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文档简介
1、专题 3 胚胎工程知识点必背胚胎工程 是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后代, 以满足人类的各种需求。 其过程实质是人工对体内受精和早期胚胎发育的模拟操作。一、体内受精和早期胚胎发育1、精子和卵子的发生及受精作用(1) 受精作用概念:精子和卵子结合成合子(受精卵)的过程。受精场所:输卵管(2) 准备阶段:包括精子获能及卵子达到减数第二次分裂中期。(3) 受精阶段:包括精子穿越放射冠和透明带,进入卵黄膜,雌、雄原核形成及结合。(4) 受精过程中卵子防止多精入卵
2、的机制:透明带反应;卵黄膜封闭作用。(5) 受精的标志:在透明带与卵黄膜的间隙可以观察到两个极体受精完成的标志:雌、雄原核的融合。2、早期胚胎发育(1) 过程:受精卵卵裂期桑椹胚囊胚原肠胚组织器官分化幼体。早期胚胎发育(2) 场所:输卵管子宫(3) 图示桑葚胚细胞还未分化,都具全能性囊胚开始出现分化形成内细胞团和滋养层,内细胞团细胞可发育成胎儿的各种组织,具有全能性,提取内细胞团细胞培养可得到胚胎干细胞,该阶段还可进行胚胎分割。对囊胚进行分割时,要注意将内细胞团均等分割。二、体外受精和早期胚胎培养试管动物技术:通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植
3、产生后代的技术。方法一:用促性腺激素处理,使其超数排卵 ,从输卵管冲取精子(针对卵母细胞的采集实验动物,家畜猪、羊等)方法二:从屠宰母畜卵巢中采集方法三:借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工具直接从活体母畜卵巢中吸取(针对大家畜或大型动物,如牛)体外受精卵母细胞的培养: 在体外人工培养成熟精子的采集:方法有假阴道法、手握法和电刺激法等精子的获能 :方法有培养法(通过获能培养液)、化学诱导法(通过肝素或钙离子载体A23187)获能溶液或专用的受精溶液受精: 获能 的精子 培养成熟 的卵子完成受精胚胎早期培养条件:受精卵在 发育培养液 中培养培养液成分:无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸
4、、血清等1、试管动物生产流程(注意与克隆动物区别)2、克隆动物的培育流程三、胚胎工程的应用及前景1、胚胎移植( 1)概念:是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体叫供体,接受胚胎的个体叫受体。( 2)地位:胚胎移植是转基因、核移植、或体外受精等技术的最后一道“工序”( 3)意义:加速育种工作和品种改良大量节省购买种畜的费用;一胎多产;保存品种资源和濒危物种; 可充分发挥雌性优良个体繁殖潜力。 供体主要职能只是产生优良特性的胚胎,缩短繁殖周期;受体的主要任务是妊娠和育仔。( 4)
5、生理学基础(见知识网络)( 5)基本程序:早期胚胎培养特别提醒胚胎分割无性繁殖( 1)。( 2)( 3)冲卵含义 : 冲出早期胚胎, 不是冲出卵子2、胚胎分割(动物无性繁殖或克隆)( 1)概念:用机械方法将早期胚胎切割成2、4 或 8 等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。( 2)仪器设备:实体显微镜和显微操作仪( 3)分割时期 :桑椹胚 或囊胚( 4)注意事项:对 囊胚阶段 的胚胎进行分割时,要将 内细胞团均等分割 。分割针分割滋养层 ,做胚胎 DNA分析性别鉴定 。胚胎分割的份数越多,操作的难度会越大,移植的成功率也越低。( 5)意义及局限:此法可由一个胚胎获得多个后代个体,大大提高胚胎
6、的利用率刚出生的动物体重偏低,毛色和斑纹上存在差异,同卵多胎的可能性有限。3、胚胎干细胞( 1)概念:由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。简称ES或 EK细胞。( 2)形态上:体积小、细胞核大、核仁明显( 3)功能上:具有 发育的全能性 ,即可分化为成年动物体任何一种组织细胞;在体外可 增殖而不发生分化;可 冷冻保存 ;可进行遗传改造。( 4)来源: 从哺乳动物的早期胚胎 ( 囊胚的内细胞团 ) 或从胎儿的原始性腺中分离而来( 5)应用: 治疗人类的某些顽疾。 移植 ES细胞修复坏死或退化部位, 治疗人类由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病,如帕金森综合症、老年痴呆症等,目前尚未攻克。
7、 培育出人造组织器官,用于器官移植。ES细胞体外定向诱导分化出各种组织器官。 研究体外细胞分化的理想材料。ES 细胞在牛黄酸、 丁酰环腺苷酸等诱导因子作用下可向不同类型组织细胞分化。专题 4 生物技术的安全性和伦理问题(一)转基因生物的安全性争论:转基因生物存在安全性的原因(1) 对基因的结构,基因间的相互作用及基因的调控机制了解相当有限;(2) 转移的基因虽然是功能一致的基因,但不少是异种生物的基因;(3) 外源基因插入宿主基因组的部分往往是随机的。(1) 基因生物与食物安全:反方观点:反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变正方观点:有安全性评价、科学家负责的态度、无
8、实例无证据(2) 转基因生物与生物安全: 对生物多样性的影响反方观点:扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”正方观点:生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限(3) 转基因生物与环境安全:对生态系统稳定性的影响反方观点:打破物种界限、二次污染、重组出有害病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体正方观点:不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境(二)生物技术的伦理问题(1) 克隆人:两种不同观点,多数人持否定态度。否定理由:克隆人严重违反了人类伦理道德,是克隆技术的滥用;克隆人冲击了现有的婚姻
9、、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念;克隆人是在人为的制造在心理上和社会地位上都不健全的人。肯定理由:技术性问题可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法解决。不成熟的技术也只有通过实践才能使之成熟。中国政府的态度:禁止生殖性克隆,不反对治疗性克隆。四不原则:不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。(2) 设计试管婴儿:与试管婴儿的区别。两种不同观点,多数人持认可态度。否定理由:把试管婴儿当作人体零配件工厂,是对生命的不尊重;早期生命也有活下去的权利,抛弃或杀死多余胚胎,无异于“谋杀”。肯定理由:解决不育问题,提供骨髓中造血干细胞救治患者最好、最快捷的方法,提供骨髓造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤。设计试管婴儿试管婴儿技术手段 多了胚胎移植前进行遗传诊断 这一环节 不需进行遗传诊断实践应用 用于白血病、贫血病等疾病的治疗解决不孕不育二者都是体外受精, 体外早期胚胎发育, 再进行胚胎移植, 从生殖方式上应为有性生殖(3) 基因身份证:否定理由:个人基因资讯的泄漏造成基因歧视,势必造成遗传学失业大军、造成个人婚姻困难、人际关系疏远等严重后果。肯定理由:通过基因检测可以及早采取预防措施,适时进行治疗,达到挽救患者生命的目的。(三)生物武器(1) 种类:致病菌、病毒、生化毒剂,以及经过基因重组的致病菌。(2) 散布方式:吸入
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