PM_(2.5)致冠状动脉粥样硬化大鼠ACS的可能机制及Atorvastatin的干预作用

1、PM_（2.5 ）致冠状动脉粥样硬化大鼠ACS的可能机制及Atorvastatin的干预作用第一部分冠状动脉粥样硬化大鼠模型的建立研究目的: 通过对三种不同的大鼠冠状动脉粥样硬化模型造模方式的比较, 探讨该模型建立过程中的影响因素,从而建立一种成熟的、可重复性好的大鼠冠状动脉粥样硬化模型, 为进一步细颗粒物 (PM_2.5) 对冠心病的毒性研究建立良好的动物模型基础。研究方法 : 将 32 只 Wistar 大鼠随机分为四组。 一组为正常对照组喂以基础饲料 , 其余三组为造模组 , 分别喂以以下三种不同的高脂饲料 : 蛋黄组（10%蛋黄、 10%猪油

2、、5%白糖、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、 74.3%基础饲料）、胆固醇组（4%胆固醇、10%猪油、 5%白糖、 0.5%胆酸钠、 0.2%丙基硫氧嘧啶、 80.3%基础饲料）、无丙基硫氧嘧啶胆固醇组（ 4%胆固醇、10%猪油、5%白糖、0.5%胆酸钠、80.5%基础饲料）,并在喂养初始 , 腹腔注射 V_D360万 IU/kg, 分三次 , 连续三天完成。正常对照组则以生理盐水替代。喂养期间监测体重改变 ,12 周后 , 处死大鼠 ,收集血清 , 检测血脂各项（ TC、TG、 HDL、LDL）, 计算动脉粥样硬化指数（AI ）,并对冠状动脉

3、的形态学改变进行观察。研究结果:1 、TC、LDL水平 : 胆固醇组蛋黄组无丙基硫氧嘧啶胆固醇组正常组。2、AI: 胆固醇组无丙基硫氧嘧啶胆固醇组和蛋黄组正常组。3、组织形态学观察发现 , 胆固醇组冠脉中有典型的动脉粥样硬化斑块形成, 而蛋黄组、无丙基硫氧嘧啶胆固醇组均未见典型斑块形成。4、从造模第 4 周开始 , 蛋黄组及胆固醇组体重增长缓慢 , 甚至出现负增长 , 到造模结束时 , 两组体重显著低于正常组及无丙基硫氧嘧啶胆固醇组。研究结论 :1 、虽然大鼠等啮齿类动物本身并不易形成动脉粥样硬化（AS）,但经过适当的干预后 , 仍可用于 AS模型的建造。 2、由 4%胆固醇、 10%猪油、

4、5%白糖、 0.5%胆酸钠、 0.2%丙基硫氧嘧啶、 80.3%基础饲料配制而成的高脂饲料饲喂 Wistar 大鼠 , 并于喂养初始 , 腹腔注射 V_D360万 IU/kg,12 周后 ,可成功建立冠状动脉粥样硬化大鼠模型。3、在造模过程中 , 丙基硫氧嘧啶的使用 ,对于升高血胆固醇 , 促进 AS形成具有重要作用。第二部分 PM₂₅致冠状动脉粥样硬化大鼠ACS的可能机制研究目的 : 摸索一种新的 PM₂₅染毒方式 : 分别提取 PM<sub>2

5、5</sub>的水溶性成份（ WSC）及酸溶性成份（ ASC）, 通过尾静脉注射的方式进行染毒。并探讨WSC、ASC对于 AS大鼠的心脏毒性作用机制及阿托伐他汀的干预效果。研究方法 :将大鼠随机分为三组 : 正常对照组、 AS模型组、 AS治疗组。AS模型组与 AS治疗组按照第一部分中的胆固醇组造模方法建造AS大鼠模型 ,AS 治疗组同时还给予阿托伐他汀 10mg·kg^-1 ·d^-1灌胃治疗 ,AS 模型组、正常对照组给予等量生理盐水灌胃。 提取 PM<sub>

6、;2.5</sub>的 WSC及 ASC。12 周后 , 将 WSC和 ASC以尾静脉注射方式、 PM_2.5混悬液以非暴露式气管注入方式分别染毒各组大鼠（40mg/kg）, 染毒 24 小时后处死。应用化学法、放射免疫法、酶联免疫吸附法、免疫组化法、凝胶滞留电泳等方法检测各项指标 （血脂、 MDA、SOD、IL-6 、TNF-、hs-CRP、ox-LDL、NF- B）的变化情况。 研究结果 :1 、WSC具有升高血清 TC、AI 、TNF-水平 , 激活心肌 NF- B 的作用。 2、 ASC具有升高血清 TC、TG、 LDL、 MDA

7、水平 , 降低血清 SOD水平 ,激活心肌 NF-B 的作用。3、AS模型与 WSC、ASC染毒具有交互作用 , 主要表现在升高LDL、AI 、IL-6水平 , 激活心肌 NF-B 的作用上。4、阿托伐他汀治疗后 , 血清 TC、LDL、AI 、MDA、ox-LDL、BP水平均显著降低 , 血清 SOD水平显著升高 , 心肌 NF- B 的活化程度降低。研究结论 :1 、提取 PM_2.5的 WSC及 ASC成份 , 以尾静脉注射的方式染毒大鼠 , 对于 PM_2.5毒性机制的研究具有可行性。2、PM<

8、;sub>2.5</sub>对 AS大鼠的毒性作用与升高血脂、 氧化应激损伤和加剧炎症反应三个方面有关。3、PM_2.5水溶性成份可能会通过加剧体内炎症反应 , 来发挥对 AS大鼠的心脏毒性作用。 4、PM_2.5酸溶性成份对 AS大鼠的心脏毒性作用则可能与氧化应激损伤和加剧炎症反应有关。5、在建立 AS模型的基础上给予PM_2.5染毒 , 则会加剧PM_2.5的毒性作用 , 即两者有协同作用。 6、通

9、过阿托伐他汀的治疗,在一定程度上可以降低PM_2.5对 AS大鼠的心脏毒性作用。 第三部分Atorvastatin单用及联合用药的干预作用研究目的: 探讨阿托法他汀单用 , 以及分别与氯吡格雷、氯沙坦、卡维地洛等临床常用药联合用药后的抗AS作用。研究方法 : 按照第一部分的方法 , 建立大鼠的 AS模型。 12 周后 , 分别给予阿托伐他汀 (10mg·kg^-1 ·d^-1) 、氯吡格雷(25mg·kg<sup>-1&l

10、t;/sup> ·d^-1) 、氯沙坦(20mg·kg^-1 ·d^-1) 、卡维地洛(20mg·kg^-1 ·d^-1) 、阿托伐他汀 +氯吡格雷、阿托伐他汀 +氯沙坦、阿托伐他汀 +卡维地洛灌胃治疗。 8 周后处死 , 分别检测各项指标治疗前后的变化情况。研究结果 :1 、经阿托伐他汀治疗后, 可显著降低 AS大鼠血清 TC、TG、LDL、ox-LDL、TNF-、hs-CRP水平 , 及心肌 NF- B 的活化程度。 2、当阿托伐他汀与氯吡格雷合用时 , 除以上改变外 , 还有降低血清 MDA、IL-6, 升高 SOD的作用 , 而且两者合用对升高SOD、降低 hs-CRP具有协同作用。 3、当阿托伐他汀与氯沙坦合用时 , 还出现了降低血清IL-6 、升高 SOD及降血压的作用 , 而且两者合用对降低心肌 NF- B 的活化程度具有协同作用。4、当阿托伐他汀与卡维地洛合用时, 还出现了降低血清MDA、升高 SOD的作用 , 而且