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文档简介
1、专题一微生物的培养与应用专题一微生物的培养与应用选修1知识内容知识内容考纲要求考纲要求1.微生物的分离与培养微生物的分离与培养2.某种微生物数量的测定某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用生物在其他方面的应用知识点一:微生物的分离与培养知识点一:微生物的分离与培养1培养基培养基判断正误判断正误(1)据物理状态的不同,培养基只有液体培养基和固体培养据物理状态的不同,培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型。基两种类型。( )(2)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机
2、盐四种成培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。分。 ( )(3)在配制培养基时,除满足营养需求外,还应考虑在配制培养基时,除满足营养需求外,还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求。及特殊营养物质的需求。( )2无菌技术无菌技术连线连线倒平板倒平板 灭菌灭菌 称量称量 (2)纯化大肠杆菌的方法:纯化大肠杆菌的方法:常用的微生物接种方法有常用的微生物接种方法有 和和 。平板划线法:是通过平板划线法:是通过 在琼脂固体培养基表在琼脂固体培养基表面面 操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。面。稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的稀释涂布平板
3、法:是将菌液进行一系列的 ,然后将不同稀释度的菌液分别然后将不同稀释度的菌液分别 到琼脂固体培养基的表面。到琼脂固体培养基的表面。平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法接种环接种环连续划线连续划线梯度稀释梯度稀释涂布涂布1微生物的营养微生物的营养营养要素营养要素来源来源功能功能碳碳源源无机无机碳源碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物等含碳无机物构成细胞中的物质和一些代谢构成细胞中的物质和一些代谢产物;产物;有机碳源既是碳源又是能源有机碳源既是碳源又是能源有机有机碳源碳源糖类、脂质、蛋白质、有糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等机酸、石油、花生粉饼等氮氮源源无机无机
4、氮源氮源无机氮:无机氮:NH3、铵盐、硝、铵盐、硝酸盐、酸盐、N2等等将无机氮合成含氮的代谢产物将无机氮合成含氮的代谢产物有机有机氮源氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸尿素、氨基酸合成蛋白质、核酸及含氮的代谢合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物产物生长因子生长因子维生素、氨基酸、碱基维生素、氨基酸、碱基酶和核酸的组成成分;酶和核酸的组成成分;参与参与代谢过程中的酶促反应代谢过程中的酶促反应2.培养基的类型及作用培养基的类型及作用划分标准划分标准培养基种类培养基种类特点特点用途用途物理性质物理性质液体培养基液体培养基不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产半固体培养半固体培养基
5、基加凝固剂,加凝固剂,如琼脂如琼脂观察微生物的运动、分类鉴定观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种藏菌种用途用途选择培养基选择培养基允许特定种类的允许特定种类的微生物生长,同微生物生长,同时抑制或阻止其时抑制或阻止其他微生物生长他微生物生长培养、分离出特定微生物,如培养培养、分离出特定微生物,如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐在培养基中加入高浓度食盐鉴别培养基鉴别培养基根据微生物的代根据微生物的代谢特点,在
6、培养谢特点,在培养基中加入某种指基中加入某种指示剂或化学药品示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物,如用伊红鉴别不同种类的微生物,如用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽深紫色,并带有金属光泽)3.消毒与灭菌消毒与灭菌(1)消毒和灭菌的区别消毒和灭菌的区别条件条件结果结果常用的方法常用的方法消消毒毒较为温和的较为温和的物理或化学物理或化学方法方法仅杀死物体表面或仅杀死物体表面或内部一部分对人体内部一部分对人体有害的微生物有害的微生物(不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴煮沸消毒法、巴
7、氏消毒法、紫外氏消毒法、紫外线或化学药物消线或化学药物消毒法毒法灭灭菌菌强烈的理化强烈的理化因素因素杀死物体内外所有杀死物体内外所有的微生物,包括芽的微生物,包括芽孢和孢子孢和孢子灼烧灭菌、干热灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌灭菌 用酒精消毒时,用酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好,原因的酒精杀菌效果最好,原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。(2)无菌技术主要操作要求无菌技术主要操作要求实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器
8、具和培实验前应对操作空间、操作人员消毒,对所用器具和培养基灭菌。养基灭菌。实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作,另外要避免已灭菌处理材料再次污染。免已灭菌处理材料再次污染。解析:解析:灭菌是指杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和灭菌是指杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生孢子,而消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)。答案:答案:B2下列常用的无菌操作中错误的是下列常用的无菌操作中错误的是()A无菌操作的目的是防止杂菌污染无菌操作的目的是防止杂
9、菌污染B用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒C实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D玻璃器皿玻璃器皿(吸管、培养皿吸管、培养皿)可用酒精擦拭可用酒精擦拭解析:解析:对操作者应用较温和的方法进行消毒。实验操作过对操作者应用较温和的方法进行消毒。实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行,防止瓶口的微生物污染培养基。程应在酒精灯火焰附近进行,防止瓶口的微生物污染培养基。对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物,用酒精擦拭不能达到目的。的微生物,用酒精擦拭不能达到目
10、的。答案:答案:D知识点二:土壤中分离尿素的细菌的分离与计数知识点二:土壤中分离尿素的细菌的分离与计数1土壤中分解尿素的细菌的分离和计数土壤中分解尿素的细菌的分离和计数判断正误判断正误(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。( )(2)筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一碳筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一碳源。源。 ( )(3)统计样品中的活菌一般用平板划线法。统计样品中的活菌一般用平板划线法。 ( )(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则说明筛选到分解尿素的细
11、菌。示剂变蓝,则说明筛选到分解尿素的细菌。( )复合酶复合酶 C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶 纤维二糖纤维二糖 (2)筛选方法筛选方法方法:方法: 染色法,即通过是否产生染色法,即通过是否产生 来来筛选纤维素分解菌。筛选纤维素分解菌。培养基:以培养基:以 为唯一碳源的选择培养基。为唯一碳源的选择培养基。刚果红刚果红透明圈透明圈纤维素纤维素(3)实验流程实验流程土壤取样:富含土壤取样:富含 的环境的环境选择培养:用选择培养:用 培养,以增加纤维素分解菌培养,以增加纤维素分解菌的数量的数量梯度稀释梯度稀释纤维素纤维素选择培养基选择培养基涂布平板:将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
12、涂布平板:将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落:产生挑选产生透明圈的菌落:产生 的菌落周围出的菌落周围出现透明圈现透明圈纤维素酶纤维素酶1微生物的纯化培养一平板划线法与稀释涂布平板法微生物的纯化培养一平板划线法与稀释涂布平板法方法方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法注意注意事项事项(1)接种环的灼烧:接种环的灼烧:第一次划线前:杀死接种环上的第一次划线前:杀死接种环上的微生物,避免污染培养物微生物,避免污染培养物每次划线前:杀死残留菌种,保每次划线前:杀死残留菌种,保证每次划线菌种来自上次划线末端证每次划线菌种来自上次划线末端划线结束后:杀死残留菌种,避划
13、线结束后:杀死残留菌种,避免污染环境和感染操作者免污染环境和感染操作者(2)灼烧接种环之后,要冷却后再进灼烧接种环之后,要冷却后再进行操作,以免温度太高杀死菌种行操作,以免温度太高杀死菌种(3)划线时最后一区域不要与第一区划线时最后一区域不要与第一区域相连域相连(4)划线用力要大小适当,防止用力划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破过大将培养基划破(1)稀释操作时:每支试管及其中的稀释操作时:每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌;操作水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰时,试管口和移液管应在离火焰12 cm处处(2)涂布平板时:涂布平板时:涂布器用体积分数为涂布
14、器用体积分数为70%酒精消酒精消毒,取出时,让多余酒精在烧杯中毒,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃器在酒精灯火焰上引燃不要将过热的涂布器放在盛放酒不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精精的烧杯中,以免引燃其中的酒精酒精灯与培养皿距离要合适,移酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体液管管头不要接触任何物体2.统计菌落数目的方法统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法显微镜直接计数法原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积
15、的样品中微生物的数量。下计算一定容积的样品中微生物的数量。方法:用计数板计数。方法:用计数板计数。缺点:不能区分死菌与活菌。缺点:不能区分死菌与活菌。(2)间接计数法间接计数法(活菌计数法活菌计数法)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌。菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌。操作操作a设置重复组,增强实验的说服力与准确性。设置重复组,增强实验的说服力与准确性。b为了保证结果准确,一般选择菌
16、落数在为了保证结果准确,一般选择菌落数在30300的平板的平板进行计数。进行计数。3两种刚果红染色法的比较两种刚果红染色法的比较优点优点显示出的颜色反应显示出的颜色反应基本上是纤维素分基本上是纤维素分解菌的作用解菌的作用操作简便,不存在菌落混杂问操作简便,不存在菌落混杂问题题缺点缺点操作繁琐,加入刚操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落果红溶液会使菌落之间发生混杂之间发生混杂(1)由于在纤维素粉、琼脂和土由于在纤维素粉、琼脂和土豆汁中都含有淀粉类物质,可豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应;出现假阳性反应;(2)有些微生有些微生物具有降解色素的
17、能力,长时物具有降解色素的能力,长时间培养会降解刚果红,从而形间培养会降解刚果红,从而形成明显的透明圈,这些微生物成明显的透明圈,这些微生物与纤维素分解菌不易区分与纤维素分解菌不易区分(1)选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度,选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度,确保能够从样品中分离到所需要的微生物。确保能够从样品中分离到所需要的微生物。(2)涉及到的微生物技术主要有:培养基的配制、无菌操作涉及到的微生物技术主要有:培养基的配制、无菌操作技术、稀释涂布平板法、选择培养基的作用、土壤取样等。技术、稀释涂布平板法、选择培养基的作用、土壤取样等。3可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是可以鉴定出分解
18、尿素的细菌的方法是 ()A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析:解析:在以尿素为唯一氮源的培养基中,不能分解尿素获在以尿素为唯一氮源的培养基中,不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长,而分解尿素的细菌能利用尿素作氮得氮源的细菌不能生长,而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源,将尿素分解为氨,使源,将尿素分解为氨,使pH
19、升高。若培养基中加入酚红指示升高。若培养基中加入酚红指示剂,指示剂将变红。此培养基既属于选择培养基,又属于鉴别剂,指示剂将变红。此培养基既属于选择培养基,又属于鉴别培养基。培养基。答案:答案:A4.如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下。下列操作方法正确的是列操作方法正确的是()A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B划线操作须在火焰上进行划线操作须在火焰上进行C在在5区域中才可以得到所需菌落区域中才可以得到所需菌落D在在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌区域中划线前后都要对接种环灭菌解析:解析:本题
20、考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边进行。在种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中,只要有单个活细个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。菌,通过培养即可获得所需菌落。答案:答案:D (2012北京高考北京高考)高中生物学实验中,在接种时不进行高中生物学实验中,在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中将少许干酵母加入到新
21、鲜的葡萄汁中B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上解析:解析:生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高,接种不生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高,接种不需要进行严格的无菌操作;土壤浸出液中含有多种杂菌,所以需要进行严格的无菌操作;土壤浸出液中含有多种杂菌,所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时,不进行严格利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时,不进行严格无菌操作也不会影响实验结果;植物组织培养技术成功的关键无菌
22、操作也不会影响实验结果;植物组织培养技术成功的关键是无菌条件,若接种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失是无菌条件,若接种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失败,故败,故C项符合题意。项符合题意。答案:答案:C (1)高温加热灭菌,其原理就是使细菌体内蛋白高温加热灭菌,其原理就是使细菌体内蛋白质变性,而达到杀灭细菌的作用。质变性,而达到杀灭细菌的作用。(2)化学药剂的灭菌消毒方法,其作用原理是使细菌体内蛋化学药剂的灭菌消毒方法,其作用原理是使细菌体内蛋白质变性,但是化学物质很难透过孢子或芽孢的坚硬外层进入白质变性,但是化学物质很难透过孢子或芽孢的坚硬外层进入细胞内,因此化学方法难以消灭孢子和芽
23、孢。细胞内,因此化学方法难以消灭孢子和芽孢。(3)培养基的制作是否合格的验证:如果未接种的培养基在培养基的制作是否合格的验证:如果未接种的培养基在恒温箱中保温恒温箱中保温12天后无菌落生长,说明培养基的制备是成功天后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。的,否则需要重新制备。(4)平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的温度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更的温度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发;又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。好地挥发;又可以防止皿盖上的水珠落入培养基
24、,造成污染。(5)菌种的保藏菌种的保藏短期保存:固体斜面培养基上短期保存:固体斜面培养基上4保存,菌种易被污染或保存,菌种易被污染或产生变异。产生变异。长期保存:长期保存:20甘油管在冷冻箱中保藏。甘油管在冷冻箱中保藏。请回答:请回答:(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有含有_,它能以尿素作为氮源;若有,它能以尿素作为氮源;若有Hp,则菌落周,则菌落周围会出现围会出现_色环带。色环带。(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_灭灭菌。菌。A高压蒸汽高压蒸汽B紫外灯照射紫外灯照射C70%酒
25、精浸泡酒精浸泡 D过滤过滤(3)步骤步骤X表示表示_。在无菌条件下操作时,先将菌。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液液稀释,然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得目的是为了获得_菌落。菌落。(4)在培养时,需将培养皿倒置并放在在培养时,需将培养皿倒置并放在_中。若不中。若不倒置培养,将导致倒置培养,将导致_。(5)临床上用临床上用14C呼气试验检测人体是否感染呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原,其基本原理是理是Hp能将能将14C标记的标记的_分解为分解为NH3和和14CO。 解析:解析:(1)幽门螺杆菌幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶,能以尿素为
26、氮源,在含有脲酶,能以尿素为氮源,在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp,由于尿素经脲酶的,由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的降解可产生碱性的NH3,NH3能使培养基中的酚红由红黄色变成能使培养基中的酚红由红黄色变成红色,故菌落周围会出现红色环带。红色,故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿素加热会分解,由于尿素加热会分解,对尿素溶液进行灭菌最好用对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃砂漏斗过滤。玻璃砂漏斗过滤。(3)微生物的分微生物的分离和培养步骤是:配制培养基离和培养步骤是:配制培养基灭菌、倒平板灭菌、倒平板接种接种培养。培养。为获得单菌落,接种操作前应先将菌液
27、稀释,然后将菌液涂布为获得单菌落,接种操作前应先将菌液稀释,然后将菌液涂布到培养基平面上即可。到培养基平面上即可。 (4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中,若微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中,若不倒置培养,则无法形成单菌落。不倒置培养,则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌能将幽门螺杆菌能将14C标记的标记的尿素分解为尿素分解为NH3和和14CO2,故临床上常用,故临床上常用14C呼气试验检测人体内呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。幽门螺杆菌的存在。答案:答案:(1)脲酶红脲酶红(2)D(3)接种涂布单接种涂布单(4)恒温培养箱无法形成单菌落恒温培养箱无法形成单菌落(5)
28、尿素尿素选择培养基及应用实例选择培养基及应用实例(1)选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,以抑制不选择培养基:在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进需要的微生物的生长,目的是从众需要的微生物的生长,促进需要的微生物的生长,目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。多微生物中分离所需要的微生物。(2)选择培养基应用实例选择培养基应用实例培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。培养基中缺乏氮源时,可以分离固氮微生物,因为非固培养基中缺乏氮源
29、时,可以分离固氮微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生离效果。如石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生的,如将
30、培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。物。 1(2012山东基本能力测试山东基本能力测试)除了高温加热以外,其它灭菌除了高温加热以外,其它灭菌方法还有方法还有()A紫外线照射紫外线照射B真空包装真空包装C用保鲜膜密闭用保鲜膜密闭 D添加防腐剂添加防腐剂解析:解析:灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物生物(包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)。本题中真空包装、添加防腐剂、用保鲜。本题中真空包装、添加防腐剂、用保鲜膜密闭都起到了抑菌作用,紫外线照射使细菌的蛋白质变性,膜密闭都起到了抑菌作用,紫外线照射使细菌的蛋白质变性,核酸受破坏,是灭菌
31、方法。核酸受破坏,是灭菌方法。答案:答案:A2(2011重庆高考重庆高考)下列有关细菌培养的叙述,正确的是下列有关细菌培养的叙述,正确的是()A在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析:解析:单个菌落中只含有一种细菌;青霉素能抑制细菌生单个菌落中只含有一种细菌;青霉素能抑制细菌
32、生长,而对真菌没有影响;破伤风杆菌是厌氧型细菌,通入氧气长,而对真菌没有影响;破伤风杆菌是厌氧型细菌,通入氧气会抑制其生长。会抑制其生长。答案:答案:D3(2012上海高考上海高考)回答下列关于微生物和酶的问题。回答下列关于微生物和酶的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。图所示。(1)过程称为过程称为_,过程是为了过程是为了_。(2)I号培养基称为号培养基称为_(按功能分按功能分);该培养基中除了加;该培养基中
33、除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分_。A琼脂琼脂B葡萄糖葡萄糖C硝酸铵硝酸铵D碳酸氢钠碳酸氢钠(3)一般对配制的培养基采用高压灭菌,其中一般对配制的培养基采用高压灭菌,其中“高压高压”是为是为了了_。在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。图中的曲线围进行测定。图中的曲线表示酶在各种温度下酶活性相对最表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此
34、得到的数据为酶在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图中的曲线的热稳定性数据,即图中的曲线。(4)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是_。A4050 B5060C6070 D7080(5)据图判断下列叙述错误的是据图判断下列叙述错误的是_。A该酶只能在最佳温度范围内测出活性该酶只能在最佳温度范围内测出活性B曲线曲线35数据点是在数据点是在80时测得的时测得的C曲线曲线表明表明80是该酶活性最高的温度是该酶活性最高的温度D曲线曲线表明该酶的热稳定性在表明该酶的热稳定性在70之后急剧下降之后急剧下降解析:解析:欲
35、培养和分离嗜热菌单个菌落可采用稀释涂布平板欲培养和分离嗜热菌单个菌落可采用稀释涂布平板法;法;为稀释过程,为稀释过程,为筛选过程;为筛选过程;I号培养基为选择培养基,号培养基为选择培养基,加入硝酸铵的目的主要是补充氮元素;高温灭菌的目的是杀死加入硝酸铵的目的主要是补充氮元素;高温灭菌的目的是杀死包括细菌芽孢等在内的全部生物;据图可知,工业生产中该酶包括细菌芽孢等在内的全部生物;据图可知,工业生产中该酶的最佳温度范围为的最佳温度范围为6070。答案:答案:(1)稀释单个菌落的筛选稀释单个菌落的筛选(或筛选或筛选)(2)选择培养基选择培养基C(3)杀死培养基中的细菌芽孢杀死培养基中的细菌芽孢(4)
36、C(5)A4(2011山东高考山东高考)研究发现柚皮精油和乳酸菌素研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子小分子蛋白质蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。(1)柚皮易焦糊,宜采用柚皮易焦糊,宜采用_法提取柚皮精油,该过法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过程得到的糊状液体可通过_除去其中的固体杂质。除去其中的固体杂质。(2)筛选乳酸菌筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或时可选用平板划线法或_接种。接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_。实验前需。实验前需对超净工作台进行对超净工作台进行_处理。处理。(3)培养基
37、中的尿素可为乳酸菌培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供生长提供_。电。电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其分子泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其分子量越大,电泳速度量越大,电泳速度_。(4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的_来比较柚来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。解析:解析:柚皮精油宜采用压榨法进行提取,要除去其中杂质柚皮精油宜采用压榨法进行提取,要除去其中杂质可采用过滤法。培养基中的尿素可为乳酸菌提供氮源。电泳法可采用过滤法。培养基中的尿素可为乳酸菌提供氮源
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