Her2 蛋白定量测定试剂盒(ELISA)20160612

1、北京胜发兴生物技术有限公司北京胜发兴生物技术有限公司天津胜发生物技术有限公司（研发部）天津胜发生物技术有限公司（研发部）乳癌检测新时代乳癌检测新时代- 肿瘤标志物肿瘤标志物HER2/neuHER2/neu-ECD-ECD蛋白的临床应用蛋白的临床应用1l一、乳腺癌与一、乳腺癌与HER2 ECD概述概述l二、二、 HER2 ECD的临床应用的临床应用l三、三、 血清血清HER2 ECD检测与其他检测相辅相成检测与其他检测相辅相成l四、四、 试剂盒简况及对比实验（临床实验）试剂盒简况及对比实验（临床实验）l五、五、 常见问题常见问题2 一、乳腺癌与一、乳腺癌与HER2 ECDHER2 ECD概述概述

2、1. 乳腺癌乳腺癌 1.1 我国乳腺癌发病率我国乳腺癌发病率 1.2 乳腺癌的分子分型乳腺癌的分子分型2. HER2/neu的结构与功能的结构与功能3. 乳腺癌与乳腺癌与HER2 3.1 HER2/neu在乳腺癌中的流行度在乳腺癌中的流行度 3.2 HER2 ECD在乳腺癌中的流行度在乳腺癌中的流行度 341. 腔型腔型A-luminal A (ER+ and/or PR+, HER2- ）2. 腔型腔型B-luminal B (ER+ and/or PR+, HER2+) 3. HER2过表达型过表达型- (ER-, PR-, HER2+)恶性程度高恶性程度高4. 正常乳腺样型正常乳腺样型-

3、normal breast-like5. 基底细胞样型基底细胞样型-basal-like (ER-, PR-, HER2-, CK 5/6+) 1.2 1.2 乳腺癌的分子分型乳腺癌的分子分型52. 2. HER2/neuHER2/neu的结构与功能的结构与功能l属表皮生长因子受体家族，包括信号肽，胞外区（属表皮生长因子受体家族，包括信号肽，胞外区（ECD），跨膜区和胞浆区；），跨膜区和胞浆区；胞浆区具受体酪氨酸激酶活性；胞浆区具受体酪氨酸激酶活性； ECD为配体结合域，与受体结合后使为配体结合域，与受体结合后使Her2受体自身磷酸化并激活其酪氨酸激酶活性，最终受体自身磷酸化并激活其酪氨酸激酶

4、活性，最终促进细胞增殖；促进细胞增殖；Her2基因过度表达可导致细胞过度增殖和表型恶性转化，因而与肿瘤形成密切相关；基因过度表达可导致细胞过度增殖和表型恶性转化，因而与肿瘤形成密切相关； 在乳腺癌患者中，约有1/4-1/3病人的肿瘤组织为Her2表达阳性。Her2阳性的乳腺癌疾病进展速度快、恶性程度更高，对化疗耐药、化疗缓解期缩短，更容易复发和转移，预后也差 。HER-2/neu在正常人体腔上皮、腺上皮和胚胎中均有表达，但无基因扩增。特异性较高。在正常人体腔上皮、腺上皮和胚胎中均有表达，但无基因扩增。特异性较高。 乳腺癌肿瘤细胞HER2/neu肿瘤蛋白（p185）增强肿瘤细胞侵袭力HER2/n

5、eumRNAHER2/neu原癌基因HER2/neu细胞膜外区域 20-30%初发性乳腺癌HER2/neu 阳性3.1 HER2/neu在乳腺癌中的流行度在乳腺癌中的流行度转移性乳腺癌HER2/neu 阳性高达 90%来源：美国肿瘤协会； 200783.2 HER2 ECD在乳腺癌中的流行度在乳腺癌中的流行度HER2 ECD 阳性阳性18.5%初发的乳腺癌初发的乳腺癌43%转移性乳腺癌转移性乳腺癌HER2 ECD 阳性阳性Walter P Carney, et al. Clinical Chemistry. 1579-1598(2003)43%9复 发 的 乳 腺 癌 患 者 中复 发 的 乳

6、 腺 癌 患 者 中 H E R 2 E C D 阳 性 率阳 性 率25501968局部复发局部复发远处转移远处转移34 IHC阴性的初发乳腺癌阴性的初发乳腺癌复发或转移时复发或转移时HER2 ECD转转为阳性的比率为阳性的比率来源：美国肿瘤协会； 200710HER2/neu检测应用指南检测应用指南Archives of Pathology and Laboratory Medicine: 2007,Jan(131), 1843. 美国临床肿瘤学会：美国临床肿瘤学会：对于所有的浸润性对于所有的浸润性乳腺癌患乳腺癌患者，者，HER2/neu都应该推荐作都应该推荐作为常规检测为常规检测11.1

7、2二、 HER2-ECD的临床应用的临床应用判定值：判定值：15 ng/mL（15 ug/L） 疾病范围：乳腺癌，胃癌，肠癌，膀胱癌，肺癌等疾病范围：乳腺癌，胃癌，肠癌，膀胱癌，肺癌等 评估预后评估预后（肿瘤分型、预示生存期等）（肿瘤分型、预示生存期等） 预测疗效预测疗效（指导用药，激素、化疗或（指导用药，激素、化疗或Herceptin） 监测病程监测病程（药效评估、监测进展、提示复发、转移等）（药效评估、监测进展、提示复发、转移等） 筛查指标筛查指标（结合其他标志物）（结合其他标志物）13早期筛查：临床治疗方案的制定： Her2阳性乳腺癌患者对蒽环类抗生素和紫杉醇有良好的效果，尤其对于赫赛汀

8、有非常好的治疗效果。治疗过程中病程监测：预后的观察： 提前2-9个月提示复发的风险 产品应用：产品应用：血清血清 HER2-ECD 临床应用临床应用组织活检诊断 手术/ 新辅助治疗 淋巴结 阴性/阳性 辅助治疗 30% 复发率 (转移性乳腺癌)基础水平HER2-ECD检测结合组织活检新辅助治疗中检测血清HER2-ECD水平结合血清HER2-ECD 检测，影像学检查和靶向治疗辅助治疗中血清HER2-ECD 水平检测15HER2 ECD监测监测:复发复发(初发性乳腺癌初发性乳腺癌)28304776HER2CEACA15-3HER2+CEA+CA15-3肿瘤标志物预测复发的敏感性比较敏感性敏感性20

9、0例初发乳腺癌患者，随访14年。发现89例复发转移性乳腺癌，在这89例复发患者中HER2 ECD敏感性28，提前4.5月（局部复发敏感性低于远处转移，剔除局部复发，则HER2 ECD敏感性31），CEA 30，提前4.8月， CA153 47，提前4.9月。三者联合检测则敏感性上升到7616HER2 ECD监测监测:复发复发(转移性乳腺癌转移性乳腺癌)敏感性敏感性肿瘤标志物预测复发的敏感性比较HER2CA15-3CEAHER2+CEA+CA15-367544376Dnistrian AM, et al. J Clin Ligand Assay. 215-220(2003)17三、血清三、血清H

10、ER2 ECD检测与其他检测相辅相成检测与其他检测相辅相成1. 检测方法检测方法 影像学：影像学： 钼靶检测等钼靶检测等 病理：免疫组化（病理：免疫组化（IHC） HER2 /neu蛋白蛋白 原位杂交（原位杂交（FISH,DISH，CISH） HER2 /neu基因基因 血清：血清： HER2 ECD（ HER2 蛋白胞外区）蛋白胞外区）2. 血清血清HER2-ECD检测与病理学检测比较检测与病理学检测比较 优劣势&相关性181.HER2/neu 检测方法检测方法 HER2/neumRNAHER2/neu原癌基因HER-2/neu细胞膜外区域1 IHC3 ELISA2 FISHIHC/

11、FISH images courtesy of RY Osamura, MD, Tokai University School of Medicine19中医：乳腺钼靶片。 大多数医院大夫都选用：大夫手诊，乳腺彩超西医：乳腺针吸细胞病理学：穿刺成功率高达100%，早期诊断率 16.9%，总诊断准确率高达 98.6% 。医院里常用的检测方法：2.血清血清HER2-ECD检测与其他检测比较检测与其他检测比较21存在一些病例，IHC和FISH得出的均为不确定的结果，无法对Her2状态做出明确判断，我们的产品为定量检测，结果判定明确。经IHC或FISH判断为Her2阳性的患者未必能从靶向治疗中获益，导

12、致这种现象的原因可能是检测体系本身所造成的假阳性，也可能是Her2的信号通路中还存在其他异常位点。肿瘤异质性的存在导致IHC和FISH均无法避免假阴性结果。部分患者无法提供检测所需的组织样本或者组织标本无法满足进行检测的基本要求。既往的临床研究表明，患者病情发展及治疗过程中会发生Her2状态变化，而IHC和FISH均无法对患者的Her2状态进行动态、实时的检测。酶免疫的方法相对于FISH和IHC的优势2.血清血清HER2-ECD检测与病理学检测比较之相关性检测与病理学检测比较之相关性血清血清HER2-ECD检测与病理学检测互为有益补充，从多检测与病理学检测互为有益补充，从多维度多方向改善乳腺癌

13、疾病管理。维度多方向改善乳腺癌疾病管理。23四、胜发兴生物四、胜发兴生物Her2试剂盒临床研究试剂盒临床研究1.试剂盒检测原理试剂盒检测原理24252. 试剂盒性能指标试剂盒性能指标线性范围：线性范围：0.16-20 ng/mL检测范围：检测范围：0-400 ng/mL准确度：准确度：85%-115%孔间差：孔间差：10%批间差：批间差： 10%样本数：样本数：48孔试剂盒孔试剂盒-32-40份份 96孔试剂盒孔试剂盒-80-88份份263. 临床研究临床研究注：临床试验样品的选择27以对比试剂为标准，得出如下结果：以对比试剂为标准，得出如下结果： 阳性符合率阳性符合率413/413/（413

14、+16413+16）100%100%96.2796.27 阴性符合率阴性符合率618/618/（618+3618+3）100%100%99.5299.52 总符合率（总符合率（413+618413+618）/1050/1050100%=98.19100%=98.19Siemens 和 北京胜发兴 比较（单位：比较（单位：ng/mL）胜发兴胜发兴Her2试剂盒与西门子化学发光试剂盒相同样本结果比较试剂盒与西门子化学发光试剂盒相同样本结果比较Siemens 和 北京胜发兴 比较（单位：比较（单位：ng/mL）Siemens 和 北京胜发兴 比较（单位：比较（单位：ng/mL）28胜发兴Her2试剂

15、盒与西门子化学发光试剂盒检测相同样本结果比较经计算，N=1045次，r=0.9727，P=0.000（P0.001），根据统计学原理，两组数据高度相关29临床研究结论临床研究结论结果显示同一份血清标本分别用北京胜发兴生物技术有限公司生产的人Her2/neu蛋白定量测定试剂盒（酶联免疫吸附法）和已获得SFDA注册证的Siemens Healthcare Diagnostics Inc. 生产的HER-2/neu蛋白测定试剂盒(化学发光法)在中国已批准上市的同类产品进行测定的两组数据的相关系数和相关回归方程均具有显著性。综上所述，临床应用中两者之间具有等效性。与对照试剂相比，二者同样具有检测性能稳

16、定，检测结果准确、可靠，操作简便，检测时间短等特点，有利于快速及时地报告检测结果。适合在国内检验科或临床科室的实验室推广使用。30五、常见问题五、常见问题病理检测为阳性，为何试剂盒检测为阴性？阴性结果意义何在？病理检测为阳性，为何试剂盒检测为阴性？阴性结果意义何在？ 两种方法的检测对象分别为组织中的两种方法的检测对象分别为组织中的HER2/neu与从细胞表面脱落至血清中的与从细胞表面脱落至血清中的HER2-ECD，病理检测的阳性率较高，特异性则相对较低。二者结果不会完全一致，只具有一定，病理检测的阳性率较高，特异性则相对较低。二者结果不会完全一致，只具有一定程度的相关性，在转移型乳癌中相关性良

17、好。程度的相关性，在转移型乳癌中相关性良好。 血清血清HER2-ECD结果阴性，可作为初始值保存，之后进行连续监测，作为个体化治疗结果阴性，可作为初始值保存，之后进行连续监测，作为个体化治疗的依据。的依据。病理检测为阴性，为何试剂盒检测为阳性？病理检测为阴性，为何试剂盒检测为阳性？ 血清中的血清中的HER2-ECD可以早于病理检测几个月提示潜在转移、复发的风险。可以早于病理检测几个月提示潜在转移、复发的风险。可否用试剂盒来早期筛查？可否用试剂盒来早期筛查？ 可以结合其他检测手段进行早期筛查。可以结合其他检测手段进行早期筛查。与化学发光法相比有何优势？与化学发光法相比有何优势？ 经典方法，价格较

18、低，且不需要昂贵配套仪器，各级医疗机构均可应用，便于推广。经典方法，价格较低，且不需要昂贵配套仪器，各级医疗机构均可应用，便于推广。有哪些应用实例？有哪些应用实例？ 海军总医院、上海第一人民医院、第二炮兵总医院、陕西省肿瘤医院、医学科学院肿瘤海军总医院、上海第一人民医院、第二炮兵总医院、陕西省肿瘤医院、医学科学院肿瘤医院、解放军医院、解放军307医院、北京潞河医院、北京海斯特临床检验所等。医院、北京潞河医院、北京海斯特临床检验所等。31公司简介公司简介研发中心：研发中心：天津胜发生物技术有限公司于天津胜发生物技术有限公司于2011年在天津开发区注册，入住年在天津开发区注册，入住天津国际生物医药联合研究院，共享研究院大平台研发设施，是高科技天津国际生物医药联合研究院，共享研究院大平台研发设施，是高科技生物医药产品研发企业，生物医药产品研发企业