第十四章 色谱分析法导论

1、第十四章第十四章 色谱分析法导论色谱分析法导论 色谱法早在色谱法早在19061906年由俄国植物学家年由俄国植物学家茨维特茨维特分离植分离植物色素时采用的一种方法。物色素时采用的一种方法。14-1 色谱法概述色谱法概述一、色谱法概念一、色谱法概念 目前色谱法已广泛应用于许多领域，成为十分目前色谱法已广泛应用于许多领域，成为十分重要的重要的分离分析分离分析手段。手段。为何不同物质通过色谱柱即可分开？为何不同物质通过色谱柱即可分开？ 不管属于哪一类色谱法，其共同的基本不管属于哪一类色谱法，其共同的基本特点是具备两个相：不动的一相，称为特点是具备两个相：不动的一相，称为固固定相；定相；另一相是携带样

2、品流过固定相的流另一相是携带样品流过固定相的流动体，称为动体，称为流动相流动相。返回返回 当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的差固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞留滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。流出。二、二、 色谱法分类色谱法分类1. 按物理状态分类按物理状态分类气

3、相色谱气相色谱气固色谱（固定相为固体吸附剂）气固色谱（固定相为固体吸附剂）气液色谱（固定相为涂在固体担体上气液色谱（固定相为涂在固体担体上 或毛细管上的液体）或毛细管上的液体）液相色谱液相色谱液固色谱液固色谱液液色谱液液色谱超临界流体色谱超临界流体色谱2. 按分离机理分类按分离机理分类(1)吸附色谱：利用固体吸附剂对不同组分吸附性能的差别而吸附色谱：利用固体吸附剂对不同组分吸附性能的差别而 进行分离。进行分离。(2) 分配色谱：利用不同组分在流动相与固定相之间分配系数分配色谱：利用不同组分在流动相与固定相之间分配系数 的差别而进行分离。的差别而进行分离。(3) 离子交换色谱：利用不同的离子与离

4、子交换树脂交换能力离子交换色谱：利用不同的离子与离子交换树脂交换能力 的差异而进行分离。的差异而进行分离。(4) 凝胶色谱：利用凝胶（固定相）的孔隙对体积大小和形状凝胶色谱：利用凝胶（固定相）的孔隙对体积大小和形状 不同的分子的选择性排阻而进行分离。不同的分子的选择性排阻而进行分离。3. 按固定相使用的形式分类按固定相使用的形式分类（1）柱色谱）柱色谱填充柱色谱填充柱色谱 固定相填充在谱柱内；固定相填充在谱柱内；毛细管色谱毛细管色谱 固定液涂布在细长的毛细管壁上。固定液涂布在细长的毛细管壁上。（2）纸色谱）纸色谱（3）薄层色谱）薄层色谱将吸附剂粉末涂布在玻璃板上或塑料板上作为固定相，让将吸附剂

5、粉末涂布在玻璃板上或塑料板上作为固定相，让流动相通过毛细管现象或重力作用携带样品通过固定相进流动相通过毛细管现象或重力作用携带样品通过固定相进行分离。行分离。滤纸作固定相滤纸作固定相14-2 色谱法基本概念和术语色谱法基本概念和术语 是柱中仅有流动相通过时，检测器响应讯号的记录值，是柱中仅有流动相通过时，检测器响应讯号的记录值，即图即图18183 3中中OtOt线稳定的基线应该是线稳定的基线应该是一条水平直线一条水平直线 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以h表示，如图表示，如图183中中BA 3 3、峰高、峰高基线基线：当没有待测组分进入检测当没有待测组分进入

6、检测 器时，反映检测器噪音随器时，反映检测器噪音随 时间变化的曲线（稳定时间变化的曲线（稳定平平 直直线）直直线）噪音噪音：仪器本身所固有的，以噪音仪器本身所固有的，以噪音 带表示（仪器越好，噪音越小）带表示（仪器越好，噪音越小）漂移漂移：基线向某个方向稳定移动基线向某个方向稳定移动 （仪器未稳定造成）（仪器未稳定造成） (1) 标准偏差标准偏差 (2)半峰宽半峰宽1/2 （3)峰底宽度峰底宽度 Y = 4 1/2Y22ln22.35 死时间死时间tM 死体积死体积VM保留值保留值 保留时间保留时间tR 保留体积保留体积VR 调整保留时间调整保留时间tR 调整保留体积调整保留体积VRVM =

7、tMF0相对保留值相对保留值2.1 (选择因子） 某组份某组份2的调整保留值与组份的调整保留值与组份1的调整保留值的调整保留值之比，称为相对保留值：之比，称为相对保留值：注:（1）相对保留值绝对不是两个组份保留时间或保留 体积之比。 （ 2）相对保留值只与柱温及固定相的性质有关，而与柱径、柱长、填充情况及流动相流速无关。 （3）相对保留值用来表示固定相的选择性。1. 分配系数分配系数K 指在一定温度和压力下，组分在固定相和指在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值，即流动相之间分配达平衡时的浓度之比值，即 式中式中CS，Cm分别为组分在固定相和流动相的浓度分别为组分

8、在固定相和流动相的浓度 指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比。即平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比。即 sssmmmmCVmC V组分在固定相中物质的量组分在流动相中物质的量 式中，式中，Vm为柱中流动相的体积，近似等于死体积。为柱中流动相的体积，近似等于死体积。Vs为为柱中固定相的体积，在各种不同的类型的色谱中有不同的含柱中固定相的体积，在各种不同的类型的色谱中有不同的含义。例如：在分配色谱中，义。例如：在分配色谱中，Vs表示固定液的体积；在尺寸排表示固定液的体积；在尺寸排阻色谱中，则表示固定相的孔体积。阻

9、色谱中，则表示固定相的孔体积。 其中其中称为称为相比率相比率，它是反映各种色谱柱型特点的一个参数。，它是反映各种色谱柱型特点的一个参数。例如，对填充柱，其例如，对填充柱，其值一般为值一般为635；对毛细管柱，其；对毛细管柱，其值值为为60600。 如果两组分的如果两组分的K或或k值相等，即值相等，即=1，两个组，两个组分的色谱峰必将重合，说明分不开。两组分的分的色谱峰必将重合，说明分不开。两组分的K或或k值相差越大，则分离得越好。因此值相差越大，则分离得越好。因此两组分具两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。 色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离，

10、组分色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离，组分要达到完全分离，两峰间的距离必须足够远，要达到完全分离，两峰间的距离必须足够远，两峰间的两峰间的距离是由组分在两相间的分配系数决定的，即与色谱过距离是由组分在两相间的分配系数决定的，即与色谱过程的热力学性质有关。程的热力学性质有关。但是两峰间虽有一定距离，如果但是两峰间虽有一定距离，如果每个峰都很宽，以致彼此重叠，还是不能分开。每个峰都很宽，以致彼此重叠，还是不能分开。这些峰这些峰的宽或窄是由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，的宽或窄是由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，即与色谱过程的动力学性质有关。即与色谱过程的动力学性质有关。因此，要从热

11、力学和因此，要从热力学和动力学两方面来研究色谱行为。动力学两方面来研究色谱行为。 13-2 色谱法分析的基本理论色谱法分析的基本理论二、色谱分离的基本理论1、塔板理论 最早由最早由Martin等人提出塔板理论，把色谱柱比作一个等人提出塔板理论，把色谱柱比作一个精馏塔，沿用精馏塔中塔板的概念来描述组分在两相间的精馏塔，沿用精馏塔中塔板的概念来描述组分在两相间的分配行为，同时引入理论塔板数作为衡量柱效率的指标。分配行为，同时引入理论塔板数作为衡量柱效率的指标。 该理论假定： （i）在柱内一小段长度）在柱内一小段长度H内，组分可以在两相间迅速达到平衡。内，组分可以在两相间迅速达到平衡。这一小段柱长称

12、为理论塔板高度这一小段柱长称为理论塔板高度H。 （ii）以气相色谱为例，载气进入色谱柱不是连续进行的，而是）以气相色谱为例，载气进入色谱柱不是连续进行的，而是脉动式，每次进气为一个塔板体积（脉动式，每次进气为一个塔板体积（Vm）。）。 （iii）所有组分开始时存在于第）所有组分开始时存在于第0号塔板上，而且试样沿轴（纵）号塔板上，而且试样沿轴（纵）向扩散可忽略。向扩散可忽略。 （iv）分配系数在所有塔板上是常数。）分配系数在所有塔板上是常数。 为简单起见，设色谱往由为简单起见，设色谱往由5块塔板（块塔板（n5，n为柱子的塔板数）组为柱子的塔板数）组成，并以成，并以r表示塔板编号，表示塔板编号，

13、r=1，2，nl；某组分的分配比；某组分的分配比k=1. 设设 m=1.00 k=1 n=5 当当n50时，就可以得到对称的峰形曲线。在气相色谱中，时，就可以得到对称的峰形曲线。在气相色谱中，n值是很大的，约为值是很大的，约为103106，因而这时的流出曲线可趋近于正态，因而这时的流出曲线可趋近于正态分布曲线。分布曲线。式中式中c0为进样浓度，为进样浓度，tR为保留时间，为标准偏差，为保留时间，为标准偏差，c为时间为时间t时在时在柱出口的浓度。柱出口的浓度。而理论塔板高度（而理论塔板高度（H）即：）即： 从上两式可以看出，色谱峰越窄，从上两式可以看出，色谱峰越窄，n就越大，而就越大，而H就越小

14、，柱效能越高。因此，就越小，柱效能越高。因此，n和和H是描述柱效能是描述柱效能的指标。的指标。 通常填充色谱柱的通常填充色谱柱的n103，H1mm。而毛细。而毛细管柱管柱 n=105-106，H0.5mm 由于死时间由于死时间tm包括在包括在tR中，而实际的中，而实际的tm不参与柱不参与柱内分配，所计算的内分配，所计算的n值很大，值很大，H很小，但与实际柱效很小，但与实际柱效能相差甚远。所以，提出把能相差甚远。所以，提出把tm扣除，采用扣除，采用有效理论有效理论塔板数塔板数n有效有效和和有效塔板高有效塔板高H有效有效评价柱效能。评价柱效能。 221/ 25.54()16()RRttnYY有效L

15、Hn有 效有 效注意：注意：1. 同一色谱柱对不同物质的柱效能是不一样的，当用这些指标同一色谱柱对不同物质的柱效能是不一样的，当用这些指标表示柱效能时，必须说明这是对什么物质而言的；表示柱效能时，必须说明这是对什么物质而言的；2. n有效有效只是一定条件下柱分离能力发挥的程度的标志，不是用只是一定条件下柱分离能力发挥的程度的标志，不是用来判断实现分离可能性的依据。来判断实现分离可能性的依据。l例例1：在柱长为：在柱长为2m的的5%的阿皮松柱、柱温为的阿皮松柱、柱温为1000C，记，记录纸速度为录纸速度为2.0cm/min的色谱条件下，测定苯的保留时间的色谱条件下，测定苯的保留时间为为1.5mi

16、n，甲苯的保留时间为，甲苯的保留时间为2min，两者的半峰宽均为，两者的半峰宽均为0.20cm，求苯和甲苯的理论塔板数。，求苯和甲苯的理论塔板数。解：解：231.55.54()1.2 100.20 2.0n苯320001.71.2 10Hmm苯2325.54()2.2 100.20 2.0n甲苯320000 92.2 10Hmm苯. 例例2：在：在2m长的色谱柱上，测得某组分保留时间长的色谱柱上，测得某组分保留时间(tR)6.6min，峰，峰底宽底宽(Y)0.5min，死时间，死时间(tm)1.2min，柱出口用皂膜流量汁测得载，柱出口用皂膜流量汁测得载气体积流速气体积流速(Fc)40mL/m

17、in，固定相体积，固定相体积(Vs)2.1mL，求：求：(1)分配容量分配容量k (2)死体积死体积Vm (3)调整保留体积调整保留体积VR (4)分配系数分配系数K (5)有效塔板数有效塔板数n (6)有效塔板高度有效塔板高度H (提示：死体积即为流动相体积提示：死体积即为流动相体积)解：解：6.6 1.2/4.51.2Rmktt40 (6.6 1.2)216RcRVF tmL(/)4.5 (48/2.1)103msKkkVV226.6 1.216()16 ()18660.5RefftnY/2 1000/18661.07effeffHL nmm40 1.248mcmVF tmL1塔板理论的贡

18、献：塔板理论的贡献： 从热力学角度解释了色谱流出曲线的形状和浓度极大点从热力学角度解释了色谱流出曲线的形状和浓度极大点 的位置；的位置； 阐明了保留值与阐明了保留值与K的关系；的关系； 提出了评价柱效高低的提出了评价柱效高低的n和和H的计算式。的计算式。在比较相似柱的柱效时有用在比较相似柱的柱效时有用须在给定条件，指定组分测定时才有意义须在给定条件，指定组分测定时才有意义1 2Rtn，Y（人为定义）2 3. 存在问题存在问题:1）做出了四个与实际不相符的假设 忽略了组分在两相中传质和扩散的动力学过程2）只定性给出塔板高度的概念，却无法解释板高的 影响因素3）排除了一个重要参数流动相的线速度u，

19、 因而无法解释柱效与流速关系 更无法提出降低板高的途径 某人制备了一根填充柱，用组分某人制备了一根填充柱，用组分A和和B为测试样品，测得为测试样品，测得该柱理论塔板数为该柱理论塔板数为4500，因而推断，因而推断A和和B在该柱上一定能得到在该柱上一定能得到很好的分离，该推断正确吗？为什么？很好的分离，该推断正确吗？为什么？答：不正确。理论塔板数是柱效能的一个指标，不能作为能答：不正确。理论塔板数是柱效能的一个指标，不能作为能否分离的判断依据，判断能否得到分离主要是看两组分的分否分离的判断依据，判断能否得到分离主要是看两组分的分配系数或选择因子配系数或选择因子，如果两组分的分配系数，如果两组分的

20、分配系数K相等或选择因相等或选择因子子 =1，在此色谱柱上两组分肯定不能分离。，在此色谱柱上两组分肯定不能分离。2 2、速率理论、速率理论吸收了塔板理论的有效成果吸收了塔板理论的有效成果H H，并从动力学角度较好地解释了影响柱效的因素并从动力学角度较好地解释了影响柱效的因素uCuBAH/在一个3m长的色谱柱上，分离一个样品结果为tM=1min，tR1=14min，tR2=17min，W2=1min。计算：（1）两个组分的调整保留时间tR1及tR2（2）用组分2计算色谱柱的有效塔板板数neff及有效塔板高度Heff；（3）两组分的容量因子k1及k2；（4）它们的分配系数比。产生原因：产生原因：载

21、气携样品进柱，遇到来自固定相颗粒的阻力载气携样品进柱，遇到来自固定相颗粒的阻力路径不同路径不同涡流扩散涡流扩散 next影响因素：影响因素：固体颗粒越小，填充越实，A项越小 dpA2填充不规则因子填充颗粒直径dpdpA 柱效，nHAdp柱效，nHAdp注：注：颗粒太小，柱压过高且不易填充均匀,一般为60100目。 next涡流扩散系数空心毛细管柱（空心毛细管柱（0.10.5mm），），A=？back产生原因：产生原因： 峰在固定相中被流动相推动向前、展开峰在固定相中被流动相推动向前、展开两边两边浓度差浓度差 next影响因素：影响因素： 2mBD1弯曲因子（）11填充柱空心毛细管柱gD 组分在

22、流动相中的扩散系数（常数）RmB utBD， gRDMTtu）（或柱效，nHuB/纵向扩散系数mmTTDDM或nextbackC=Cg+Cla 对气相传质阻力系数对气相传质阻力系数Cg气相传质阻力系数气相传质阻力系数Cg: 组分从气相扩散到固定相表面的传质组分从气相扩散到固定相表面的传质过程中所受到的阻力称为气动相传质阻力。过程中所受到的阻力称为气动相传质阻力。k：容量因子；：容量因子；dp：固定相颗粒平均直径；：固定相颗粒平均直径；Dg：组分在载气中的扩散系数。：组分在载气中的扩散系数。液相传质阻力系数液相传质阻力系数Cl:组分从两相界面扩散到固定液内部，达组分从两相界面扩散到固定液内部，达

23、到分配平衡后又返回两相界面时受到的阻力，称为液相传质到分配平衡后又返回两相界面时受到的阻力，称为液相传质阻力。阻力。k：分配比；：分配比；df：平均液膜厚度；：平均液膜厚度；Ds：组分在固定相中的扩散系数。：组分在固定相中的扩散系数。b 对液相传质阻力系数对液相传质阻力系数Cl综上所述，综上所述，van Deemter方程式可表达为：方程式可表达为：22222220.012(1)3(1)gpfpglDdkdkHduukDkDBHACuu20dHBCduu uC最佳B=2HABC最小 在实际工作中，为了缩短分析时间，往往使流速在实际工作中，为了缩短分析时间，往往使流速稍高于最佳流速。稍高于最佳流

24、速。改善柱效率的因素有如下几点：改善柱效率的因素有如下几点：(1)选择颗粒较小的均匀填料。选择颗粒较小的均匀填料。(2)在固定液保持适当粘度的前提下，选用较低的柱温操作。在固定液保持适当粘度的前提下，选用较低的柱温操作。(3)用最低实际浓度的固定液，降低担体表面液层的厚度。用最低实际浓度的固定液，降低担体表面液层的厚度。(4)选用合适的载气：流速较小时，分子扩散项成为色谱峰扩选用合适的载气：流速较小时，分子扩散项成为色谱峰扩张的主要因素，宜用相对分子质量较大的载气；流速较大时，张的主要因素，宜用相对分子质量较大的载气；流速较大时，传质项为控制因素，宜用相对分子质量较小的载气。传质项为控制因素，

25、宜用相对分子质量较小的载气。(5)选择最合适的载气流速。选择最合适的载气流速。 思考：改善柱效率途径有哪些？思考：改善柱效率途径有哪些？例例1： 载体粒度由载体粒度由60目改变为目改变为100目，若其他条件不变，目，若其他条件不变，H-u曲线如何变化？为什么？曲线如何变化？为什么？ 答：范氏方程给出了塔板高度与各种因素如填料粒度、扩散系数、固定相液膜厚度、填充均匀性、流动相流速以及分配比之间的关系。在其他条件不变的情况下，填料粒度由大变小时，涡流扩散项因子变小，纵向扩散项因子基本不变，流动相传质阻力项因子减小，当固定液含量不变时，当粒度减小，表面积增大，液膜厚度减小，固定相传质阻力因子减小，即

26、A和C减小，而B基本不变，因此有 可知，最小塔板高度减小，而 即最佳流速却是增加，同时在高流速区，由于C的减小，曲线的斜率降低。因此，当填充粒度由大变小时，H-u曲线向右下方移动，同时在高流速区，曲线斜率降低。 例例2 2：有一根气液色谱柱柱长为：有一根气液色谱柱柱长为2 2米，用米，用HeHe作为载气，以三种作为载气，以三种不同的流速进行测试，所得结果如下：不同的流速进行测试，所得结果如下：编号编号空气空气tRtR（s s）正十八烷正十八烷tR(stR(s) )正十八烷峰底正十八烷峰底宽宽WbWb（s s）1 118.218.2202020202232232 28.08.0888888999

27、93 35.05.05585586868计算：（计算：（1 1）三次不同流速时的载气线速度（以单位）三次不同流速时的载气线速度（以单位cm/scm/s表示）表示） （2 2）三次不同时的理论塔板数）三次不同时的理论塔板数n n和理论塔板高度和理论塔板高度H H； （3 3）解联方程式求出速率方程中的）解联方程式求出速率方程中的A A，B B，C C三个常数的值；三个常数的值； （4 4）载气的最佳流速；）载气的最佳流速；解：解： （1 1）由公式）由公式RLut可得：可得：120011.018.2u 220025.08.0u 320040.05.0u 216()RbtnWLHn（2 2）由公式

28、）由公式 和和 可得：可得：21202016()1313223n 12000.1523()1313Hcm2288816()128799n 22000.1554()1287Hcm2355816()107768n 32000.1857()1077Hcm（3 3）由范氏方程）由范氏方程 BHACuu可得：可得：A=0.0605 B=0.68 C=0.00270.6815.87(/ )0.0027Bucm sC最佳（4） 分离效果差，柱效低，选择分离效果差，柱效低，选择性（性（ ）低）低 完全分离，柱效高，峰窄，完全分离，柱效高，峰窄，选择性（选择性（ ）低）低 ；完全分离，选择性（完全分离，选择性（

29、 ）增加，柱效低，峰宽增加，柱效低，峰宽完全分离，柱效高，选择性完全分离，柱效高，选择性（ ）好）好例例3：说明：说明 、 、 、 三张图色谱柱的选择性及柱效各三张图色谱柱的选择性及柱效各如何？如何？ 1. 分离度和影响分离的因素分离度和影响分离的因素 ,2,1121()2RRttRYY 分离度分离度R定义为两相邻组分保留时间之差与两峰底宽定义为两相邻组分保留时间之差与两峰底宽度和之半的比值：度和之半的比值： 分离度分离度R综合反映了色谱柱的选择性与柱效能的影响，综合反映了色谱柱的选择性与柱效能的影响，是色谱柱总分离效能指标。是色谱柱总分离效能指标。 一、分离度一、分离度2-3 色谱分离条件的

30、选择色谱分离条件的选择 R1时，分离程度为时，分离程度为98.7；R1.5时，分离程度可达时，分离程度可达99.7。一般用。一般用R1.5作为完全分开的标志。作为完全分开的标志。 若两组分分离效果较差，两色谱峰的峰底将相互重叠，若两组分分离效果较差，两色谱峰的峰底将相互重叠，测量两色谱峰各自的峰底宽不容易，这时可用半峰宽代替峰测量两色谱峰各自的峰底宽不容易，这时可用半峰宽代替峰底宽底宽(Y)计算分离度。计算分离度。 此式可以改写成 ：表明R随体系的热力学性质( 和k）的改变而变化，也与色谱柱条件（n改变）有关。 为了说明理论塔板数n、分配比k怎样影响到分离度的大小，在合理假设（Y1=Y2=Y，

31、k1=k2=k)下，色谱分离基本方程式将理论塔板数n、分配比k、相对保留值和分离度R及联系起来：2. 色谱分离基本方程式色谱分离基本方程式1141kRnk用有效塔板板数表示的色谱分离基本方程式为：此外，还可得到n和neff的关系式为：2111222()RnLRnL已知物质已知物质A和和B在一根在一根30.00cm长的柱上的保留时间分别为长的柱上的保留时间分别为16.40min和和17.63min.。不被保留的组分通过该柱的时间为。不被保留的组分通过该柱的时间为1.30min。峰底宽。峰底宽度分别为度分别为1.11min和和1.21min，计算：，计算： 柱的分离度；柱的分离度； 柱的平均塔板数

32、；柱的平均塔板数； 达到达到1.5分离度所需的柱长分离度所需的柱长解：解：211217.63 16.401.0611()(1.11 1.21)22RRTTRWW2211116.4016()16()3493 (1.11RTnW块）2222217.6316()16()3397 (1.21RTnW块）(34933397)/23445 (n 块）2121221)(LLnnRR由由2222111.5()30()601.06RLLcmR一、定性分析1. 1. 用已知纯物质对照用已知纯物质对照 这个方法基于在一定操作条件下，各组分的保这个方法基于在一定操作条件下，各组分的保留时间是一定值的原理。如果未知样品

33、较复杂，可留时间是一定值的原理。如果未知样品较复杂，可采用在未知混合物中加入已知物，通过未知物中哪采用在未知混合物中加入已知物，通过未知物中哪个峰增大，来确定未知物中成分。个峰增大，来确定未知物中成分。2. 2. 根据相对保留值定性根据相对保留值定性 保留指数又称保留指数又称Kovasts指数，是一种重现性较其他指数，是一种重现性较其他保留数据都好的定性参数，可根据所用固定相和柱温直保留数据都好的定性参数，可根据所用固定相和柱温直接与文献值对照，而不需标准样品。接与文献值对照，而不需标准样品。 1lglg() 1 0 0lg() lg() nxnnX iXCInXCXC3. 3. 根据保留指数

34、定性根据保留指数定性解解: 已知已知n=76.7750.174lg4.373lg0.174lg0.310lg7100 xI即乙酸正丁酯的保留指数为即乙酸正丁酯的保留指数为775.6。在与文献值对照时，一定要。在与文献值对照时，一定要重视文献值的实验条件，如固定液、柱温等。而且要用几个已知重视文献值的实验条件，如固定液、柱温等。而且要用几个已知组分进行验证。组分进行验证。 （1）与红外光谱、质谱等仪器等联用）与红外光谱、质谱等仪器等联用（2）与化学方法配合进行定性分析）与化学方法配合进行定性分析5. 5. 与其它方法相结合与其它方法相结合6. 6. 利用双柱或多柱定性利用双柱或多柱定性 气相色谱

35、定量分析是根据检测器对溶质产生气相色谱定量分析是根据检测器对溶质产生的响应信号与溶质的量成正比的原理，通过色谱的响应信号与溶质的量成正比的原理，通过色谱图上的面积或峰高，计算样品中溶质的含量。图上的面积或峰高，计算样品中溶质的含量。iiimf A二、定量分析 f fi i=m=mi i/A/Ai i 定量校正因子定义为：定量校正因子定义为：单位峰面积的组分的量。单位峰面积的组分的量。 但由于同一检测器对不同物质具有不同的响应值，但由于同一检测器对不同物质具有不同的响应值，即对不同物质，检测器的灵敏度不同，所以两个相等即对不同物质，检测器的灵敏度不同，所以两个相等量的物质得不出相等峰面积。或者说

36、，量的物质得不出相等峰面积。或者说，相同的峰面积相同的峰面积并不意味着相等物质的量并不意味着相等物质的量。1. 1. 绝对校正因子绝对校正因子 样样品中各组分的定量校正因子与标准物的定量品中各组分的定量校正因子与标准物的定量校正因子之比。用下式表示校正因子之比。用下式表示 ,isii ssisfAmffAm式中式中m和和A分别代表质量和面积，下标分别代表质量和面积，下标i和和s分别代表待测组分分别代表待测组分和标准物。一般来说，和标准物。一般来说，热导池热导池检测器标准物用检测器标准物用苯苯，火焰离子火焰离子检测器用检测器用正庚烷正庚烷。2. 2. 相对校正因子相对校正因子（1 1）归一化法）归一化法 归一化法是气相色谱中常用的一种定量归一化法是气相色谱中常用的一种定量方法。应用这种方法的