地黄寡糖胶囊的制备及质量标准研究

1、地黄寡糖胶囊的制备及质量标准研究                             作者：杨菁，安阳，刘影，宋扬，于涛【摘要】  目的制备地黄寡糖胶囊，对其进行质量研究，制定质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂所含的水苏糖进行了鉴别，并用高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中梓醇的含量。结果在薄层色谱(TL

2、C)中可以检出水苏糖特征性斑点;梓醇在0.21.8 g范围内呈线性关系，r=0.999 9，加样回收率为99.97%，RSD为1.11%。结论地黄寡糖胶囊制备工艺合理、可行。建立的鉴别方法专属性强，定量方法简便、准确，能有效地控制制剂质量。 【关键词】  地黄寡糖胶囊; 制备; 质量标准; 梓醇地黄寡糖胶囊是在地黄寡糖提取液1基础上制备的口服固体制剂。实验表明腹腔注射地黄寡糖提取液对脑缺血再灌所致痴呆大鼠学习记忆功能具有保护作用2;对谷氨酸诱导的神经细胞的损伤具有保护作用3，4。为方便使用将其制备成固体口服制剂。现将制备工艺、质量研究报道如下。1 仪器与试药LC-20ATVP高效液相

3、色谱仪(日本岛津公司);KQ-250B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);SYS-550型石英亚沸高纯水蒸馏器(金坛市丹阳门石英玻璃厂)。梓醇对照品(110808-200407，购于药品生物制品检定所);水苏糖对照品(纯度99.8%，20070514，购自北京慧德易科技有限公司);生地黄(购自河南省武涉县西陶镇，由锦州奥鸿药业有限责任公司照中国药典部生地黄质量标准检测，符合规定)。乙腈、甲醇为色谱级;其它试剂为分析纯。2 方法与结果2.1 地黄寡糖胶囊制备1取20 kg地黄粉碎成小于2 mm的颗粒，用50 L注射用水浸泡5 h，离心取上清得上清液约44 L，将上清液于50下真空浓缩至20

4、L，加入95%乙醇80 L混合，离心过滤取上清，得滤液96 L，用5 ku的超滤器将浓缩液超滤得超滤液约95 L，将超滤液在50减压浓缩至相对密度1.201.25(热测)，真空干燥至干膏，得干膏约400 g。将颗粒粉碎并控制在2060目，装胶囊。0.25 g/粒，生产约1 600粒。2.2 质量研究1.水苏糖对照品 2.供试品溶液(20080501)3.供试品溶液(20080502) 4.供试品溶液(20080503)1         图1 水苏糖TLC图谱色谱条件：色谱柱为SUNTEK C18(4.6 mm&#

5、215;200 mm，5 m)，流动相为乙腈-0.1%磷酸(199);流速0.9 ml/min;柱温36;检测波长214 nm;进样量10 l。溶液的制备：精密称取梓醇对照品适量，加水制成每毫升含50 g的溶液，为对照品溶液。取本品胶囊数粒，倾其内容物，研细混匀，称取约200 mg，精密称定，置200 ml容量瓶中，加甲醇80 ml，超声振荡30 min，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。峰的分离：取供试品溶液及对照品溶液各10 l，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液在梓醇位置上有相应的峰存在，且与其它色谱峰可以基线分离。表明梓醇在此色谱条件下分离良好。理论塔板

6、数按梓醇计，应不低于3 000。色谱图见图2。A-梓醇对照品溶液 B-地黄寡糖胶囊图2 高效液相色谱图线性关系实验：分别精密称取梓醇对照品加水配制浓度分别为10，30，50，70，90 g·ml-1，按色谱条件，分别进样10 l对照品溶液，测得峰面积，以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，得线性回归方程为：Y=1576.3X-2 670.9，r=0.999 9。结果表明梓醇在0.21.8g时，浓度与峰面积呈良好线性关系。精密度实验：取同一对照品溶液，按上述色谱条件，重复进样6次，10 l/次，测定梓醇峰面积，其RSD为0.33%，表明此法的精密度良好。稳定性实验：取批号为20080

7、501的地黄寡糖胶囊，按供试品溶液的制备方法制成供试品溶液，并分别于0，3，6，9，12，24 h，按上述色谱条件，进样10 l，测定梓醇含量，RSD为1.29%，表明梓醇在24 h内稳定。重复性实验：取批号为20080501的地黄寡糖胶囊6份，按供试品溶液的制备方法分别制成供试品溶液，按上述色谱条件，进样，测定梓醇含量，RSD为1.33%，表明分析方法重复性良好。加样回收率实验：称取已知含量的地黄寡糖胶囊约200 mg，精密称定6份，分别置于100ml的容量瓶中，分别用5.0，10.0，15.0 g·ml-1三种浓度的梓醇对照品溶液，按供试品溶液的配制方法制成供试品溶液，进样，回收

8、率(见表2)。平均回收率为99.97%，RSD为1.11%。表1 回收率实验结果结果表明本方法具有良好的回收率。样品的测定：取批号为20080501，20080502，20080503的地黄寡糖胶囊，按上述方法测定梓醇含量，结果含量分别为13.12，14.25，15.37 mg/粒。3 讨论地黄寡糖胶囊的主药成分为地黄寡糖，它是由中药地黄提取而成，梓醇作为地黄中的主要成分。参照2005年药典部地黄中梓醇含量测定的色谱条件，测得梓醇含量应不少于7.0 mg/粒。应用了TLC法对其中的水苏糖进行了鉴别，各点之间分离效果良好。同时对制剂的崩解时限、性状、干燥失重等进行了分析，均符合胶囊剂的要求。【】  1 杨 菁，岳春丽，王洪新.地黄寡糖及其提取方法P.中国专利号：200610088850.7，2007-01-24.2 杨 菁，石海燕，李 莹，等.地黄寡糖对脑缺血再灌所致痴呆大鼠学习记忆功能的影响J.中国药与毒理学杂志，2008，22(3):165.3 杨 菁，史佳琳，白 剑，等.地黄寡糖对谷氨酸诱导的海马神经元及葡萄糖摄入的影响J.中国药理学