银杏叶的质量标准的制定

1、 银杏叶的质量标准的制定名称： 银杏叶 yinxingye拉丁名： Folium Ginkgo药材来源 ： 本品为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶。植物形态： 银杏，落叶乔木，高可达40m。枝有有长枝与短枝，幼树树皮淡灰褐色，浅纵裂，老则灰褐色，深纵裂。叶在长枝上螺旋状散生，在短枝上3-5（-8）簇生；柄长3-10cm；叶片扇形，淡绿色，无毛，有多数2叉状并列的细脉，上缘宽5-8cm，浅波状，有时中央浅裂或深裂。雌雄异株，花单性，稀同株；球花生于短枝顶端的鳞片状叶的腋内；雄球花成柔荑花序状，下垂；雌球花有长梗，梗端常分2叉，每叉顶生一盘状珠座，每珠座生一胚珠，仅一个发育成

2、种子。种子核果状，椭圆形至近球形，长，径约2cm；外种皮肉质，有白粉，熟时淡黄色或橙黄色；中种皮骨质，白色，具2-3棱；内种皮膜质，胚乳丰富。花期3-4月，种子成熟期9-10月。产地： 主要分布在山东，江苏，四川，河北，湖北，河南等地。全国最大的银杏培育基地是山东省郯城县。采制： 秋季叶尚绿时采收，及时干燥。以色黄绿者为佳。炮制： 取原药材，除去杂质。性状： 本品多为不规则的碎片，完整者呈扇形。表面黄绿色或浅棕黄色，上缘呈不规则的波状弯曲，有的中间凹入。有多数平行叶脉，细而密，光滑无毛，纸质，易纵向撕裂。叶基楔形，有长柄，长.。体轻。气微，味微苦。检查 ： 水分   照水分

3、测定法（中国药典2010年版一部附录 H第一法）测定，不得过5.0%。重金属 取炽灼残渣项下遗留的残渣，依(中国药典2010年版一部附录 E)检查，不得过百万分之二十。 总灰分   不得过10.0（中国药典2005年版一部附录 K）。酸不溶灰分 不得超过2.0%（附录 K）浸出物： 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（中国药典2005年版一部附录 A）测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于25.0。（至少应有10批样品20个数据）化学成分： 银杏内酯A（ginkgolide A）、银杏内酯B（ginkgolide B）、银杏内酯C（ginkgolide C）、山萘酚（kaempfer

4、ol）、槲皮素（quercetin）、芦丁（rutin）、异鼠李素（isorhamnetin）、山萘酚-3-鼠李糖甙（kaempferol-3-O-rhamnoside）、3，5，7，4-四羟基-二氢黄酮（3，5，7，4-tetrahydroxy-flavanone）、白果黄素（bilobetin）、银杏黄素（ginkgetin）、异银杏黄素（isoginkgetin）、西阿多黄素（sciadopitysin）、3，3-二甲氧基-4，4-二羟基-二苯乙烯（3，3dimethoxy-4，4-dihydroxy-stilbene）、-谷甾醇（sitosterol）和10，16-二羟基-十六酸等。薄

5、层色谱鉴别：银杏萜类内酯1.银杏叶对照提取物溶液的制备 精密称取银杏叶对照提取物0. 15 g, 加水10 m ,l 置水浴中温热使其溶散, 加2%盐酸溶液两滴, 用醋酸乙酯振摇提取4次( 15, 10, 10, 10 m l) , 合并提取液, 用5%醋酸溶液20 m l洗涤, 分取醋酸钠液, 再用醋酸乙酯10 m l洗涤, 合并醋酸乙酯液, 回收溶剂至干, 残渣用甲醇溶解并转移至5m l量瓶中, 加甲醇至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液, 即得。2. 对照品溶液的制备 分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C 对照品适量, 精密称定, 加甲醇制成每毫升各含

6、1, 1, 1, 0. 5 mg 的溶液, 作为对照品溶液。3. 对照品混合溶液的制备分别取白果内酯对照品、银杏内酯A 对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C 对照品适量, 精密称定, 加甲醇制成每毫升各含1, 1, 1, 0. 5 mg 的混合溶液, 作为对照品混合溶液。4. 测定吸取银杏叶对照提取物溶液、各对照品溶液和对照品混合溶液各15 􀀁 ,l 分别点于同一含4% 醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G 薄层板上, 以甲苯- 醋酸乙酯- 丙酮- 甲醇( 10 5 5 0. 6)为展开剂, 分别在10, 12, 14, 16, 19, 21,24, 27, 30, 3

7、3, 35# 温度下展开, 取出, 晾干, 用醋酸蒸气熏15m in, 在140 160# 加热30 m in, 放冷, 置紫外光灯( 365 nm )下检视。结果见图1。含量测定：总黄酮醇苷 照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-.磷酸溶液（:）为流动相；检测波长为nm理论板数按槲皮素峰计算应不低于对照品溶液掏制备:分别精密称取经五氧化二磷干燥过夜的槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品, 各加甲醇制成每分别含.mg、.mg、.mg的溶液, 作为对照品溶液供试品溶液的制备:取本品中粉约（同时另取本品粉末测定水分）, 精密称定, 置索氏提取器中, 加氯仿回

8、流提取小时, 弃去氯仿, 药渣挥干, 加甲醇回流提取小时, 提取液蒸干, 残渣加甲醇盐酸溶液（:）混合液, 回流分钟, 放冷, 转移至量瓶中, 并加甲醇至刻度, 摇匀, 即得测定法:分别精密吸取上述三种对照品溶液与供试品溶液各, 注人液相色谱仪, 测定, 分别计算三种黄酮苷元的含量, 以下式换算成总黄酮醇苷的含量总黄酮醇苷含量（槲皮素含量十山柰素含量十异鼠李素含量）×.本品按干燥品计算, 含总黄酮醇苷不得少于. 萜类内酯 照中国药典2005版241页高效液相色谱法测定性味与归经： 甘、苦、涩，平。归心、肺经。功能与主治： 敛肺，平喘，活血化瘀，止痛。用于肺虚咳喘；冠心病，心绞痛，高脂

9、血症。用法与用量： 912g。注意： 有实邪者忌用。贮藏： 置通风干燥处。参考文献1. 韩立路 孙兴力 龙红萍 周金彩 HPLC法快速测定银杏叶中银杏总黄酮醇苷含量 <中国医药指南>   2009 年07卷12期 2. 池静端 银杏叶化学成分及其有效成分分析方法的研究 中国协和医科大学 中国国家数字图书馆 3余启荣 晏利芝 谭湘湘 HPLC 法测定银杏叶提取物中总黄酮醇苷的含量 首都师范大学学报( 自然科学版) 第30 卷􀀁 第2 期 2009 年4 月 4中华人民共和国国家药典委员会. 2005版中国药典5中华人民共和国国家药典委员会. 20

10、10版中国药典6. 卓菊 朱庆龄 石晓 银杏叶与银杏叶提取物及其片剂中萜类内酯薄层色谱分析 时珍国医国药2007年第18卷第8期叶类生药的鉴定-银杏叶一、 目的要求1 掌握银杏叶的显微鉴别特征2 掌握银杏叶的理化鉴别方法3 熟悉银杏叶的性状及显微鉴别要点二、 仪器和材料显微镜，载玻片，盖玻片，刀片，酒精灯，木签，镊子，滤纸，紫外光灯水合氯醛，稀甘油，镁粉，盐酸，2%三氯化铝乙醇溶液三、 实验内容1. 银杏叶粉末显微特征的观察（见图3）(1) 管胞具有单列或数列具缘纹孔或网纹纹(2) 表皮组织碎片上可见沉陷的气孔，表皮细胞壁微波状(3) 含草酸钙簇晶，纤维壁厚薄不一并木质化(4) 存在石细胞(5

11、) 含棕色块2. 银杏叶横切面组织构造的观察（见图4）（1） 叶片横切面厚度一致，上表皮细胞类圆形，外壁略呈乳头状突起，被较厚的角质层；下表皮细胞排列整齐，类方形，外壁具角质层，有时可见内陷气孔。（2） 上表皮内具一层栅栏组织，细胞呈短分叉状，或不明显，下为排列疏松的海绵组织，少数薄壁细胞含大型草酸钙簇晶，偶可见方晶。（3） 呈两面叶型.叶脉维管束大小相当,无主次之分, 近等距离分布于叶肉中，构造相同.维管束鞘明显,其周围有草酸钙簇晶分布（4） 木质部靠近上表皮一侧，韧皮部位于下方（5） 叶肉及韧皮部薄壁细胞中有的含单宁物质。在两维管束之间常存在一个大型离生分泌道，分泌道含棕色物质。四、 银杏叶的理化鉴别1取本品碎片10g，加水100ml，煮沸15分钟，趁热滤过，取滤液2ml，加镁粉少量与盐酸34滴，置水浴上加热数分钟，显棕红色。（检查黄酮） 2取上项剩余的滤液适量，点于滤纸上，喷2%三氯化铝乙醇溶液，干燥后，置紫外光灯（nm）下观察, 可见黄绿色