情形下，盐酸LVFX在大鼠体内散布较快,Tl/2a为(土)min；T1/2B为(土)min；V1/F为土L/kg,狗4那么为L/kg,鸡6为±L/kg°犬5Tl/2a(±)h,鸡6Tl/2a(±)h,健康大鼠10Tl/2(±)ho由此说明，盐酸LVFX在前列腺炎大鼠体内吸收较好，组织穿透性强，排除较慢，有效血药浓度维持时刻较长，散布普遍。结论上述研究说明，LVLX在不同的种属动物体内，和健康和病理状况下的药动学特点不一样，在前列腺炎病理模型下，大鼠灌服盐酸左氧氟沙星，较正常健康大鼠和其他个别

21、种属动物表现出吸收更快，排除半衰期更长，血药浓度更高，有效血药浓度维持时刻更长的药代动力学特点。【参考文献】1郭应禄，李宏军.前列腺炎川.北京：人民军医出版社，2002：80,493.2杨辉,杨樟卫.前列腺炎用抗菌药物的合理选用J.药学实践杂志,2004,22(3):152.3BabaS,MigamotoN,Yanai0,etonpenetrationoflevofloxacinintotheotorhinonolaryngealtissuesanddischargesinpatientsJ.Chemotherapy,1992,40(3):326.4任乔林，林赴田，孙涛，等.甲磺酸左氧氟沙星的药代动力学研究力1.中国抗生素杂志,1999,24(3):205.5姜希凌,孙建国,王广基,等.反相高效液相色谱法测定犬血浆中左氧氟沙星浓度及犬体内药代动力学J.中国临床药理学与医治学，2004,9(6):669.6蒋智钢,李英伦.左氧氟沙星在健康鸡体内的药动学研究J.四川农业大学学报,2005,23(1):99.7蔡鸿生，罗顺德，刘强，等.乳酸左氧氟沙星滴眼液在兔眼中的药动学J.中国医院