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文档简介
1、标题饮用水(自来水)质量标准及检验规程编号STP-QQ-701版本页数共19页起草人签名审核人签名批准人签名日期日期日期起草部门颁发部门生效日期年月日送达部门份数目的:明确生活饮用水质量标准,规范生活饮用水检验方法。适用范围:生活饮用水的检验。责任者:化验员。1.标准依据:GB5749-85 GB5750-852.质量标准:项目标准感光性状和一般化学指标:色*色度不超过15度,并不得呈现其它异色。浑浊度*不超过3度特殊情况不超过5度臭和味*不得有臭味、异味肉眼可见物*不得含有PH*总硬度(以碳酸钙计)*450mg/L氯化物*250mg/L细菌学指标:细菌总数*100个/ml总大肠菌群*3个/L
2、游离余氯*在与水接触30分后应不低于0.3mg/L,集中式给水,除出厂水应符合上要求外,管网末稍水应不低于0.05mg/L3.检验规程:3.1色:铂钴标准比色法: 用氯铂酸钾和氯化钴溶液配成标准色列,与水样进行比较,规定相当于1毫克铂在1升水中所具有的颜色称为1度,作为色度单位。3.1.1仪器:50ml具塞比色管3.1.2试剂:铂钴标准溶液称取1.246克化学纯氯铂酸钾(K2PtCL6)及1.000克化学纯氯化钴(C0C12·6H2O),溶于100ml蒸馏水中;加入100ml浓盐酸,然后用蒸馏稀释至1000ml。此标准溶液的色度为500度。3.1.3步骤:3.1.3.1取50ml透明
3、的水样于比色管中,如水样色度过高,可少取水样,加纯水稀释后比色,将结果乘以稀释倍数。3.1.3.2如水样浑浊,可将水样放置澄清或用离心法沉淀,取上清水样进行比色。3.1.3.3另取50ml具塞比色管11支,分别加和铂一钴标准溶液0,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50,3.00,3.50,4.00,4.50及5.00ml,加纯水至刻度,摇匀,即配成色度为0,5,10,15,20,25,30,35,40,45及50度的标准色列,可长期使用。3.1.3.4将水样与铂钴标准色列比较,如水样与标准色列的色调不一致,即为异色,可用文字描述。3.1.3.5计算: M C=×500 V
4、式中:C-水样的色度 M-相当于铂一钴标准溶液用量,ml V-水样体积,ml3.2浑浊度:是反映天然水饮用水的物理性状的一项指标。天然水的浑浊度是由于水中含有泥沙、粘土、有机物、微生物等微粒悬浮物所致。 分光光度法-甲 聚合物标准。本法适用于测定生活饮用水及其水源水的浑浊度,最低检测限3度。3.2.1原理:在适当温度下,硫酸肼与六次甲基四胺聚合成为一种白色的高分子聚合物,可用来作为浑浊度标准。在680nm波长下,天然水中可能存在的淡黄色和淡绿色对测定无干扰。3.2.2仪器:50ml比色管、分光光度计、比色皿。3.2.3试剂:1%硫酸肼溶液:称取1.0000g硫酸肼(NH2)2SO4·
5、H2SO4。溶于纯水中,并定容至100ml。10%六次甲基四胺溶液:称取10.00g六次甲基四胺(CH2)6N4,溶于纯水中,并定容至100ml甲聚合物标准液:将5.0ml10%硫酸肼溶液与5.0ml10%六次甲基四胺溶液在100ml容量瓶中混匀,于25±3反应24h,冷后加纯水至刻度,成400度的浑浊度标准贮备液,备用。3.2.4步骤:3.2.4.1取浑浊度400度的标准贮备液(3.3)0,0.5,1.25,2.50,5.00,10.00,12.50ml,置50ml比色管中,加纯水至刻度,摇匀后即得浑浊度为0、4、10、20、40、80、100的标准液,于680nm波长处,用3cm
6、比色皿,以纯水为参比,测定吸光度,绘制标准曲线。3.2.4.2将水样摇匀,按(4.1)所术条件测定吸光度。当水样的浑浊度超过100度时,可用纯水稀释后测定。3.2.5计算:水样的浑浊度可于标准曲线上查得,乘以稀释倍数。3.3臭和味:3.3.1原水样的臭和味取100ml水样,置于250ml三角瓶中,振摇后从瓶口嗅水的气味,用适当词句描述,并按六级记录其强度。与此同时,取少量水入口中,不要咽下法,尝尝水的味道,加以描述,并按六级记录强度,原水的水味检定只适用于人体健康无害的水样。3.3.2原水煮沸后的臭和味。将上述三角瓶内水样加热至开始沸腾,立即取下三角瓶,稍冷后按上法嗅味和尝味,用适当词句描述其
7、性质,并按六级记录其强度。注:有时可用活性炭处理过的水作为无臭对照水。臭和味的强度等级等级强度说明0无无任何臭和味1微弱一般饮用者甚难察觉,但嗅味敏感者可发觉2弱一般饮用者能察觉3明显已能明显察觉4强已有很显著的臭味5很强有强烈的恶臭或异味3.4肉眼可见物:将水样摇匀,直接观察、记录。3.5PH值PH值是水中氢离子活度的倒数的对数值。水的PH值可用PH电位计法和比色法制定。PH值电位法比较准确,比色法简易方便。PH电位法原理:以玻璃电极为指示电极,饱和甘汞电极为参比电极,插入溶液中组成原电池,在25时,每单位PH标度相当于59.1mv电动势变化值,在仪器上直接以PH的读数表示,温度差异在仪器上
8、有补偿装置。3.5.1试剂:-下列标准缓冲溶液均需用新煮并放冷的纯水配制。配成的溶液应贮存在聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶内。此类溶液可以稳定12个月。3.5.1.1PH标准缓冲液甲:称取10.21克在105烘干2小时的苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4),溶于纯水中,并稀释至1000ml,此溶液的PH值在20时为4.00。3.5.1.2PH标准缓冲溶液乙:称取3.40克,在105烘干2小时的磷酸二氢钾(KH2PO4)和3.55克磷酸氢二钠(Na2HPO4),溶于纯水中,并稀释至1000ml。此溶液的PH值在20时为6.88。3.5.1.3PH标准缓冲溶液丙:称取3.81克硼酸钠(Na2B4O7·
9、10H2O)溶于纯水中,并稀释至1000ml,此溶液的PH值在20时为9.22。以上三种标准缓冲溶液的PH值随温度而稍有差异,见下表:温度PH标准缓冲溶液温度PH标准缓冲溶液()甲乙丙()甲乙丙04.006.989.46254.016.869.1854.006.959.40304.026.859.14104.006.929.33354.026.849.10154.006.909.23404.046.849.07204.006.889.223.5.2步骤3.5.2.1玻璃电极在使用前应放入纯水中浸泡24小时以上。3.5.2.2用PH标准缓冲溶液甲、丙检查仪器和电极必须正常。3.5.2.3测定时用
10、接近水样PH的标准缓冲溶液校正仪器刻度。3.5.2.4用洗瓶以纯水缓冲淋洗两电极数次,再以水样淋洗6-8次,然后插入水样中,1分钟后直接从仪器上读取PH值。注:甘汞电极内为氯化钾的饱和溶液,当室温升高后,溶液可能由饱和状态变为不饱和状态,故应保持一定量氯化钾晶体。3.5.3精密度与准确度:经68个实验室用本法测定PH值为8.6和7.7的合成水样,相对标准差分别为1.9%和2.7%,相对误差均为0。3.6总硬度: 水的硬度系指沉淀肥皂的程度。使肥皂沉淀的原因主要是由于水中的钙、镁离子,此外铁、铝、锰、锶及锌等金属离子也有同样的作用。总硬度可将上述离了的浓度相加进行计算,此法准确,但比较繁琐,而且
11、在一般情况下,钙、镁离子以外的其它金属离子浓度都很低。所以多采用EDTA容量法测定钙、镁离子的总量,并经过换算,以每升水中碳酸钙的毫克数表示。3.6.1应用范围:3.6.1.1本法适用于测定生活饮用水及其水源水中的总硬度。3.6.1.2本法于扰物质有以下两类:悬浮性或胶体有机物可影响终点观察,此时可将水样蒸干并于550灰化,干扰即可除去。金属离子如:Cu3+、Ni2+、C03+、AL3+、Fe3+及高价锰等,由于封闭现象使指示剂褪色或终点延长,硫化钠及氯化钾可掩蔽重金属的干扰,盐酸羟胺可使高铁离子及高价锰离子还原低价离而消除其干扰。3.6.1.3若取50ml水样,本法测定的最低价检测浓度为1.
12、0mg/L。3.6.2原理:EDTA在PH=10条件下,与水中的钙、镁离子生成无色可溶性络合物,指示剂铬黑T则与钙、镁离子生成紫红色络合物,滴定至终点时,钙、镁离子全部与EDTA络合而使铬黑T游离,溶液即由紫红色变为兰色。3.6.3试剂:0.01mol/L乙二胺四乙酸二钠标准溶液:称取3.72克乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2O3Na2·2H2O)溶于纯水中,并稀释至1000ml,标定。PH=10缓冲溶液试剂I:称取16.9氯化胺(NHCL),溶于143ml浓氢氧化铵中。试剂II:称取0.780克硫酸镁(MgSO4·7H2O)及1.178克乙二胺四乙酸二钠,溶于50ml纯
13、水中,加入2ml氯化铵氢氧化铵溶液(试剂I)和5滴铬黑T指示剂(此时溶液应呈紫红色,若为天蓝色,应再加极少量硫酸镁使呈紫红色)。用EDTA溶液滴定至溶液由紫红色变为天蓝色,合并试剂I及试剂II两种溶液,并用纯水稀释至250ml,合并后如溶液又变为紫色,在计算结果时应扣除试剂空白。注:a、氢氧化铵-氯化铵缓冲液应贮存于聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶中,防止使用中因反复开盖,使氨水浓度降低而影响PH值。b、配制缓冲液时,加入EDTA-Mg,是为了使某些含镁水样低的样品,滴定终点更敏锐,如果备有市售EDTA-Mg试剂,即可直接取1.25克EDTA-Mg,配入250ml缓冲溶液。0.5%铬黑T指示剂:称取0.5
14、克铬黑T(C20H12O7N3Sna),用95%乙醇溶解并稀释至100ml,置于冰箱中保存,可稳定一个月。固体指示剂:称取0.5克铬黑T,加100克氯化钠,研磨均匀,贮于棕色瓶内,密塞备用,可较长期保存。5%硫化钠溶液:称取5.0克硫化钠(Na2S·9H2O)溶于纯水中,并稀释至100ml。1.0%盐酸羟胺溶液:称取1.0克盐酸羟胺(NH2OH·HCL),溶于纯水中,并稀释于100ml。3.6.4步骤吸取50.0ml水样(若硬度过大,可少取水样用水稀释至50ml,若硬度过小,改取100ml),置于150ml三角瓶中。注:为防止碳酸钙及氢氧化镁在碱性溶液中沉淀,滴定时水样中的
15、钙、镁离子含量,不能过多,若取50ml水样,所消耗0.01mol/L EDTA溶液的体积应少于15ml。若水样中含有金属干扰离子使滴定终点延迟或颜色发暗,可另取水样,加入0.5ml盐酸羟胺溶液及1ml硫化钠溶液或0.5ml氰化钾溶液。加入1-2ml缓冲溶液及5滴铬黑T指示剂(或一小勺固体指示剂)立即用EDTA标准溶液滴定,充分摇振,至溶液内紫红色变为蓝色,即表示到达终点。3.6.5计算: 100.00 C2V2××1000×1000 1000C= V水式中:C2为0.01mol/L EDTA标液的实际摩尔浓度。Mol/L V2为耗EDTA标液的毫升数。 V水为水样
16、的体积数,ml C为水样的总硬度(CaCO3)mg/L。硬度单位的换算表硬度单位毫克当量/升度碳酸钙,mg/L毫克当量/升12.80450.045度0.35663117.847碳酸钙,mg/L0.019980.056013.7氯化物。氯化物几乎存在在于所有的饮用水中,饮用水中氯化物的测定方法常用的有硝酸银滴定法及硝酸汞滴定法。硝酸银滴定法操作简单,但终点不甚明显;硝酸汞滴定法终点敏税,但测定要求严格控制PH。下面介绍硝酸银滴定法。3.7.1应用范围:本法适用于测定生活饮用水及其水源中氯化物的含量。溴化物及碘化物均能起相同反应,结果计算中均以氯化物量计入,硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐超过15mg
17、/L耗氧量可干扰测定,硫化物等可用过氧化氢氧化除去干扰。耗氧量较高的水样可用高锰酸钾氧化或蒸干灰化等方法处理。本法的最低检测浓度为1.0mg/L。原理:硝酸银与氯化物作用生成氯化银沉淀,当有多余的硝酸银存在时,则与铬酸钾指示剂反应,生成红色铬酸银沉淀,指示反应达到终点。3.7.2试剂:氯化钠标准溶液:将氯化钠(NaCL)置于坩埚内,于700灼烧1小时,冷却后称取8.2420克溶于纯水并定容至1000ml,吸取10.0ml,用纯水准确定容至100ml,此溶液1.00ml含0.500mg氯化物。硝酸银标准溶液:称取2.4克硝酸银(AgNO3),溶于纯水并定容至1000ml,用氯化钠标准溶液进行标定
18、,吸取25.00ml氯化钠标准溶液,置于瓷蒸发皿内。加纯水25ml。另取一瓷蒸发皿,加50ml纯水作为空白。各加入1ml铬酸钾溶液,用硝酸银标准溶液滴定。同时用玻璃棒不停地搅拌,直到产生淡桔黄色为止,每毫升硝酸银相当于氯化物(CL-)的毫克数可由下式表示: 25×0.500W= V2-V1式中:W为每毫升硝酸银相当于氯化物量,mg。 V1为空白消耗的硝酸银标液的毫升数。 V2为NaCL标液消耗硝酸银标液的毫升数。铬酸钾溶液:称取5克铬酸钾(K2CrO4),溶液于少量纯水中,加入上面硝酸银溶液至红色沉淀不褪,混匀,放置过夜后过滤。将滤液用纯水稀释至100ml。氢氧化铝悬浮液:称取125
19、克硫酸铝钾KAL(SO4)2·12H2O或硫酸铝铵NH4AL(SO4)2·12H2O溶于1000ml纯水中,加热于60,慢慢加入55ml浓氨水,使成氢氧化铝沉淀。充分搅拌后静置,弃去上清液。反复用纯水洗涤沉淀,至倾出液无氯离子(用硝酸银检定)为止。最后加入300ml纯水成悬浮液,使用前振荡均匀。酚酞指示剂:称取0.5克酚酞(C2OH14O4)溶于50ml95%乙醇中,加入50ml纯水,再滴加0.05mol/L氢氧化钠溶液,使溶液呈微红色。0.025mol/L硫酸溶液:吸取1.4ml浓硫酸,加入纯水中,并稀释至1000ml。0.5mol/L氢氧化钠溶液:称取0.2克氢氧化钠,
20、溶于纯水并稀释至100ml。30%过氧化氢。3.7.3步骤:3.7.3.1水样预处理:如水样带有颜色,则取150ml水样,置于250ml三角瓶内,加入2ml氢氧化铝悬浮液,振荡均匀,过滤,弃去最初滤下的20ml。如水样含有亚硫酸盐和硫化物,则加氢氧化钠溶液,将水样调节至中性或弱碱性,加入1ml 30%过氧化氢,搅拌均匀。如水样的耗氧量超过15ml/L,可加入少许高锰酸钾晶体,煮沸,加入数滴乙醇以除去多余的高锰酸钾,然后过滤。3.7.3.2取50ml原水样或经过处理的水样(若氯化物含量高可取适量水样,用纯水稀释至50ml),置于瓷蒸发皿内,另取一瓷蒸发皿加入50ml纯水。分别加入2滴酚酞指示剂,
21、用0.025mol/L硫酸溶液或0.05mol/L NaOH溶液,调节至溶液的红色刚变为无色。再各加1ml铬酸钾溶液,用经过标定的硝酸银标准溶液进行滴定,同时用玻璃棒不停搅拌,直至产生桔黄色为止。3.7.4计算: (V2-V1)×W×1000C= V3式中:C为水样中氯化物(CL-)浓度,mg/LW为硝酸银标液每毫升相当于氯化物(CL-)的量,mgV1为纯水空白消耗硝酸银标液的毫升数。V2为水样消耗硝酸银标液的毫升数。V3为水样的体积,ml3.8细菌总数。细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37经24小时培养后,所生长的细菌菌落的总数。3.8.1平板法3.8.1.1
22、应用范围本法适用于测定饮用水和水源中的细菌总数。所测定的细菌总数增多,说明水被生活废弃物污染,但不能说明污染的来源,因此必须结合总大肠菌群数来判断水污染的来源和安全程度。3.8.1.2原理每种细菌都有它一定的生理特性,培养时应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、PH、需氧性质)去满足其要求,才能分别地将各种细菌培养出来。在实际工作中,不可能做到,一般是根据测定要求而采用常用方法进行细菌总数的测定,所测定的结果只包括在所使用的条件下生长的细菌总数。3.8.1.3培养基3.8.1.3.1成份:蛋白胨 10g牛肉膏 3g氯化钠 5g琼脂 10-20g蒸馏水 1000ml3.8.1.3.
23、2制法将上述成份混合后,加热溶解,调整PH为7.4-7.6过滤,分装于玻璃容器中,经121灭菌20分钟,储存于冷暗处备用。3.8.1.4步骤:3.8.1.4.1生活饮用水以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样,注入灭菌平皿中,倾注约15ml已融化并冷却到45左右的营养琼脂培养基,并立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种,同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。待冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于37恒温箱内培养24小时,进行菌落计数,即为水样1ml中细菌总数。3.8.1.4.2水源水以无菌操作方法吸取1ml充分混匀的水样,注入盛有9ml灭菌水的试
24、管中,混匀成1:10稀释液。吸取1:10的稀释液1ml注入盛有9ml灭菌水的试管中,混匀成1:100稀释液,按同法依次稀释成1:1000、1:10000稀释液等备用,吸取不同浓度的稀释液时必须更换吸管。用灭菌吸管取2-3个适宜浓度的稀释液1ml,分别注入灭菌平皿内,以下操作同生活饮用水的检验步骤。3.8.1.5菌落计数及报告方法。作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计算时应用,在求同稀释度的平均数时,若其中一个平皿有较大片状菌落生产时,则不宜采用。而应以无片状菌落生产的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状
25、菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数,然后再求该稀释度的平均菌落数。3.8.1.6各种不同情况的计算方法。首先选择平均菌落数在30-300之间者进行计算,当只不有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告之(见表18例1)。若有两个稀释度,其平均菌落数均在30300之间,则应按两者菌落总数之比值来决定,若其比值小于2应报告两者的平均数。若大于2则报告其中较小的菌落总数。(见表18例2及3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表18例4)。若所有稀释度的平均菌落数
26、均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表18例5)。若所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间,则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表18例6)。菌落计数的报告:菌落数在100以内时按实有数报告,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算,为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示(见表18“报告方式”栏),在报告菌落数为“无法计数”时,应注明水样的稀释倍数。表18 稀释度选择及菌落数报告方式例次不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落总数报告方式个/ml10-110-210-3菌落数之比个ml1136516420-
27、16400 16000或1.6×10422760295461.637750 38000或3.8×10432890271602.227100 27000或2.7×1044无法计数1650513-51300510000或5.1×105527115- 270 270或2.7×1026无法计数30512-30500 31000或3.1×1043.9总大肠菌群在饮用水的微生物安全监测中,普遍采用正常的肠道细菌作为粪便污染指标,而不是直接测定肠道致病菌。总大肠菌群系指一群需氧及兼性厌氧的,在37生长时能使乳糖发酵,在24h内产酸产气的革兰氏阴性无
28、芽胞杆菌,总大肠菌群数系指每升水样中所含有的总大肠菌群的数目。总大肠菌群可用多管发酵法或滤膜法检验。3.9.1多管发酵法。3.9.1.1应用范围本法适用于饮用水、水源水,特别是混浊度含量高的水质中总大肠菌群的测定。水样中总大肠菌群数的总量,表明水被粪便污染的程度,而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能性。3.9.1.2原理根据总大肠菌应具有的生物特性,如革兰氏阴性无芽胞杆菌,在3724h内能发酵乳糖并产酸产气,能在选择性培养基上产生典型菌落。3.9.1.3培养基3.9.1.3.1乳糖蛋白胨培养液成份蛋白胨 10g牛肉膏 3g乳糖 5g氯化钠 5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml蒸馏水 1000m
29、l3.9.1.3.2三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液按上述乳糖蛋白胨培养液浓缩三倍配制。3.9.1.3.3品红亚硫酸钠培养基(供多管发酵法用)成份蛋白胨 10g乳糖 10g磷酸氢二钾 3.5g琼脂 15-30g蒸馏水 1000ml无水亚硫酸钠 5g左右5%碱性品红乙醇溶液 20ml3.9.1.3.4伊红美蓝培养基成份蛋白胨 10g乳糖 10g磷酸氢二钾 2g琼脂 20-30g蒸馏水 1000ml2%伊红水溶液 20ml0.5%美蓝水溶液 13ml3.9.1.4步骤:3.9.1.4.1生活饮用水初发酵试验:在2个各装有已灭菌50ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的大试管或烧瓶中(内有倒管)内,以无菌操作各加入
30、水样100ml;在10支装有已灭菌5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的试管中(内有倒管),以无菌操作各加入水样10ml混匀,后置于37恒温箱内培养24小时。平板分离:经培养24小时后,将产酸产气及只产酸的发酵管,分别接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基上,再置于37恒温箱内培养1824小时挑选符合下列特征的菌落,取菌落的一小部分进行涂片。革兰氏染色、镜检。品红亚硫酸钠培养基上的菌落。紫红色,具有金属光泽的菌落。深红色,不带或略带金属光泽的菌落。淡红色,中心色较深的菌落。伊红美蓝培养基上的菌落。深紫黑色,具有金属光泽的菌落。紫黑色,不带或略带金属光泽的菌落。淡紫红色,中心色较深的菌落。1.复发酵
31、试验:上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽胞杆菌,则挑取该菌落的另一部分再接种于普通浓度乳糖蛋白胨培养液中(内有倒管),每管可接种分离自同一初发酵管的最典型的菌落13个,然后置于37恒温箱中培养24小时,有产酸产气者(不论倒管内气体多少皆作为产气论),即证实有总大肠菌群存在。2.根据证实有总大肠菌群存在的阳性管(瓶)数3.查表19报告每升水样中的总在肠菌群数。表19总大肠菌群数检数表接种水样总量300ml(100ml 12份,10ml 10(份) 100ml水量的阳性管 (瓶) 10ml数水量的阳性管数G每升水样中总大肠菌群数1每升水样中总大肠菌群数2每升水样中总大肠菌群数0<34111
32、38182713273111838414245251830706223692727431208315116193660230104069>2303.9.1.4.2水源水将水样作1:10稀释。于各装有5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的5个试管中(内有倒管),各加入10ml水样,于各装有10ml乳糖蛋白胨培养液的5个试管中(内有倒管),各加入1ml水样,于各装有10ml乳糖蛋白胨培养液的5个试管中(内有倒管),各加入1ml 1:10稀释水样。共计15管,三个稀释度。以后的检验步骤同上述生活饮用水的检验方法。根据证实有总大肠菌群存在的阳性管数查表20报告每升水样中的总大肠菌群数。滤膜法。3.9.
33、1.4.2.1应用范围本法适用于饮用水和水源水,特别是低浊度水样中总大肠菌群数的测定。本法适用于较大量水样的测定。如检验原水样量过少,可加适量灭菌水稀释体积加大后再测定。3.9.1.4.2原理滤膜是一种微乳薄膜,孔径0.45-0.65um,能滤过大量水样,并将水中含有的细菌截留在滤膜上,然后将滤膜贴在选择性培养基上,经培养后直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落,算出每升水样中含有的总大肠菌群数。3.9.1.4.3培养基品红亚硫酸钠培养基:成份蛋白胨 10g酵母漫膏 5g牛肉膏 5g乳糖 10g琼脂 15-20g磷酸氢二钾 3.5g无水亚硫酸钠 5g左右5%碱性品红乙醇溶液 20ml蒸馏水 10
34、00ml乳糖蛋白胨培养液:同前相同。乳糖蛋白胨半固体培养基:成份蛋白胨 10g牛肉膏 5g酵母漫膏 5g乳糖 10g琼脂 5g左右蒸馏水 1000ml此培养基制成后,需用已知大肠菌群株进行鉴定,应在6-8h产生明显气泡。3.9.1.4.4步骤。3.9.1.4.4.1准备工作1.滤膜灭菌:将滤膜放入烧杯中,加入蒸馏水,置于沸水浴中煮沸灭菌三次,每次15分钟,前两次煮沸后需更换水洗涤2-3次,以除去残留溶剂。2.滤器灭菌:用点烯的酒精棉球,火焰灭菌。也可用121灭菌20分钟。3.过滤水样3.1用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放已灭菌的滤床上,稳妥地固定好滤器,将333ml水样(如水
35、样含菌数较多,可减少过滤水样量)注入滤器中,加盖,打开滤器阀门,在负0.5大气压下抽滤。3.2水样滤完后,再抽气约5S,关上滤器阀门,取下滤器,用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分,移放在品红亚硫酸钠培养基上,滤膜截留细菌面向上,滤膜应与培养基完全贴紧,两者间不得留有气泡,然后将平皿倒置,放入37恒温箱内培养2224小时。3.9.1.4.5观察结果挑选符合下列特征菌落进行革兰氏染色,镜验。紫红色,具有金属光泽的菌落;深红色,不带或略带金属光泽的菌落;淡红色,中心色较深的菌落。3.9.1.4.5.1凡系革兰氏染色阴性无芽胞杆菌,再接种乳糖蛋白胨培养液或乳糖蛋白胨固体培养基(接种前应将此培养基放入水浴中煮沸
36、排气,冷却凝固后方能使用),经37培养,前者于24小时产酸产气者,或后者经68小时培养后产气者,则判定为总大肠菌群阳性。3.9.1.4.5.21L水样中总大肠菌群数等于滤膜上生长的大肠菌群菌落总数乘以3。3.10余氯:余氯是指水经加氯消毒,接触一定时间后,余留在水中的氯。余氯有三种形式:总余氯包括HOCL、NH2CL、NHCL2等,化合余氯包括NH2CL、NHCL2及其它氯胺类化合物,游离余氯包括HOCL及OCL-等。余氯可用邻联甲苯胺比色法,邻联甲苯胺-亚砷酸盐比色法,N,N一二乙基对苯胺一一硫酸亚铁胺容量法测定。第一法较简单,可测定总余氯及游离余氯。第二法可以分别测定三种形式的余氯,并能去
37、除假色的干扰。第三法可分别测定游离余氯,一氯胺、二氯胺及三氯胺。邻联甲苯胺比色法:3.10.1应用范围:本法适用于测定,生活饮用水及其水源水的总余氯及游离余氯;水中含有悬浮性物质时干扰测定,可用离心法去除。干扰物质的最高允许含量如下:高铁0.2mg/L;四价锰0.01mg/L;亚硝酸盐:0.2mg/L。本法最低检测浓度为0.01mg/L余氯。3.10.2原理:在PH值小于1.8的酸性溶液中,余氯与邻联甲苯胺反应,生成黄色的醌式化合物,用目视法进行比色定量;还可用重铬酸钾铬酸钾溶液配制的永久性余氯标准溶液进行比色。3.10.3永久性余氯比色溶液的配制:3.10.3.1磷酸盐缓冲贮备溶液:将无水磷
38、酸氢二钠(Na2HPO4)和无水磷酸二氢钾(KH2PO4)置于105烘箱内2小时,冷却后,分别称取22.86克和46.14克。将此两种试剂共溶于纯水中,并稀释至1000ml。至少静置4天,使其中胶状杂质凝聚沉淀,过滤。3.10.3.2磷酸盐缓冲液(PH6.45):吸取200.0ml磷酸盐缓冲贮备液,加纯水稀释至1000ml。3.10.3.3重铬酸钾铬酸钾溶液:称取0.1550克干燥的重铬酸钾(K2Cr2O7)及0.4650克铬酸钾(K2CrO4),溶于磷酸盐缓冲溶液中,并定容至1000ml。此溶液所产生的颜色相当于1mg/L余氯与邻联甲苯胺所产生的颜色。3.10.3.4 0.01-1.0mg/
39、L永久性余氯标准比色管的配制方法:按表21所列数量,吸取重铬酸钾铬酸钾溶液,分别注入50ml刻度具塞比色管中,用磷酸盐缓冲溶液稀释至50ml刻度,避免日光照射,可保存6个月。若水样余氯大于1mg/L,则需将重铬酸钾铬酸钾溶液的量增加10倍,配成相当于10mg/L,余氯的标准色。再适当稀释,即为所需的较浓余氯标准色列。表21 永久性余氯标准比色溶液的配制余 氯mg/L重铬酸钾一铬酸钾溶液ml余 氯mg/L重铬酸钾一铬酸钾溶液ml0.010.50.5025.00.031.50.6030.00.062.50.7035.00.105.00.8040.00.2010.00.9045.00.3015.01
40、.0050.00.4020.03.10.4试剂:邻联甲苯胺溶液;称取1.35克二盐酸邻联甲苯胺(C6H3CH3NH3)2·2HCL,溶于500ml纯水中,在不停搅拌下将此溶液加于150ml浓盐酸与350ml纯水的混合液中,盛于棕色瓶内,在室温下保存,可使用6个月,当温度低于0时,邻联甲苯胺将析出,不易再溶解。3.10.5步骤:3.10.5.1取配制永久性余氯标准比色管用的同型50ml比色管,先放入2.5ml邻联甲苯胺溶液,再加入澄清水样50.0ml,混合均匀,水样的温度最好为1520,如低于此温度,应先将水样管放入温水浴中,使温度提高到1520。3.10.5.2水样与邻联苯胺溶液接触后,如立即进行比色,所得结果为游离余氯,如放置10分钟使
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