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1、3化验室标准操作规程编号:zmljykxm-001丙氨酸氨基转移酶测定(动力法) 第 1 页 共 3 页起草人庄红梅起草日期200510生效日期2005.11审核人张庆芳审核日期200510颁布后重审日期2005.11批准人许清泉批准日期200510 颁布部门检验科颁布部门走马岭中心卫生院丙氨酸氨基转移酶测定 1.原理: ALTL-丙氨酸+a-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸LOH丙酮酸+NADH+H+ L-乳酸+NAD+2.标本采集与处理:2.1受检者准备:病人必须空腹12小时,不饮酒24小时后采集血样。2.2静脉采血:除非是卧床的病人,一般采血取坐位,从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟
2、,穿刺成功后立即松开止血带;2.3标本处理:血清要迅速与血细胞分离,因红细胞中ALT比血清中ALT的浓度高。血清中的ALT能在室温(2025)下保存24小时或者在4下保存1周。2.4采血管要求:采血时要求使用一次性无菌注射器,一人一管,用后毁形,用500mg/L有效氯浸泡消毒分钟,回收、焚烧、做好登记。2. 5标本拒收;接收标本应检查是否符合要求(有无溶血)试管是否填写完整,对不合格标本应重新采集。3.试剂:3.1试剂盒组成:(柏定生物工程(北京)有限公司)a-酮戊二酸 15mmol/LNADH 0.18 mmol/L乳酸脱氢酶(LDH) >5000U/LTris缓冲液 100 mmol
3、/L化验室标准操作规程编号:zmljykxm-001丙氨酸氨基转酶测定(动力法) 第 2 页 共 3 页起草人庄红梅起草日期200510生效日期2005.11审核人张庆芳审核日期200510颁布后重审日期2005.11批准人许清泉批准日期200510 颁布部门检验科颁布部门走马岭中心卫生院3.2质控血清:应在测量未知样本的同时检测质控物并确保质控在可接受的范围内,并且结果必须在范围内。质控品批号及范围:批号022431,范围*±2st和*±3s。保存环境:在28保存,有效期内稳定。3.3试剂贮存及稳定性:试剂在28保存可稳定至瓶签所示失效日期;工作液28可稳定30天。4.仪
4、器: 上海迅达公司的半自动生化分析仪XD811。5.操作程序:5.1试剂准备:在室温中按瓶签标定的体积,定量加入新鲜去离子水,轻轻混匀至试剂完全溶解。5.2分析参数:方法:速率法;波长340nm 温度:37比色杯光径: 1cm 延迟时间60秒5.3操作步骤:质控管标本管工作液100ml1.00ml样品0.10ml 质控品0.10ml混合均匀,在反应温度保温60秒,分别读取吸光度。5.4计算方法:样品中ALT活动;ALT(U/L)=A/分*F V1 F= *1000=1746 Vs*消光系数V1=反应总体积 Vs=样品体积NADH在340的毫克分子消光系数=6.3 6.操作性能:线性范围:010
5、00U/L(37)如果血清中ALT活力超出范围,则用生理盐水稀释血清重做,结果乘以稀释倍数。7.参考范围:040U/L 化验室标准操作规程编号:zmljykxm-001丙氨酸氨基转酶测定(动力法) 第 3 页 共 3 页起草人庄红梅起草日期200510生效日期2005.11审核人张庆芳审核日期200510颁布后重审日期2005.11批准人许清泉批准日期200510 颁布部门检验科颁布部门走马岭中心卫生院8.结果审核:8.1室内质控结果的判断:对质控结果进行分析是否在控。8.2对检验结果进行审核,包括检验项目是否漏项,打印是否清楚、正确,难以解释的结果,并决定是否需要复查。9.临床意义:ALT在下列疾病可增高:(1)充血性心脏衰竭;各种肝脏疾病。 (2)传染病白细胞增多症(3)严重的心肌梗塞 (4)骨骼肌疾病
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