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文档简介

1、生药学实验讲义黑河医学高等专科学校实验室守则实验一实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九 实验十实验十一 实验十二 实验十三 实验十四 实验十五 实验十六 实验十七 实验十八 实验十九实验二十实验二十一 实验二十二 实验二十三 实验二十四 附录一 附录二 附录三 附录五 附录六生药中常见的化学成分的理化鉴定4生药中常见的化学成分的理化鉴定(二)5根类生药6根茎类生药7皮类生药8茎木类生药9植物细胞基本结构10植物的组织11根的组织构造12双子叶植物茎的初生构造和次生构造单子叶植物、裸子植物茎的构造13叶的构造14花的组织构造15果实的内部组织构造16种子的内部组织构造1

2、7菌类、裸子植物的性状显微鉴定18双子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定19单子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定20皮类生药的显微及显微理化鉴定21花类生药的显微及显微理化鉴定22果实种子类生药的显微及显微理化鉴定23全草及其他类类生药的显微及显微理化鉴定24动物类和矿物类生药的性状鉴别25户外见习26附院药房见习27常用试剂配置法28层离法常用显色剂29显微镜测量法30显微镜的构造与使用31生物绘图32实验室守则一、实验注意事项:1 .根据教学进程,温习与本次实验有关的课堂讲授内容。2 .仔细阅读本次实验的内容,要求弄懂实验的原理与方法。3 .准备好各种自备的实验用品,如铅笔、

3、橡皮、直尺、报告纸等。二、实验过程中的几点要求:1 .遵守实验室规则,保持实验室安静。2 .实验认真,观察仔细,观察应当与思考结合起来,应当手、眼、脑三者并用。3 .由于实验时间有限,实验时应当善于安排自己的工作,注意力应当集中在主要问题上,不要 用过多时间去钻研细小的次要问题,一时解决不了的次要问题,可留课外时间去解决o4 .在实验过程中,应当随时注意观察到的现象,测量或称量的数据,计算结果等写在报告纸上,成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好习惯。5 .实验进行过程中,必须注意听取教师的指导。6 .实验桌前应随时保持整洁,非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。7 .纸屑、废

4、物应放人污物缸内,不得乱丢地上,污物缸内不得倒入液体。、实验完毕时的几点要求:1 .按照教师指定时间完成实验报告。2 .把实验用仪器、用品等收拾干净,放在指定位置。发放给个人保管的可放抽屉或柜内3 .临时借用物品应及时归还。4 .值日生负责最后清扫实验室卫生,并及时清除污物缸内的废克物。5 .实验结束后,检查门、窗、水、电,保证无安全隐患后方可离开实验室。实验一生药中常见化学成分的理化鉴定(一)一、实验目的要求:1 . 了解化学检出法在药材鉴定中的应用。2 .熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。3 .掌握生物碱,羟基葱酿的理化性质和定性检识反应。 二、实验主要材料、仪器及试剂:马钱子、黄柏(苦参

5、)黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升华装置。碘化锌钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试液、浓硝酸、浓硫酸、5% NaOH、HCl、乙触、氨水。三、实验内容:1 .显微化学反应法:(1)将药材的切片或粉未置载玻片上,滴加适当试液,加盖玻片在显微镜下观察产生的颜色或结 晶东作为鉴别特征。取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片,加1%硫矶酸试剂l滴,镜检,观察结果。另取一切片,加浓硝酸1滴,镜检,观察结果。(2)取药材粗粉加适当试剂浸出,将浸出液滴于载玻片上,滴加适当试剂,加盖 玻片,镜检观察反应结果。取黄连乙醇液1滴,加浓HN0 3 1滴,镜检,观察结果。(3)取药

6、材的切片或粉末滴加适当试剂,直接观察里现的种种颜色作为鉴别特征。取大黄饮片,加 5% NaOH 12滴,出现什么颜色 ?再加稀HC1 12滴,又出现什么颜色 ?2 ,微量升华法:是利用药材中所含的某些成分,在一定温度下能升华的性质,获得升华物,在显微 镜下观察其形状,颜色及化学反应,作为鉴别特征。具体方法:取金属片,安放在有圆孔(直径约2cm)的石桶板上,金属片上抽一力、金属囱(高度约0.8cm),对准石棉板上的圆孔,徐加热(火焰距板约4cm)数分钟,至粉末尸始变焦,并有气化物发生,去火待冷,则有结晶状升圈内加药材粉末一薄层,圈上放一载玻片,在石棉板下圆孔处用酒精灯徐行如上操作,观察反应籍果。

7、末或提取液等,在荧光灯下观察荧光,有些药材不产生荧光,如如取黄连饮片、呼4.层析法:贝母粉末或秦皮水浸液,在紫外灯下观察荧叫颜色。分为纸层析、柱层析、薄层层析等(略)。5WHHHKW进行鉴别。沉淀反应来(1)生物碱的检M :沉淀反应 取黄连,马钱子,黄柏 锥形瓶中,含加木(苦参)粉未各2g,分别盛入1 5ml ,浓HC1 O . 5ml,60 c水浴上温冲 各取2ml滤液于卜管中,分别加下列试液 碘化锌钾试液30分钟,时时振摇,取滤液备用。2 3滴,观察有何现象?碘化汞钾试液碘一碘化钾试液黄连马钱子黄柏(苦参)(2)羟基功配的检 加入煮沸,取滤液加加入等量氨试液,振有,观察反应现象。四、作业:

8、简要记录各反应白|实验步骤和结果。五、思考题:1 .显微化学反应法有几种操作方法2 ,微量升华法用卜生药鉴别有何特点3 .含何类成分的上药常会产生荧光4 .生物碱常甩的卜淀试剂有哪些什么?Bomtrager反应取大黄粉未5%NaOH 试液4m1 ,在小火上hCi呈酸性后,再加乙触0.2g ,置试管中5ml ,振摇,分取触层,于触层中?Borntr ?ger反应过程的原理是实验二 生药中常见化学成分的理化鉴定(二)工实验目的要求:掌握香豆精类,强心昔类、皂甘类、糅质类、甄甘类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。:、实验主要材料、仪器及试剂:秦皮、桔梗、穿“龙、五倍子、儿茶、M杏仁、洋地黄叶、黄苓

9、水浴锅蒸发皿立形瓶(槐米盐酸羟胺甲醇液、 酸、1 %盐酸奎宁试液、明,l %三氯化铁乙醇液、10%氢氧化钾甲醇液、乙触、氯仿、盐2 %红血球悬浮液、狡液、铁镂矶试液、三氧化铁试液、冰醋酸、浓硫酸、镁粉。华物附着于覆盖的载片上,将载玻片取下反转,在显微镜下观察站晶形状,并可加化学试液,观察其变化取大黄粉未,进3 .荧光分析法:将药材切片或粉以酸碱处理或其他化学方法处理后,可使其中莫些成分在荧光灯下产生荧光,以便鉴别、实验内容:1 .化学定性检查(1)香豆精类的检出:异羟肪酸铁反应 取秦皮粗粉0.2g ,置具塞试管中,加乙触3ml,浸渍510分钟,时加振摇,放置,吸取上清液(或滤过)于试管中加新配

10、制的盐酸羟胺甲醇溶液23滴,l 0%氢氧化钾甲醇溶液23滴,水浴温热12分钟,冷后加l 0%盐酸,使pH为34 ,再加1%三氯化铁乙醇溶液12滴,两液混合面或溶液应显什么颜色?5(2)强心昔的检出:三氯化铁一冰醛限反应取洋地黄叶粉末0.5g ,力口水5ml ,水浴加热20分钟,滤液加 摇萃取后,再加乙触3mlCHCl 3,振3ml ,待分层,用吸管吸取取下层,将CHCl 3层转于蒸发皿中蒸干,放冷,加冰醛酸lml使残渣溶解,移人试管中,加三氯化铁溶皱 1滴,并沿管壁缓缓注入浓 H 2S04 l520滴,观察上层液及界面的颜色变化(3)皂昔的检出:泡沫反应取正 注意是否产生大量持夕溶血试验取:置

11、试管中,各加 悬浮液0.3ml ,摇匀(4)糅质的检出显色及沉淀反应 加用。I自梗粉末0.2g ,加水 .性泡沫。5ml ,加热煮沸,过滤,滤液在试管中强烈振摇,亲山龙的l%生理盐水押液2%红血球放置,注意观察哪支|式管溶液变清而透明。取五倍子,儿茶粉末各25ml水,水浴加热,过滤备各取滤液 2ml ,1%盐酸奎宁试液lml和l %生理盐水(示溶血现象)lml ,分别0.5g ,分别置于锥形瓶中,别加下列试剂,观察反应现象。明胶液铁镂矶试液、五倍子 儿茶(5)甄甘类的检 出:苦味酸钠反应取苦杏仁一粒捣碎, 用水湿润置试管中, 中悬挂用味酸试纸一条,用软木塞塞 紧,置(6)黄酮昔的检 出:40

12、50 水浴中,观察试纸颜色变 化。NaHC0 3饱和溶液湿润 的苦取黄苓(槐米)粉末细0.2g ,加乙醇5ml ,水浴 酸镁粉反应温热约5加镁粉少量,混匀,沛加盐酸数滴,注意有气泡产生,同时观察呈现什九钟,滤过,取滤 2ml液,么颜色。|四、作业:简要记录各反应曲实验步骤和结果。五、思考题:1、香豆精甘,强2、黄酮类成分遇 显红色心甘,甄甘,黄酮普及糅质的反应机理是什么? 盐酸一镁粉是否都?如不显红色是否可以否定黄酮成分的存在?实率三 根类生药Rabix Astragali 、甘草 Radix 黄黄 Clycyrrbizae实验目的:l、掌握黄黄、甘苴生药性状。2、掌握黄黄、甘草粉末显微特征。

13、:、实验主要仪器及记剂:显微镜、临时装片用具、蒸储水、水合氯醛溶液、白瓷板、蒸发皿、蒸储水、80 %硫酸。、实验材料:蒙古黄黄 Astmgalis membranaceus Bg clycyrrbiza uralensisc . Var . mongholieus(Bgc . )Hsiao 粉末、方草Fisch.粉末。四、实验内容及步骤:1、镜检黄黄粉末,分别以蒸储水和水合氯醛试液装片,注意以下特征:纤维众多,成束,细长,直径936 um,壁厚,非木化,孔沟不明显。另取黄黄生 药,刮取少量纤维(粉末),透化后装片,注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。与管 主为具缘纹孔与管,纹孔呈椭圆形,类方类或斜方

14、形。7木栓细胞表面观呈多角形或类方形。淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形,直径313um,复粒由 24分粒组成。2、镜检甘草粉末 分别以蒸储水和水合氯醛试液装片,注意以下特征:纤维 众多,成束或散离,细长,直径 614 u m,壁厚,木化或非木化,孔沟不明显; 晶鞘纤维易察见,草酸钙方晶类双锥形,长方形或类方形,含晶细胞的壁增厚,微木化或非木 化。与管 主为具缘纹孔与管,多破碎,纹孔椭圆形或略呈斜方形,对列或互列,有的导管旁可见小型具缘纹孔管胞。木栓细胞棕红色,壁薄,微木化,表面观呈多角形。淀粉粒众多,单粒椭圆形、卵形或类球形,直径316 um,脐点点状或短缝状。复粒稀少,由2分粒组成。止匕外,

15、尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。五、作业:1、绘黄黄粉末特征图,示纤维,与管,木栓细胞与淀粉粒。2、绘甘草粉末显微特征图,示晶纤维,具缘纹孔与管,木栓细胞和淀粉粒。 六、思考题:1、甘草的组织构造中,有哪些较显著的鉴别特征?2、什么是晶鞘纤维?3、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄黄粉末?实验四根茎类生药黄连、大黄一、实验目的:1、掌握黄连、大黄的生药性状特征。2、掌握黄连大黄的粉末显微待征。3、了解其它根及根茎类中药的性状特征二、实验主要仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸储水、水合氯醛试液。三、实验材料:黄连 Coptis chinensis Franch .原植物标本、生药(味连)组织切片及

16、粉末。四、实验内容及步骤:1、取黄连粉末分别以蒸储水及水合氯醛试液装片,镜检下列特征:石细胞鲜黄色、类圆形、类方形或类多角形,有时稍延长,长径 25 75 u m,孔沟及纹孔I韧皮纤维鲜黄色,纺锤形或长梭形,直径: 2040 u m,壁较厚,纹孔少。木纤维众多,常成束,鲜黄色,直径 l 535 u m,壁具裂隙状纹孔。导管多为孔纹与管,也有具缘纹孔,网纹及螺纹与管。鳞叶表皮细胞类方形或长方形,壁薄曩垂厨壁微波状。淀粉粒单粒长圆形、肾形或类球形,直径110 um,复粒少,由 24分粒组成。2、取大黄粉末分别以蒸储水及水合氯醛试液装片,镜检下列特征:草酸钙簇晶大而多,棱角大多短钝。, O与管主为网

17、纹与管,并有具缘纹孔及细小螺纹与管,直径约至140 u m,非木化。淀粉粒单粒呈圆球形或长圆形,脐点大多呈星状,复粒由27个分粒组成。3、观察所示标本的性状特征。五、作业:1、绘黄连粉末显微特征图,示石细胞、韧皮纤维、木纤维、与管、鳞叶表皮细胞及淀粉粒。2、绘大黄粉末显微特征图,示草酸钙簇晶、与管、淀粉粒。六、思考题:1、如何从性状与组织上鉴别“味连”、“雅连”和“云连”实验五皮类生药 肉桂、黄柏 一、实验目的:1、掌握肉桂、黄柏的生药性状与组织鉴别特征。2、掌握皮类生药的鉴别特征。二、实验主要仪器及试剂:显微镜、临时装片用具、蒸储水、水合氯醛试液、稀甘油,间苯三酚溶液、浓 HCl、小试管、1

18、0 %盐酸苯肌试液 三、实验材料:肉桂、黄柏粉末。四、实验内容及步骤:1、取肉桂粉末分别用蒸储水及水合氯醛试液装片后进行镜检,注意下列显微特征:纤维大多单个散在,长梭形,壁极厚,木化,纹孔及纹孔沟不明显。石细胞较多,类方形或类圆形,壁厚,有的一面菲薄。油细胞类圆形或长圆形,有时尚含黄色挥发油滴。草酸钙针晶众多,细小,散在或成束,常存在于射线细胞中。木栓细胞多角形,壁木化,内含红棕色物。淀粉粒单粒或24分粒组成的复粒。2、理化鉴定(1)取肉粉末约0.1 g置小试管中,加氯仿l2ml浸数分钟。吸取氯仿浸出液2滴置载玻片上, 再加10%盐酸苯肌试液l滴,加盖玻片后镜检,可见桂皮醛苯肌杆状结晶o(2)

19、取肉桂粉末少许,进行微量升华,于升华物上加10%盐酸苯肌液l滴,加盖玻片镜检,可见桂皮醛苯肌杆状结晶。3、取黄柏粉未分别用蒸储水及水合氯醛试液装片进行镜检,注意下列显微特征:纤维及晶鞘纤维较多,鲜黄色,直径18 32 u m,多成束存在o石细胞鲜黄色,成群或单个散在,类圆形者直径40128 u m,分枝状石细胞较多,长可至240 u m,壁厚,层纹细密,孔沟不明显或较短。草酸钙方晶较多,直径824m。粘液细胞多见,直径可至80 u m。淀粉粒细小,多单粒球形,直径 28叩。五、作业:l、绘肉桂粉末特征图、示木栓细胞、纤维、石细胞及草酸钙针晶。2、绘黄柏粉末特征图,示纤维及晶鞘纤维,石细胞,粘液

20、细胞等。 六、思考题:1、如何从性状及组织上鉴别JI黄柏与关黄柏?2、黄柏的石细胞有何特征?3、肉桂横切组织有何特征?实验六 叶类、花类、果实、菌类生药 大青叶、金银花、小茴香、茯苓一、实验目的:l、掌握大青叶、金银花、小茴香、茯苓的生药性状及粉末显微特征。2、熟悉其它叶类、花类生药的显微特征。二、实验主要仪器及试剂:显微镜,临时装片用具,水合氯醛试液,甘油醛酸液,5% KOH溶液。三、实验材料:大青叶、金银花、小茴香生药、茯苓。四、实验内容入步骤:1、取大青叶粉末少量,水合氯醛试液透化装片,镜检下列特征:。靛篮结晶蓝色,存在于叶肉细胞和表皮细胞中,呈细小颗粒状或片状,常聚集成堆。上表皮细胞垂周壁近平直,下表皮细胞垂周壁稍弯曲,略呈连珠状增厚。气孔多存在于下表皮,不等式,副卫细胞 3 4个。2、取金银花粉末,以水合氯醛装片后镜检,可见以下特征:(1) 腺毛多见,有两种:一种头部倒圆锥形, 顶部平坦,约1030个细胞,排成24层,柄25个细胞;另一种头部类圆形或扁圆形,约620个细胞,柄 24个细胞。(2) 非腺毛有两种:一种为厚壁性,多为单细胞,表面有微细疣状突起,有的具角质螺纹;另一种为薄壁性,单细胞,甚长,弯曲或皱缩。(3要粉g类球形,表面有细密短刺及颗粒状雕三孔(4 )草酸钙簇晶多见,常存在于萼筒组织中。3、小茴香的鉴别(1)性状鉴定注意其为完整双

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