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文档简介
1、重建系统发育树(PAUP的ML法和贝叶斯法)1 多重序列比对将待比对的序列以fasta格式保存,利用clustalx2.1或MEGA中的clustalW软件进行多序列比对2 保守区的选择将1得到的序列提交Gblock在线服务器(http:/www.phylogeny.fr/one_task.cgi?task_type=gblocks),得到保守区的序列.fasta,并通过MEGA软件将其转换为.nex;3 核苷酸替换饱和度检测用DAMBE 软件验证替换饱和只要比较ISS和ISS.c 值大小及显著与否,即可当ISS小于ISS.c 且p=0.0000(极显著),就说明没序列替换未饱和,可以建树4
2、核苷酸替换模型的选择在进行系统发育分析过程中,建树序列的进化模型选择是至关重要的一步,尤其对进化模型敏感的ML法和BI法通过MrMTgui 软件选择核酸替代模型4.1 安装PAUPModelTest (或MrModelTest) 软件,然后再安装MrMTgui 软件配置MrMTgui,分别设置PAUPModelTest和MrModelTest路径4.2 运行PAUP点击Run Paup,选择2中.nex文件当模型参数值计算完毕,程序会提示是否立即启动分析,选择“否”,先保存scores文件然后选择,运行MrModeltest,就得到模型数据了一种是基于hLRT标准
3、选择的模型,另一种是基于AIC标准选择的模型,一般选择AIC标准4.3添加模型参数,添加到建树的文件 .nex5 使用PAUP软件重建ML树(运行时间较长)将用AIC标准选择的模型参数直接拷贝到Nexus文件的最后参数设置:set criterion=likelihood 转化为似然法outgroup 1 2 .设定外类群bootstrap nreps=1000 keepall=yes brlens=yes 此命令设定循环次数为1000次(具体次数可根据实际情况自定),保存枝长describetrees 1/plot=both brlens=yes 此命令设定了描述树的方式,即phylogra
4、m和cladogram均显示,显示枝长最后用 savetrees from=1 to=1000 保存树 6 贝叶斯树6.1在Nexus文件的最后加入一个MrBayes block(MEGA输出Nexus格式文件不能被Mrbayes识别,因此要进行修改)格式修改前:格式修改后:6.2运行mrbayes.exe,在命令行界面中输入转换或者修改的Nexus文件,点击回车,最后生成 *.tre,即最终的BI树用Figtree 查看生成 .tre在运行1000代后都会显示 Average standard deviation of split frequencies注:当这个值 < 0.01 时,说明两次运行的结果差
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