医学检验本科班分子生物学检验技术试卷

1、WORD格式医学检验本班"分子生物学检验技术"试卷一. 选择题在备选答案中选择一个最正确答案,每题 2分,共20分:1. 在核酸提取时 , 常需要使用氯化钠, 醋酸钠等盐溶液 , 真正的目的是A. 中和核酸的负离子, 使其易于沉淀B.调节 PH值C. 保持核算的完整性D.提高核酸的浓度E. 无特定目的2. 在一个 DNA分子中 , 如 G所占摩尔比为 17.2%, 那么 A 所占摩尔比为A. 82.8% B. 32.8%C. 17.2%D. 65.6%E.无法计算3. 以下那项不是扩增反响所必需的"A. 引物和模板 B. dNTP C. Mg+D .DNase E

2、.缓冲液4. 以下那项是分子生物学技术形成的理论根底"A. 基因构造与功能的关系B.基因构造变异与疾病的关系C. 病原微生物的基因构造特征D.基因的表达 . 调控与疾病的关系E. 以上皆是5. 分子生物学检验技术主要包括那些技术"A. 核酸分子杂交技术B. DNA测序技术C. PCR 技术D. DNA重组技术E. 以上全是6. 以下哪项检测需应用分子生物学检验技术"A. 肝功能检测B.乙肝两对半检测C. 乙肝病毒 DNA(HBV-DNA)检测D.肿瘤细胞培养E. 病原微生物培养7.在核酸的别离纯化过程中, 为保证其一级构造的完整性, 应采取A. 尽量简化别离步骤,

3、 缩短提取时间B.适当延长提取时间C. 在 37 摄氏度条件下进展D.参加Mg+,Ca+等二价金属离子E. 以上全是专业资料整理WORD格式8.有一核酸样品, 测得A260/A280=2.0,请问该样品属于哪类核酸样品"专业资料整理WORD格式A. DNAB. RNA专业资料整理WORD格式C. 是 DNA,但有蛋白质污染D.是 RNA,但有蛋白质污染E. DNA 和 RNA9.在 RNA提取和纯化过程中, 为防止 Rnase 污染而导致 RNA的降解 , 应采取A.在干净的实验室里操作B.带手套和口罩C.所用器材高压消毒或 DEPC处理D.冰浴下操作E.以上皆是10.随机引物标记法

4、全程标记DNA时, 需选用以下哪种酶 "A. DNA 多聚酶 I 的 Kelnow 片段B. TaqDNA聚合酶C. 限制性内切酶D. DNA连接酶E.末端转移酶二. 判断题： ( 你认为以下表达正确的请在题后括号内打, 错误的打×， 每题 2 分, 共 6 分)1. 双脱氧核酸链终止法是最常用的DNA测序技术2. TapDNA 聚合酶的作用是催化 DNA合成，但由于缺乏 3 5外切酶活性，无校正功能，所以在复制合成新链过程中可能会发生碱基错配，导致PCR产物的错误3.采用加热煮沸法可使RNase完全失活三：填空题 ( 每空格 2分, 共 24 分):1.在选择核酸的别离纯

5、化方法，应遵循的总原那么是：一是保证核酸一级构造的完整性；二是尽可能 排除其他分子的污染，保证核酸样品的纯度。2.在 PCR反响中， Mg+是个至关重要的因素， 浓度过低会降低酶的活性， 浓度过高又会导致非特异性扩增。3. 用于核酸杂交的普通硝酸纤维素膜最大的优点是本底低 ，因而最容易检测杂交信号，缺点是脆性大易破裂，且队bp 的核酸结合力低。4整个核酸杂交反响主要由预杂交 、杂交 和 洗脱三个步骤组成。5.转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的核酸，其与滤膜的结合是松散的，需做进一步的固定，常用的固定方法是烘烤 、紫外线固定 和 碱固定 。三. 名词解释： ( 每题 4 分, 共 20 分):1.

6、融点曲线分析技术： 是根据野生型序列和突变序列因不同 Tm而产生不同的融点曲线而设计的。专业资料整理WORD格式2.探针 : 指所有能与特定的靶分子发生特异性的相互作用，并可以被检测的分子。专业资料整理WORD格式3. Tm值：DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋构造降解一半时的温度。专业资料整理WORD格式4. 转染 : 将外源 DNA直接导入真核生物细胞的过程称为转染。5. 转化 : 将重组的 DNA分子导入细菌，使其在细菌体内扩增及表达的过程称为转化。四. 问答题 : 每题 10 分，共 30 分1. 简述限制性内切酶的定义、命名原那么和分类。答：定义：限制性内切酶是能识别和水解双链DNA

7、分子内特异序列的核酸水解酶类。命名：通常由3 个斜体字母表示，第1 个大写字母为来源微生物的属名第1 个字母，第2、第 3 个小写子母取微生物种名的头两个字母。分类： 根据酶分子组成及裂解方式的不同，将限制性内切酶分3 类，类和类限制性内切酶在同一酶分子中兼有修饰甲基化 作用和依赖于ATP的限制水解活性，类限制性内切酶能识别并水解特异性的核苷酸序列是DNA重组技术中最重要的工具。2. PCR 引物的设计应遵循哪些原那么。答：1. 用于 PCR反响的引物需要两条，分别设在被扩增目的的片段的两端，并分别与模版正负链序列互补。2. 引物的长度一般以 18-25 个核苷酸为宜， 引物过长容易产生寡核苷

8、酸的链内互补， 形成发夹状构造，影响引物和模板之间的互补。3. 两条引物之间尤其在 3端的序列不能有互补，以免形成引物二聚体。4. 引物的碱基组成应平衡，防止出现嘌呤、嘧啶碱基堆积。5.PCR 扩增中的退火温度是根据引物的Tm值而决定的，两条引物的Tm值不能差太大。6. 根据需要，可在合成引物时于其5端加修饰成分。3. 试述实时荧光 PCR水解探针法的实验原理？答：原理： PCR反响体系中除有两条引物外还需要一条荧光素标记的探针。探针的5端和3端分别标记荧光报告基团R 和荧光淬灭基团Q，当探针完整时R 基团与 Q基团分别位于探针的两端， Q基团抑制R 基团使其不能发射荧光。PCR过程中， TaqDNA聚合酶沿