药物分析高效液相色谱实验学生常见问题分析及对策-2019年教育文档

1、药物分析高效液相色谱实验学生常见问题分析及对策药物分析实验是全国高等医药院校药学、化学专业实验教材之一,在培养学生具有创新水平的复合型人才中起到举足轻重的作用,是理论联系实际的重要环节1,2.通过本课程的学习,使学生重点掌握滴定法、分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC法等各种分析方法及实验技术的根本原理在药物分析中的实际应用,同时培养学生严谨的工作态度、良好的操作习惯,激发学生的求知欲望,挖掘学生的创新潜能,为从事药品生产与质量检验、新药研究开发、临床使用及监督治理过程中的分析检验等工作奠定坚实的根底.随着现代社会

2、与科学技术的开展,对各种复杂样品分离分析的要求越来越高,药品质量的分析检测模式发生了巨大变化,HPLCK术逐渐成为一个主流的分析方法2.HPLCfe储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几局部组成,适用于分析沸点高、不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物,具有别离效能高、分析速度快及应用范围广等特点.基于HPLC*的应用特点,本文结合笔者自身教学实践和科研,采用课堂跟踪调查的方法对本校学生在完成HPLC验中存在的经常性、普遍性问题进行信息采集、问题统计与分析.本文主要从以下几个方面进行阐述：一、液相色谱实验中学生常见问题1 .称量.样品的称量是HPLC分析前非常关键的一步.正确的称量,

3、对维护电子天平的计量性能和延长天平的使用寿命是至关重要的.在样品和标准品的称量之前,电子天平的量程选择非常重要.分析电子天平的量程通常有万分之一和十万分之一两种选择.通常,样品的称量选择万分之一的量程,而标准品的称量选择十万分之一.有的学生在标准品的称量时选择了万分之一的量程,称量的结果出现了偏差.在样品的称量时,有的学生选择十万分之一的量程,认为结果会更加准确,其实没有必要,由于样品的称量的量比拟大,到达克g级,万分之一量程足够保证结果的准确性.在称量时,有的学生未采用去皮法,导致结果出现偏差.在样品称量完成后,有的学生未及时清理称量盘、关上分析天平的门、切断电源、用天平罩盖好天平,影响仪器

4、的使用和精度.2 .样品和标准溶液的配置.在进行HPLO析前,待测样品和标准品溶液的制备是非常重要的一步.在对样品加溶液进行超声或稀释处理时,有的学生使用烧杯或量筒进行加液处理,忘记了HPLC是一个精密性要求高的实验,导致测定结果出现较大的偏差.在制备样品溶液时,有的学生忘记了对样品进行过滤或离心处理,很可能堵塞管路及色谱柱,影响仪器的使用和色谱柱寿命.3 .流动相的配置.为保证分析结果的准确性,在HPLC分析中应正确配置液相流动相.溶剂的试剂规格主要有化学纯、分析纯、色谱纯等几种级别.有的学生在试剂级别的选择上过于随意,选择分析纯、甚至选化学纯作为流动相,对色谱柱或HPLC仪器造成损害,影响

5、下次实验的使用.对一些含有缓冲盐的溶液,有的学生图省事,不进行过滤,导致仪器泵压升高,色谱柱和管路堵塞.对于流动相的水相,应选择超纯水新鲜配置,有些学生竟然选择用放置许久的蒸储水,导致基线较大波动,实验无法进行.4 .色谱柱的安装与平衡.在色谱柱安装时,未注意到色谱柱的安装方向,把色谱柱的进口端和出口端装反,极大减少色谱柱的寿命.在进行样品分析前,HPLCfe谱柱的平衡至关重要.有的学生未用流动相对分析色谱柱进行充分平衡,检测信号的基线波动过大,无法进行准确分析.5 .仪器色谱条件的设置及运行.在液相色谱条件设置时,流速、柱温、波长、进样量等参数是保证分析结果成功的关键.有的学生在实验时,往往

6、会遗漏一到二个关键参数.在参数设置后,有的学生比拟急,未等到仪器准备就绪状态,匆忙进样分析,导致操作失败.6 .实验数据的处理和记录.有的学生在HPLC际操作中对数据的记录和处理出现的问题较多,如对数据的含意及相互关系模糊不清,无视单位之间的换算、原始数据记录张冠李戴、数据的丧失、及未填写好仪器使用记录等过失.7 .实验报告的书写.在实验报告的书写过程中,样品和标品的前处理过程记录的过于简单,含量结果的计算未有公式和过程,甚至遗漏单位.有的书写不标准,字迹过于潦草,漏掉签名等问题.甚至有些学生在撰写报告时,不是根据自己实验操作观察到的现象得出的结论,而是根据实验教材中的相关理论推导得出结论,违

7、背了实验的初衷.二、液相色谱实验中学生常见问题分析在HPLC验教学过程中,这些普遍问题由于局部学生课前对实验内容未预习,学生自主学习水平差,对教学目的不甚了解.有些学生过分重视药物分析理论课的学习,且实验课的占分比重较少,实验成绩的上下对最终药物分析课成绩的影响不大,学生未引起足够的重视.也有局部学生对HPLC验课缺乏兴趣,意识不到HPLC&整个药物分析领域占有及其重要的地位,HPLC验技能的上下是将来找工作成功的重要祛码.有些学生的动手能力不强,长期养成一种只看不做的习惯.HPLC验是分组操作,小组成员之间缺乏配合,各自为战,团队意识薄弱.有的学生责任心不强,做完相关实验,无视试剂、

8、仪器的整理,随意摆放,影响了其他学生的实验进度.有的学生粗心大意,造成玻璃仪器破损,药品和标样污染,甚至酿成事故.实验数据的处理和记录出现的问题主要在于理论根底不扎实,没有准确理解相关知识,对实验结果的处理过于随意,缺乏核对、验证、分析.实验记录书写混乱、用词缺乏准确性、不标准,当然与自己的语言表达能力也有关.当然,HPLC验易出现的问题与老师的教学方法也密切相关.有的老师教学方法死板,缺乏启发式、提问式的教学方式,无法充分调动学生的学习积极性.对HPLC色谱实验关键操作讲解不突出,不利于学生对知识的学习和掌握,缺乏对实验全程的有效监督和指导.三、液相色谱实验中教学改良建议首先,学生在HPLC

9、验课前,应充分预习,先熟悉色谱基本理论知识,例如别离度、理论踏板数、拖尾因子、外标法、面积归一化法等术语意义.理出本次实验的关键点,明确实验操作时应注意的事项,把不清楚的问题记下来,做到心中有数.当然,同学之间的相互交流也至关重要,可更好明确实验的目的和操作过程.在HPLC验中,老师要改良教学方法,丰富教学内容,充分调动学生的实验积极性.同时创造条件让每个学生尽可能地多动手,多参与整个实验过程.代课老师需要具有扎实的色谱理论知识,制定详细的实验内容方案,实验器材和药品放置在适合的位置,努力营造能培养学生动手水平的实验条件,打造一个规范化的HPLCt学实验室.老师也应开展专题讲座,做好演示操作,

10、每一步操作都必须认真检查,用正确、标准的操作去引领学生.特别对于HPLC验中易出现的问题,更应逐一剖析,加深学生的熟悉,尽可能防止下次犯同类错误.在本科生中,建立科研助理制度.利用学生的业余时间,鼓励学生参加教师的科研课题,跟随高年级本科生和研究生做实验,取得阶段性成果后,及时总结和表扬.进一步增强他们的观察思维水平和实验动手能力,提升学生的实验兴趣,培养学生的创新水平.理论联系实际,大大提升学生的实际操作水平,对HPLC验的促进大有裨益,同时为将来的就业做好充分的准备.在HPL以验教学中,应引入多媒体教学技术.在以前的实验教学中,老师主要依靠板书和讲解,对HPL3；验来说,学生会感到实验的枯燥和单调.多媒体动画的引入可增加学生的学习兴趣,激发求知欲和好奇心,便于学生把握实验的关键操作点.合理的实验考核机制影响学生的学习效果和教学质量反应,药物分析实验课的评分体系也应改进.传统的HPLC验教学考核往往依靠实验报告的评定,为一些不认真完成实验、甚至不做实验的学生提供了可乘之机.在药物分析HPLC验课考核体系中,应设置详细而具体的量化指标,如实际到课情况、动手操作水平、实验报告、笔试、团队意识等工程均应占一定比例,这样可有效端正学生的实验态度,让学生心中有数,认真进