最新液相色谱仪操作规程

1、高效液相色谱系统操作规程1. 目的 标准高效液相色谱系统的使用和维护。2. 范围 本规程适用于高效液相色谱系统的使用和维护。3. 职责 质检室仪器分析员负责高效液相色谱系统的日常使用和维护。4. 系统组成本系统曲多溶剂输送系统有梯度控制器的高压输液泵、Waters 在线脱气机、 自动进样器、紫外检测器、荧光检测器、色谱工作站 / 电脑等组成。5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相应足够；流动相必 须适的用 0.45 u m 滤膜过滤、样品和标准溶液也可在平衡系统时配制，更换合 色谱柱柱进岀口位置应与流动相流向一致和定量环。5.1.2. 通电前应检查

2、仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通电源，依次液相色谱主机，待检测器自检结束显示测量状态时，打 开打 印机、电脑显示器、主机。5.2.1.2. 翻开工作站在线软件， 输入用户名和密码，按 OK 注册进入系统主界 面。5.2.2. 更换溶剂，在工作站上，脱气运行。5.3. 平衡系统分两种情况进行5.3.1. 等度模式5.3.1.1. 每次以 O.lml/min 的增量加大流速至 lml/min, 以超纯水冲洗系统 lOmin 。5.3.1.2. 检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予以排除。5.3.1.3.

3、观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应在平均值的 5-10%以内。如超 岀此 范围，可初步判断为柱询管路仍有气泡。5.3.1.4. 压力波动平稳后，换检验方法规定的流动相比例冲洗系统。在检查基线 稳定 性前，让最少 56 倍柱体积的流动相通过系统。531.5. 观察基线和压力变化。如果冲洗至基线漂移v 10-3Au/min，噪声为10-4Au数量级，且压力平稳时，可认为系统已到达平衡状态，可以进样。5.3.2.梯度模式5.3.2.1. 按检验方法规定的条件冲洗平衡系统，并注意压力波动变化和排气泡。5.3.22 在进样前运行卜 2次空白梯度。5.4. 进样，运行自动进样，直至完成。5.5. 数据处

4、理，运行离线工作站，记录相关数据。5.6. 清洗系统和关机5.6.1. 数据采集完毕后， 关闭检测器，继续以工作流动相冲洗 lOmin 后，换水冲 洗。5.63.1. C18柱先用超纯水以Iml/min冲洗40min以上，再用甲醇或乙月青冲洗 20min。5.6.5. 清洗完成后，先将流速降到 0,再关闭主机，断开电源。5.6.6. 填写使用记录6 简单维护与故障排除一、泵的故障及排除方法1、泵压力变化较大或没有流动相流岀，又无压力指示1 原因是泵内有大量气体。 可翻开排放阀， 使泵在较大流量下运转， 将气泡排尽： 也可 以用一个 50ml 针筒在泵出口处帮助抽岀气体。 2 原因是髙压密封环变

5、形，产生漏液。必须更换密封环：平时注意不要超出规定的最髙 压力。2、泵流量或压力不稳1 原因是砂滤棒内有气泡或被盐的微晶粒或溢生的微生物局部堵塞。可卸下砂滤棒浸入10% 硝酸内超声除去微生物或盐溶解，或浸入流动相内超声除气泡。再用蒸懈水立即淸洗。 2 原因是系统内有气泡。可加大流量排出气泡。 3 原因是单向阀有异物。可卸下单向阀，放入烧杯中，加 10% 稀硝酸，用超声波淸洗 20 分钟后， 再用干净蒸馅水淸洗。3、泵压力过髙原因是管路被堵塞， 需要卸下管道淸除和淸洗： 压力过低的原因是管路滴漏， 可扳紧各接口和更换损坏的管道。4、 键开关按下， 泵不运行， 只有嗡嗡电流声此故障原因是电机缺相，

6、 电机线圈被烧坏一组或活塞被生锈卡住，应视情况给予排除。二、紫外检测器的故障及排除方法1、系统内有气泡 1 如果气泡连续不断地通过流动池，将使噪声增大。必须对流动相进行充分除气检查系统各条导管是否漏气。如果导管损坏，必须更换并固紧各接口，加大系统流量驱除气泡。有条件的药厂可配备一部脱气机。 2 如果气泡流在检测器的流动池内，也可使噪音增大用手指压紧流动池出口，使池内增压，再快速放出流动相。反复操作数次，但注意不要使压力增加太大，以免流动池破裂或色谱柱冲坏。2、流动相被污染当流动池被污染时，可能产生噪音或基线漂移。可用水或甲醇等溶剂冲洗检测池要注意溶剂的互溶性 0如果污染严重，就需要依次使用 1

7、mol/L 硝酸、水和新鲜溶剂冲洗，或取岀 池体淸洗，更换窗口3、光源灯岀现故障 当氛灯使用到极限或者不能正常工作时，可能产生严重噪音，基线漂移，出现平头峰或齿形等异常峰，甚至基线不能回零。这时必须更换址灯一般嵐灯寿命1000 ? 2000 小时。4、倒峰 1倒峰的出现，可能是检测器的极性接反。更正后即可将其转复为正峰。 2 如果流动相中含有紫外吸收的杂质时，无吸收的组分就会产生倒峰。对此，改为高纯 流动相。 3 在死时间附近的锋利峰，往往是由进样时的压力变化或者由于样品溶剂与流动相不同 三、本规程自 2021年 12 月 15日起发布实施。度的溶剂为所引起的批准人：起草人：上腔静脉肺静脉主动脉右心房右心室 下腔静脉身体体 上下部 毛细 血管肺部毛细血管腹部毛细血管