过柱子日常经验大全

1、无意中找到这个感觉很不错。大家分享一下！ 转帖有机化学常见问题 关于过柱的实验方法和技巧 (注意：有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行！ 常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。 1、柱子可以分为：加压，常压，减压 压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更

2、多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。 2、关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好 柱子长了，相应的塔板数就高

3、。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。现在见到的柱子径高比一般在1：510，书中写硅胶量是样品量的3040倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.20.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱

4、子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。 3、关于无水无氧柱，适用于对氧，水敏感，易分解的产品 可以湿柱，也可以干柱。不过在样品之前至 少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解，毕竟要分离的是敏感的东东，小心不为过。也是因为分离的东西比较敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。至于是加压、常压、减压，随需而定。因为是schlenk操作，所以点板是个问题，如果样品是显色的，恭喜了，不用点板，直接看柱子上的色带就行了。如果

5、样品无色，只好准备几十个schlenk瓶，一瓶一瓶的点，不过几次之后就知道样品在哪，也就可以省些了。像我以前过一根无水无氧柱，需要六个schlenk，现在只一个就能把所要的全收集到。无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基裸露在外，很容易是样品分解，特别是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的，选择余地比较大，但是比硅胶要贵些。听说有个方法，就是用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了，没有验证过。哪位做过可以提出来大家参详参详。 4、关于湿法、干法上样 湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二氯甲

6、烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好，不然溶剂就成了淋洗剂了。很多样品在上柱前是粘乎乎的，一般没关系。可是有的上样后在硅胶上又会析出，这一般都是比较大量的样品才会出现，是因为硅胶对样品的吸附饱和，而样品本身又是比较好的固体才会发生，这就应该先重结晶，得到大部分的产品后再柱分，如果不能重结晶那就不管它了，直接过就是了，样品随着淋洗剂流动会溶解的。有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如DMF,DMSO等，会随着溶剂一起走，显色是一个很长的脱尾），这时就必须用干法上柱了。样品和硅胶的量有一种说法是1：1，我觉得是越少越好，但是要保证在旋干后，不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上）

7、。溶剂的选择。当然是最便宜，最安全，最环保的了。所以大多选用石油醚，乙酸乙酯。文献中有写用正己烷的，太贵了，除非特别需要不要用不然银子哗哗的，流的比淋洗剂还快，不过因为极性很小，有时还是非它不可。乙醚也可以用，但是就是容易睡觉，注意保持清醒别让溶剂流干了，那样柱子也就不爽了。二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和硅胶的吸附是一个放热过程，所以夏天的时候经常会在柱子里产生气泡，天气冷的时候会好一些。甲醇，据说能溶解部分的硅胶，所以产品如果想过元素分析的话要留神，应该经过后继处理，比如说重结晶等。其他的溶剂用的相对较少，要依 个人的不同需要选择了。由于某些原因，用到的淋洗剂多是大包装的（便宜嘛），我们

8、这里是用10升或25升的塑料桶装的，就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质，其他的杂质就可想而知了，所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料时就可以免去这一步了，反正下面还有提纯的方法。另外溶剂在过柱子后最好也回收使用，一方面环保，另一方面也能节省部分经费，缺点是要消耗一定的人工。这里要注意的是，一般在过柱同时进行的是减压旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由于挥发度的不同会导致极性的变化，一般会使得极性变大，在梯度淋洗时比较合适，正好极性越来越大了。在过完柱子后，溶剂最后回收要采用常压，因为在减压旋蒸时会有部分低沸点的杂质一起出来，常压时就会减少这种现象，如

9、果杂质和你下面要过的样品有反应那就惨了。 5、关于操作问题。 5.1 装柱。 柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响，一加压气泡就全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是开裂，甭管竖的还是横的，都会影响分离效果，甚至作废！ 5.2 加样。 用少量的溶剂溶样品加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时

10、，再加少量的低极性溶剂，然后再打开活塞，如此两三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂，一开始不要加压，等溶样品的溶剂和样品层有一段距离（24cm就够了），再加压，这样避免了溶剂（如二氯甲烷等）夹带样品快速下行。 5.3 淋洗剂的选择。 感觉上要使所需点在rf0.20.3左右的比较好。不要认为在板上爬高了分的比较开，过柱子就用那种极性，如果rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次爬板的状态，可以通过公式的比较：0.6/0.8一次的分离度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。 5.4 样品的收集。 用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。所以如

11、果样品与硅胶的吸附比较强的话，就不容易流出。这样就会发生，后面的点先出，而前面的点后出。这时可以采用氧化铝作固定相。另外，收集的试管大小要以样品量而定，特别是小量样品，如果用大试管，可能一根就收到了 三个样品，wuwu。如果都用小试管那工作量又太大。 5.5 最后的处理。 柱分后的产品，由于使用了大量的溶剂，其中的杂质也会累积到产品中，所以如果想送分析，最好用少量的溶剂洗涤一下，因为大部分的杂质是溶在溶剂里的，一洗基本就没了，必要时进行重结晶。另外，再过柱的时候，有时会出现气泡，一是和使用的溶剂有关，如果是易挥发的溶剂，如乙醚、二氯甲烷等，在室温稍高的情况下，很容易出现这种现象，因此，在室温高

12、的时候，可以选择沸点较高，挥发相对小的溶剂。还有，使用混合溶剂时，使用的两种溶剂的沸点应该相差不大，如：乙酸乙酯和石油醚(6090,而乙醚却要选择3060的石油醚。二是不论是用带砂板的还是塞棉花的，在装柱之前都要将空气用加压的方法将空气排干，这样就可避免柱中有空气！过柱子需要耐心，不要着急。 求助:萃取时严重乳化,求解决方法 我正在做一个产品,产物需用稀盐酸溶液提取有机溶剂中的产物,产物与HCL成盐后溶解在水相中，但在此过程中有时会产生严重的乳化现象，极难分液，共提取三次，不定在哪次产生乳化，求助：如何避免乳化？乳化后如何处理？谢谢。 常用方法： 1，长时间静置 2，加入少量电解质（如氯化钠）

13、破乳或增大水相比重使两相分离 3，若因溶液呈碱性，可加入少量酸，反之加碱 4，过滤 5，加入乙醇或磺化蓖麻油等破乳剂 有关氰化钠、氰化钾 我就要用大量的氰化钠、氰化钾了，好害怕。有人能给我点建议吗？如何防护？容器如何处理？ 硫酸亚铁可以用，但是生成的铁离子络合物遇见酸还是会有HCN生成，建议用次氯酸钠溶液浸泡或H2O2氧化！安全第一! 任何情况下不要在酸性条件下使用 做好劳动防护措施，手有伤口一定小心 如反应对水没有要求，可以用92的NaCN，含一定的水，呈湿粉状 后处理还是次氯酸钠好用一些 1. 解毒剂：亚硝酸异戊酯，口服或注射 分享5% Pd/C 催化剂的制备 将10%的硝酸和活性碳粉末混

14、合均匀，并在蒸汽浴上煮23 h，过滤，用水洗净硝酸后，于100110 烘干。称取11.5 g处理过的活性碳，悬浮在136.0 mL水中，水浴加热至80 ，加入溶有0.9 g氯化钯的2.3 mL浓盐酸与5.7 mL水的混合液，然后再加入37%甲醛溶液0.9 mL。搅拌下滴加30%的NaOH水溶液，直至反应液呈碱性，继续搅拌5 min。过滤，滤饼用水洗涤10次，然后将滤饼置于空气中晾干，即得5% Pd/C催化剂，再移至装有KOH的干燥器中贮存。 求助 胺类化合物的分离 我在做一个仲胺与取代叔胺反应生成叔胺的反应。后处理非常麻烦，TLC的条件是CHCl3:MeoH=10:1, 我用CHCl3:MeO

15、H=100:5, 100:3, 100:1(均含0.2 %Et3N过了三次柱了，还是没得到纯的产品。 反应混合物里面有四个点，产物是第三个点，和第二个点距离非常近。 有没有哪位仁兄有处理胺类化合物柱色谱分离的技巧？可否指点一二？ 提前致谢！ 我现在猜测产物叔胺可能也溶解于水，所以我用Chcl3提取的效率一直不太高。 首先，体系用二氯甲烷和甲醇会好一些，最好含有1%7N氨甲醇溶液，毒性小，容易旋干。 第二，提取时，水相要点板监控。最好也用二氯甲烷。如果不行加一点thf. 第三，用反相硅胶过试试。 NBS溴化反应谁做过，求助？ NBS溴化反应谁做过，求助？ 反应过程需氮气保护，我的三口瓶一口通氮气

16、，中间口接回流冷凝管，另一口磨口塞塞住，但该塞密封性不好，结果没有半个小时，加入的4毫升四氯化碳就不见了！看来下次要用气球作氮气保护！ 另外，不断吹出的氮气也会带走溶剂！ 还没做后处理，不知产率有多少？ (1你的引发剂是什么? 用AIBN时,其裂解温度为67度,选用CCl4没错. 用过氧二苯甲酰时,其裂解温度为95度,选苯则较好. (2反应不用氮保护亦可以的. (3要注意过程点板监控,原料和产物极性相差较小. 求助关于柱层析的几个问题 各位GG,JJ 们你们好，我是新成员。我现在在韩国学习。本科的时候我学得是生物，没想到过来之后转学了化学，很多东西不会，很郁闷。我学的是，天然产物的分离提取。

17、来了半年，只上了三根柱子。无意中进了咱们论坛，学到了关于柱层析的很多知识。先对GG，JJ们表示感谢。 最近我又开始了新一轮样品的分离，可是柱子重上了三遍效果都不好。我做的是Hexane Fraction的分离，用的是hex-EA分离系统，我用湿法装柱，湿法上样。第一天晚上，装好了柱子，上了样，结果第二天一看，柱子上半部分花了，很郁闷，只能用甲醇洗下样品重装。我的样品是油状的，猜测可能是油隔绝了柱子和外界接触？晚上溶剂挥发，因为不通气导致柱子变花？ 第二次装柱前，我先看了咱们论坛里所以关于柱层析的贴子，觉得也可能是装得柱子不紧。所以，这次我用了个小的气泵加压，装的感觉挺不错的。结果上样后，油状的

18、样品导致洗脱剂与柱子隔绝，打开下边的阀门后洗脱剂根本不流。只好用小气泵将样品推进柱子样品进入柱子后，随着洗脱剂流动，柱子整个变花了。这几天一直很沮丧。今天鼓起勇气重新又做了一遍，到目前为止没有出现任何问题。 不好意思，说了一下我的情况，耽误了大家很时间。 我总结了一下，有几个问题想问大家。问得有点白痴，让大家笑话了。 我的问题是： 1、在选好洗脱的溶剂体系后，是如何确 定洗脱比例的？是不是TLC先大体3：1（低极性：高极性）整体走样品，看看大体有多少斑点，然后再进一步用TLC测试，选用斑点RF约0。3的比例？ 也就是说，每次走溶剂之前是要做过很多TLC测试的吗？ 2、常压装柱子的时候可以加压吗

19、？会不会有什么不好的影响？比如使柱子不均匀等？ 3、跑柱子的时候我用紫外灯照，发现色带不是很整齐，是柱子装的不好，还是大家做的时候也这样？ 我还在跑着柱子呢，先想起来这几个。希望大家指导，谢谢了 1. 根据柱层析洗脱的要求，最好是先从低极性溶剂，如石油醚或正己烷开始，逐步加大洗脱剂极性，进行梯度洗脱，这样的效果比单一洗脱剂要好。 2. 柱子在装填和过柱时，加压很有必要，有利于柱子装实。 3.跑柱时用紫外灯效果一般很差，你需要将洗脱液分别点TLC确定。 另外， 根据你的柱子变花的情况，我怀疑你的样品在洗脱剂中的溶解性比较差。 加压过柱时，补加洗脱液前应该缓慢排除柱内气体，如果排气过急很可能导致柱

20、子变花；增大极性时如果前后极性相差较大也可能导致柱子变花（柱子温度升高导致）；建议柱子装好后先常压流一段时间，这样色带会相对整齐一些；柱子装好以后洗脱剂难以流下的话，可以用毛细管将吸附了样品的硅胶层轻轻搅拌，但不要破坏与柱子的层面，然后再加一层石英砂或粗硅胶，洗脱剂难以流下可能是上样时溶液的浓度太高或者油状物没有溶解完全直接吸附在硅胶上导致；建议柱子装好以后不要放置过夜，夏天温度高溶剂容易蒸发使柱子内出现大量气泡，如果要过夜应保存在18摄氏度左右的温室里。 楼主的问题，在论坛很多帖子里都有讨论。 1、洗脱剂的选择，一般是以第一个点在TLC上Rf值0.20.3为基础，稀释一倍进行第一个样品点的洗

21、脱，并在洗脱下第一个点后更换下一个点的洗脱极性（0.20.3稀释一倍）。 2、变花是由于柱子中气泡的存在，放置过夜和过快更换洗脱极性都会产生气泡。装柱子时一定要搅拌使得硅胶中的气体尽量拍干净。二氯甲烷、乙醚等低沸点溶剂很容易“走花”，所以最好用高沸点的同类溶剂代替。更换极性时，我一般从50:1到20:1是逐渐更换的，就是先到40:1，30:1在到20:1。这样更换，放热就不明显。 3、柱子在柱头堵了造成流速极慢，应该用洗脱剂溶解样品后上样，而不能单独将油上样。如果洗脱剂不溶，可以用低极性的二氯甲烷或者甲苯溶解。如果还不行，就得考虑用拌样方式上样。关于为什么最好溶解上样而不是直接将油上样，也有讨

22、论。 4、色带走不齐，很大程度是由于装柱子不紧造成的，也可能是上样是破坏了 硅胶表层的平面性造成的。 5、柱层析是典型的实验科学，走得多了，自然明白。 乙酸酐的纯化问题 最近要用乙酸酐和格式试剂做酰化反应，乙酸酐中的杂质乙酸会干扰反应，所以需要纯化。 查了一下，发现有加五氧化二磷回流后重蒸的，也有用Mg除乙酸(80度的，大家觉得哪种方法效果比较好，又容易操作？ 一楼的问题是除去醋酐中微量的醋酸,所以采取分馏的方法或甲苯共蒸的方法都不可取,加五氧化二磷回流后重蒸是正解,我们平常都是这样做的 产物过滤太难，有何高招? 我在甲醇钠溶液中环合得到的嘧啶产物，蒸掉甲醇后，加水溶解，盐酸中和后得到的固体产

23、物很难过滤（抽滤和离心都很困难），是不是因为含盐量太高？由什么办法能使产物容易过滤？ 可能是体系中的有机杂质太多了，一调酸有机物全出来了。建议你在调酸之前，用有机溶剂将碱性体系中的杂质提取出来一点，这样调酸的化出来的产物纯度高，应该会容易抽滤的! 还有一点 在调酸后 如果析出的是油状物的话，适当增加搅拌时间，这样油状物可能会变成固体，这样就很容易抽滤了 这种情况在生产中非常常见,除了以上二位朋友提的意见外,通常用的方法有 1、PH值调节完成后升温回流一定时间再冷却，使结晶粒变粗，对绝大部分热稳定性较好的物质都有良好的效果。 2、改变溶剂体系。 3、超声波释晶，效果显著但得不到良好的晶型。 4、

24、采取慢速自然过滤。 回复楼上的（1）问题 ： 杂质是指你在反应过程中生成的不是你想要的东西！溶解在碱性的体系中，一调酸就会析出来，影响你的产品的纯度和抽滤。 虚心求教降温方法 我要做的实验温度要求在低于52度，我实验室没有冷井，请问如何降温，如何保温！ 文献报道是用干冰乙醇体系降温，但不知道如何做能保持此温度！ 俺这里实验室里买了一种低温水浴箱，可以到度 是河南产的，有不同的规格， 一般用酒精作介质，开动后温度很快降到设定值（度偏差），然后就可以保温了用起来比较方便 当时买来要，现在似乎降价了（不同规格，价格也不同 问：有加压蒸馏么?我就知道减压蒸馏?是不是写错了? 这是文章原话: 某副教授在

25、有机所进修时，加压蒸馏一容易分解的化合物，由于加热没有控制好， 发生爆炸，场面极其血腥。胸口的洞缝了五十多针！ 答：加压蒸馏是化工中一种常见的方法之一，如呋喃生产，因沸点太低，主要杂质甲基呋喃与之沸点相差很近，就采取了加压蒸馏，减压蒸馏降低了物质的沸点，往往使不同物质的分离难度加大，而加压蒸馏的最大特点是可以 拉开二种沸点很接近的物质的沸程差。只是后来塔填料技术的反展使之被人淡忘了。加压蒸馏适于低沸点和易挥发物质的蒸馏,多数情况下,加压是为了提高沸点,以便更容易冷凝,可以用一般的冷却水或盐水冷却,同时提出来高回收率,减少损失.加压蒸馏特别要注意防止超压,设备需要加安全阀,最好是自动控制压力,冷

26、凝器冷却水不能断流. 问：用氯化钙能把氯仿中的甲醇除去吗？ 过完柱后的洗脱剂氯仿中含部分甲醇，现在想把甲醇除去，请问是不是用氯化钙就可以了？谢谢了。 答：甲醇可与氯化钙生成络合物，但这个络合物是絮状结构，体积很大，只能适合于甲醇含量很少的情况下吸附去除，含量略大，就会生成大量的固体，很难过滤 问：二氧六环的精制出问题了！什么原因？工具书上说：二氧六环的纯化，一般加入10质量的浓盐酸与之回流3h，同时慢慢通入氮气，以除去生成的乙醛，冷至室温，加入粒状氢氧化钾直至不再溶解。然后分去水层，用粒状氢氧化钾干燥过夜后，过滤，再加金属钠加热回流数小时，蒸馏后压入钠丝保存。我用片状氢氧化钾代替粒状的有没有问

27、题？没有出现分层，怎么回事？之前我想直接加入钠保存过夜后，再回流，结果钠是浮在液面上的，只好用CaH2干燥。 工具书上是不是说错了啊，但是两本不同的书都是这么处理的，怎么回事呢，困惑ing 答：我公司正好也在用二氧六环,用片状氢氧化钾代替粒状的肯定没有问题,没有出现分层，可能原因有二:盐酸加入量不对,导致氢氧化钾浓度太低.或是第一次氢氧化钾的量加入过多,只有固体没有分层现象.另外,第一次分层以氢氧化钠比较好分层十分容易.生产上不必加钠丝,用氢氧化钾脱水后,水份就可控制在0.02%以下,可以满足大部分合成的需要. 问：如何把TLC板上两个很近的点分开？ 这两个点是非对映异构体，rf值只差0.04

28、，hex:EA=10:1, rf值0.5左右，装了20cm的column, 用hex:EA=20:1的洗脱剂，只分开一半。求教这里的各位大侠，我到底应该用极性小的洗脱剂冲还是就用10:1冲，感觉用极性小的扩散蛮厉害的。 答：不知道你说的20cm的柱子是什么状况，比如柱径比和硅胶/样品比，因此只能泛泛而谈： 1、既然能分开一半，说明对柱层析的条件加以改善还是有望分开的。hex:EA=10:1, rf值0.5左右，你选择hex:EA=20:1做洗脱剂。我的建议是先找到rf值0.2左右的系统（估计就是20:1或者30:1），再对此系统稀释一倍后（如20:1稀释成40:1）做洗脱剂。 2、对于rf值只

29、差0.04，建议硅胶/样品比例应大于50，且在满足柱径比大于10的前提下，尽量选择直径比较大的柱子，以减少边缘效应 科学超级感兴趣的大一女生，可惜我的专业只是和生命科学稍有关系而已-_-! 我想问些幼稚的问题，谢谢各位大虾的解答： 1，提取蛋白质和酶等大分子的时候，最后一步是浓缩和冻干，但这个时候的大分子溶液往往是溶解在缓冲液而不是蒸馏水中的，浓缩的时候缓冲液也会被同时浓缩？那么缓冲液的摩尔浓度会被改变，有影响吗？还有，冻干后得到的干粉，应该也包含了缓冲液中的物质（如磷酸盐等）， 请问这样的干粉性质会受缓冲液残留物的影响吗？ 2，如果实验室没有冻干设备，提取的蛋白质只能以液体形态在零下10度密

30、封保存，该蛋白质分子量50000左右，性质稳定，请问该加什么防腐剂？理论上可以保存多长时间？ 3，最后问个菜得不能再菜的问题，其实很容易查到的，只是偶怕头疼想偷懒， 哪位哥哥知道生理盐水的摩尔浓度啊？ 因为我不是生物专业的，所以只能给你一个可能的解释。 1。蛋白质等生物大分子在浓缩之前应该会经过除盐这一步，而不会将缓冲液与蛋白质一起浓缩。可以使用半透膜或用凝胶色谱进行分离。 2。常用防腐剂有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等。蛋白质和酶常用的稳定剂有硫酸铵糊、蔗糖、甘油等，酶也可加入底物和辅酶以提高其稳定性。此外钙、锌、硼酸等盐溶液对某些酶也有一定保护作用。保存时间不详。 3。生理盐水的浓度是0。9

31、%NaCl溶液。摩尔浓度换算后为0。1538mol/l 使用丁基锂的相关问题 我现在在做的实验，先用丁基锂拔掉吡啶衍生物吡啶环上的溴然后通二氧化碳，把溴变成羧基。我做的100mg的量，反应在100ML反应瓶中进行，用橡皮塞塞住瓶口，一针擦至瓶底，一针擦至瓶口处，保持N2的流通，没有抽真空而时长时的通氮。加入的有机锂按3当量一次性针孔加入。反应开始时，反应液呈微黄色呈清THF溶液，加入丁基锂后，反应液变为桔皮色。并有固休生成，反应混合物成为乳液。此状态保持在-78度2分钟左右。然后通入二氧化碳气体（干冰挥发生成的），反应液很快变为嫩草青色（透明），继续搅拌，发现有白色固体生成。继续通二氧化碳，反

32、应温度渐渐的升至室温，再搅30分钟，结果发现容液挥发了很多，加入乙醇溶解，做LCMS，结果显示还有很多原料没反应，且无产物生成，但有杂质生成，TLC板上能明显看到3个点。请问各位大哥大嫂这是什么原因造成的，我该如何改进。这个反应应该怎么做，有无成功的案例供参考 二氧化碳干燥很容易解决, 用硫酸洗瓶或氯化钙干燥塔都行. 对溴吡啶类的丁基锂溴交换反应, 除了无水无氧和低温基本操作外, 把溴吡啶往装有丁基锂-THF反应瓶中 下 有没有什么好的但又比较容易办到的方法,谢谢! 要看被提纯体系的杂质情况，如盐含量高，我们往往采取冷冻干燥，再用有机溶剂溶解过滤，除去盐份，再选择合适的有机溶剂进行重结晶。盐含

33、量低则采用水与其它的混合溶剂结晶，过滤后立即用低沸点的有机溶剂漂洗烘干。 白油的处理方法 我以前用中南化学试剂有限公司产的液体石蜡（白油做反相乳液的油相时还可以，但05和06年产的就做不出来了，感觉粘度明显变大了，不知道有什么方法可以处理一下？粘度大是不是有可能是里面有什么杂质？ 白油是一种聚合度不同的混和物,粘度估计主要是生产厂家生产出的产品聚合度不同于你原来所用的,是无法通过后处理达到要求的,只能与厂家联系,要求低粘度的白油. 请教：加氢还原 如何加氢还原硝基苯，苯环上有氯，加什么保护剂 我好像记得用甲酸胺作氢源PdC催化效果好的很哦，都氯也没有多大的影响。你试试。 亚磷酸钠可以作为脱氯抑

34、制剂，效果挺好的！ 这个问题有点奇怪，硝基加氢是十分容易的，苯环上的氯消除难度远大于硝基不知具体结构可否告知？ RanyNi低温氢化含卤硝基苯，不会脱卤的 请问：wittig反应需要很严格的无水无氧操作吗？ 偶即将着手做wittig反应，在偶查到的关于此反应的文献中并无提到需要无水无氧条件，可听实验室师兄们说此反应必须在严格无水无氧下做，不知做此反应是否真的如此麻烦呢？盼望过来人指点一二！ 金属有机一般都要严格无水无氧的条件,我用过正丁基锂的,在空气中几秒钟就燃烧了 请教 DCC问题 羧酸和 醇的酯化 反应 ，我用DCC做脱水剂，请问生成的DCU和 未反应的DCC是否溶于丙酮？DCC的 量是怎

35、么确定的？它呈液体状还能达到分析纯的级别吗？哪位高手帮帮忙？ 我请问你,为什么一个酯化反应,你非得用DCC催化呢?通俗的用浓HH2SO4 或HCL气体不行吗? 再者,如果你非得用DCC这一类催化剂,我建议你用EDC,他比较好处理,反映完后,水洗就可以. "谢谢！我还有一个问题，我觉得过柱很麻烦，有没有别的方法提纯产物？请问你是 在反应结束后直接过柱 还是先要处理一下？" 如果你的反应产物是固体,一般你可以用MeOH或EtOH来重结晶 用浓硫酸或者HCl的方法多数仅限于醇是低级醇如甲醇、乙醇。若楼主想将两个含有羧基和羟基的大片断连接（如紫杉醇合成中的7-TES-Baccatin III 的13位羟基和侧链酸的酯化），用DCC缩合恐怕是合适的方法。当然，用EDC