植物生理综合实验答案

1、综合设计实验1矿质元素对植物的作用（红色的问题见后附照片）1、本次实验名称？分为哪两部分？诱导产生NR增强其活性2、NR有何特性？何谓诱导酶？NR为诱导酶，不供应硝酸根之前，不会产生。诱导酶3、针对上述特性实验中采取何措施？“真空渗入法”在步骤中何处体现？措施：提前一天用硝酸盐叶面喷施，增强活性体现：反应时，将三角瓶放在真空干燥器中，用真空泵抽气放气，直至叶片沉入瓶底4、实验中NO所起作用？诱导产生NR增强其活性5、何谓磺胺比色法？亚硝态氮在酸性溶液中与对氨基苯磺酸形成重氮盐，再与a-萘胺定量生成红色偶氮化合物，在520nm有最大吸收峰.6 NR活力以什么表示？步骤中何处有关键作用？用产生的亚

2、硝态氮的量表示。关键作用就是 21页的注意事项。7、标准曲线操作顺序如何？两人如何配合？制备标准溶液、制备显色液、绘制标准曲线。要默契地配和，一人在做实验 的同时，另一人要负责记录。8、为何标准溶液用NaNO容液不用NaNQ标准溶液浓度是多少？因为硝酸还原酶活性可由产生亚硝态氮的量表示，而不是用N03表示，所以用NaNO2表示。标准溶液浓度是1微克每毫升。9、标准溶液和谁在什么条件下显色多久？比色波长是多少？在硝酸还原酶活性的测定实验中，三角瓶 30度下置于黑暗处（恒温箱、水浴 锅等）保温30min，在520nm波长下比色；硝态氮含量测定实验中，常温下放置 20min,再加入8%Nao!溶液9

3、.5ml，摇匀冷却至室温，在 410nm波长下比色10、如何获得标准曲线或回归方程？通过使用标准溶液得到的实验数据，确立好横竖坐标运用电脑软件制作。11、取样应注意什么？第一、仪器不能混用，严格按照组别及标签按要求使用；第二、材料（叶片）要用湿纱布擦拭干净，用蒸馏水冲洗，滤纸（或干纱布）吸干。12、植物材料如何净化？采回来的材料（叶片）要用湿纱布擦拭干净，用蒸馏水冲洗，滤纸（或干纱 布）吸干。13、叶圆片如何获得，需要多少个叶圆片？14、如何确保叶片等重？为何要等重？每份重量是多少？15、两个三角瓶中为何一个加入 H0,另一个加KNQ16、三角瓶中为何放入PH7.5缓冲液？17、为何要用真空泵

4、抽气？使用中应注意什么？真空泵抽气影响N02的浸出量。 防止液态水进入泵腔18、抽气时有何现象发生？抽气到何时（何种程度）为止？（1）因为反复抽气放气，溶液可渗入叶组织取代叶片空气， 叶片便沉于溶液 底部，酶促反应可以相对完全的进行。（2）抽气到叶片沉淀19、抽气后三角瓶置于何处？什么条件？多长时间？显色反应在黑暗处（恒温箱、水浴锅等）进行 30分钟20、三角瓶取出后显色反应在何容器中进行？为何先加磺胺，后加苯胺？21、上述溶液显色反应时间多长？波长？空白？30min，520nm 空白组一样22、若三角瓶取出后显色反应不立刻进行，对实验结果有无影响？更高还是 更低？有影响，更高还是更低我也不知

5、道，我个人觉得更低23、请演算（板书）NR活性计算公式硝酸还原酶活性（卩g g-1 h-1） =（ N02-含量-N02-含量）X 10/W/X t24、NR活性计算公式中t为多少？公式中X 10是何用意？0.5h ;因取反应液的十分之一做后面实验，恩大概就这意思吧25、如何获得NO-、NO-含量？26、NO测定中，与其反应的物质为什么？试剂中酸的作用？27、该反应产物有无颜色？如何才能显色？应加入何物？28、该曲线操作为何与前述不同？区别在哪？比色波长为多少？29、实验材料如何处理？称重多少？处理：将材料用湿纱布擦拭干净，用蒸馏水冲洗，滤纸吸干。称取：酶活性测定称取0.3-0.5,硝态氮含量

6、测定准确称取2g30、用何试剂在何处多少摄氏度下提取？管口如何处理？酶活性测定：0.1mol/L,ph7.5磷酸缓冲液在30度水浴硝态氮含量测定：无机离子在沸水浴中处理，管口用玻璃泡封口31、提取结束为何要冷却？定容至多少？如何确保不损失？因为要在室温下进行实验，定容至25ml容量瓶，反复冲洗几次确保不损失332、取样品液多少？与何试剂(多少)反应？取样品液0.1ml,与5%水酸一硫酸溶液0.4ml反应，再与9.5ml8%氢氧化钠反应33、多长时间后加入多少8%NaO溶液？取样加入水酸_硫酸后，静止20分钟加入34、该测定空白为什么？波长为多少？进行对比，410波长35、请演算NO-N含量计算

7、公式。氮含量=C*V/W36、上述计算公式其中C, V, W分别代表什么？硝态氮含量(mg g-1FW) = (C x V)/WC为标准方程计算得NO3 N浓度(ug ml)V为提取样品液总量(ml);W为样品鲜重(g)。37、以上公式中C如何获得？C为标准方程计算得NO3 N浓度(ug ml)综合设计实验2植物利用光能的生理基础1、叶绿素在红光区和蓝光区都有吸收峰，能否用蓝光区的吸收峰波长进行叶绿素的定量分析？为什么?不能，因为叶绿素a和叶绿素b在百分之96乙醇中最大洗手峰的波长不同， 用分光光度计测定各种叶绿体色素的含量时，对分光光度计的波长精确度要求较 高，如果波长与原吸收峰波长相差1n

8、m则叶绿素a的测定误差为百分之二，叶 绿素b为百分之十九，因此，在使用前必须严格种植不同叶绿素的最大吸收峰波 长7。0。2、选择80%丙酮提取叶绿体色素时，叶绿素 a、叶绿素b和类胡萝卜素的 吸收峰值分别是多少纳米？663nm,645nm,470nm3、选择96%乙醇提取叶绿体色素时，叶绿素 a、叶绿素b和类胡萝卜素的 吸收峰值分别是多少纳米？665nm,649nm,470nm4、选择不同试剂提取叶绿体色素时，叶绿体色素计算公式有无不同？请板 书用96%乙醇提取时的三个公式。答案在26页实验结果处5、 提取干材料中叶绿体色素一定要用 96%乙醇（80%丙酮），而新鲜材料 可以用无水乙醇（无水丙

9、酮）提取，为什么？混合液浸提法提取叶绿体色素&叶绿体色素提取有那几种方法，实验教学中宜选用其中哪一种？为什 么？水浴提取法提取叶绿体色素。应选用水浴提取法提取叶绿体色素，因为研磨 法研磨过程中丙酮的挥发，研磨后转移匀浆时容易出现误差，而混合液浸提法需 要时间充足或样品太多7、叶绿体色素提取及测定为什么要在弱光下进行？该提取液含有哪几种色 素？01短。叶绿素和类胡萝卜素8、叶绿体色素定量分析应称取多少植物样品，由什么因素决定？0.20.5g由叶绿体色素提取方法决定，研磨法提取叶绿体色素样品为，混合液浸提法提取叶绿体色素样品为 ，水浴提取法提取 叶绿体色素样品为9、植物样品放入试管后需加入

10、 96%乙醇多少毫升，在何温度下水浴多长时 间？15ml然后放入7080摄氏度的水浴锅中浸提，直至叶片成黄白色10、定容前植物样品应达到何种程度？定容至多少毫升？研磨至组织变白。定容至25毫升11、提取时加入96%乙醇的量能否改变？提取时间及浸提次数作何调整？12、叶绿体色素定量分析为何不需制作标准曲线，比色时空白对照为何物？答：1. ？2 、如果提取液为80%酮，采用80%酮为空白。如果用96%勺乙醇提取， 则用96%的乙醇为空白13、用于叶绿体色素分离与定量分析所用的提取液相比较，谁的浓度更高？叶绿体色素分离所用的提取液浓度更高（叶绿色素提取液须用丙酮溶液适当稀释后才可作理化性质观察）14

11、、本实验中短时间如何制备分离所需色素溶液？用23g新鲜叶片，以80%5酮（或95%S醇）研磨提取过滤于三角瓶中备 用15、如何将叶绿体色素溶液涂抹至长滤纸条，用何工具？涂在哪一侧？用毛细管吸取浓的叶绿体色素提取液涂抹在滤纸条一侧长边16、分离过程中涂抹叶绿体色素的次数为多少次？每次均要确保什么？2030次，要确保涂抹均匀且要风干后涂，色素要多涂抹几次，风干会再涂 抹第二次，细、匀、直、滚。涂抹的色素要适量，量多易发生拖尾，量少色素带 看不清。17、长滤纸条风干后如何与圆形滤纸结合？应注意什么？长滤纸条风干后卷成纸捻插入圆形滤纸的小孔中，使之与圆形滤纸齐平。应 注意纸捻不能突出，圆形滤纸在中心打

12、的小圆孔，其周围必须整齐，否则分离的 色素不是一个同心圆18、上述物件应放入何处，其中盛有何种液体，它由哪几种有机物按照何 种比例配制？插有纸捻的圆形滤纸平放在康维皿上，其中盛有推动剂，按石油醚：丙酮：苯=10:2:1比例配制19、随着时间推移，圆形滤纸上会出现什么变化？何时应将圆形滤纸取出自 然风干？会出现被分离的各种色素同心圆环；当推动剂扩散至康维皿边沿时20、何谓分配系数，上述分离过程中流动相、固定相分别指什么？分配系数：在平衡状态下组分在固定相与流动相中的浓度之比；固定相：与长滤纸条结合的96聽醇；流动相：各叶绿体色素21、请板书chia与KOH反应方程式。叶绿素a+KOH 甲醇+皂化

13、叶绿素22、请叙述上述皂化反应过程，简单介绍操作过程。反应过程P23倒数第二段前两句（叶绿素是一种双羧酸（叶绿酸）与甲醇和 叶绿醇形成的复杂酯。在碱的作用下，发生皂化反应，生成醇（甲醇与叶绿醇） 和叶绿素的盐（皂化叶绿素）操作过程p27 5.皂化反应23、 上述反应发生后为何要先加入 3毫升苯再加入1毫升水？它们各自起 何作用？苯是有机溶剂，溶解类胡萝卜素和叶黄素，水溶解反应生成的盐（皂化叶绿 素）24、反应结束后上、下两层分别为何溶液，各自含有哪些物质？上层是笨溶液，溶有黄色的胡萝卜素和叶黄素；下层是稀的乙醇溶液，溶 有皂化叶绿素a和皂化叶绿素b25、何谓叶绿素荧光现象？如何观察叶绿素荧光现

14、象？叶绿素荧光现象产 生的原因是什么？叶绿素吸收光量子转变成激发态的叶绿素分子，很不稳定，当其回到基态时可发出荧光的现象 将浓的叶绿体色素提取液放在试管，在直射光下观察色素溶液在透射光下及反射 光下的颜色。原因：（1）对着光源观察叶绿素提取液时，看到的是叶绿素的吸收光谱。由于叶 绿素提取液吸收的绿光部分最少，故用肉眼观察到的为绿色透射光。（2）背光源观察叶绿素提取液时，看到的是叶绿素分子受激发后所产生的发射光谱。当叶绿素分子吸收光子后，就由最稳定的、能量最低的基态提高到一个不稳定的、高能量的激发态。由于激发态不稳定，因此发射光波 （此光波即为荧光），消失能量， 迅速由激发态回到基态。26、为什

15、么叶绿体色素提取液能观察到荧光现象而植株上的叶片看不到荧光？荧光现象：是指叶绿素在透射光下为绿色，而在反射光下为红色的现象，这 红光就是叶绿素受光激发后发射的荧光。叶绿素溶液的荧光可达吸收光的10%罕 右。而鲜叶的荧光程度较低，指占其吸收光的 0.11%左右。27、为什么叶绿素容易发生取代反应？在弱酸作用下，叶绿素分子中的镁被氢离子取代生成褐色的去镁叶绿素，后者遇乙酸铜则形成蓝绿色的铜代叶绿素。28、取代反应中加入30%醋酸后，由何种离子取代叶绿素中何物？ 加入醋酸后，氢离子取代镁离子，形成去镁叶绿素。29、取代反应中进一步加入醋酸铜粉末后，是何种离子取代之前那种离子？去镁叶绿素易与铜离子结合

16、，形成铜代叶绿素30、反应中加入醋酸铜粉末后需作何处理，加入醋酸铜粉末的量需不需要控制？微热，木习习坑曰：你说需要不需要呢它既然问了，必须控制啊，多了多 浪费综合设计实验3矿质元素对植物的作用1、脯氨酸在何条件下与何种物质生成稳定的红色缩合物？脯氨酸在酸性条件下与印三酮反应生成稳定的红色缩合物。00002、 上述红色缩合物为何要用甲苯萃取？比色波长是多少nm?因为在测定液中含有某些也能与印三酮发生反应的成分，这些成分的反应产 物也同样可以吸收520nm光，如果不用甲苯萃取，会导致 0D值偏高，用甲苯萃 取，这些成分的反应产物不溶于甲苯， 所以可以降低实验误差。并且甲苯对生成 稳定的红色缩合物可

17、以充分溶解3、脯氨酸标准溶液浓度为多少？用前稀释多少倍，浓度为多少？100ug每毫升，用前稀释10倍，为10ug每毫升。4、 标准曲线制作中各管加入冰乙酸、酸性茚三酮分别为多少ml ？分别为2ml和3ml5、上述显色液应在多少C水浴多长时间？如何处理后用甲苯萃取？100摄氏度40min，冷却6脯氨酸提取叶片重量如何确定？处理与对照需等重么？天平称取，不需要7、用何种试剂提取植物材料中脯氨酸？多少°C水浴多长时间？3%的磺酸水酸溶液，100摄氏度10mi n8、脯氨酸提取液有无颜色？如何令其显色？无，加茚三酮9、该显色剂如何配制，如何保证其充分显色？称取1.25g茚三酮溶于30mL冰乙

18、酸和20mL6M磷酸溶液中，搅拌加热（低 于70C）溶解，冷却后置棕色瓶中沸水浴加热40min10、脯氨酸含量计算公式 V和A分别为多少ml?V 为 5ml A 为 2ml11、可溶性糖在何条件下生成糠醛或羟甲基糠醛化合物？沸水浴12、 上述产物与何种物质作用形成蓝绿色络合物（糠醛衍生物）？在何波长比 色？蒽酮试剂 625nm13、葡萄糖标准液为何浓度？标准曲线制作过程稀释至何系列浓度?200 微克每毫升；0100微克每毫升14、 上述稀释后系列浓度葡萄糖标准液各取多少ml，与多少ml、何种物质反应 显色？一毫升；加5ml蒽酮试剂15、显色过程需要在多少C水浴多长时间？沸水；10mi n16、

19、为什么要将显色时间控制在一定围以？由于蒽酮与可溶性糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同 一时间比色17、可溶性糖提取液定容后为何要过滤？否则对反应有何不良影响？以防有残渣 不能准确测出可溶性糖的含量 因为细胞壁中的纤维素、半纤维 素等与蒽酮试剂发生反应。增加了测定误差。18、过滤后提取液1ml与5ml蒽酮试剂反应过程应注意哪些问题？由于蒽酮与可溶性糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同 一时间比色。烧杯保持干燥，充分搅拌缓慢加入 5ml浓硫酸 浓硫酸遇水会产生 大量的热19、蒽酮试剂如何配制、如何保存？100mg经过纯化的蒽酮溶于100ml硫酸溶液（76ml相对密度1.84的浓硫酸 加24ml水）贮藏在棕色瓶中20、可溶性糖含量计算结果为何单位？ug 每 ml21、应用蒽酮法测得的可溶性糖包括哪些？戊糖与已糖，所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等22、何谓电导率？为何逆境胁迫能使溶液电导率值增大？电导率是以数字表示的溶液传导电流的能力。植物组织受到逆境伤害时，由 于膜的功能受损或结构破坏透性增大， 细胞各种水溶性物质不同程度的外渗， 将 植物组织浸入无离子水中，水的电导率将因电解质的外渗而加大，伤害愈重，外渗愈多，电导率的增加也愈大（P55实验基本原理）23、电导率测定对水