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文档简介
1、精品文档基因工程一、选择题(每小题1.5 分,共 15 分)1基因工程的创始人是 ( )。A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen2关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当。A 由作用于同一 DNA序列的两种酶构成 B 这一系统中的核酸酶都是类限制性内切核酸酶C这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制 - 修饰系统3在 DNA的 3-5 链上,基因的起始密码子是( )A ATG(或 GTG) B AGTCTAGDTGA4 II限制性内切核酸酶可以特异性地识别()。A双链 D
2、NA的特定碱基对B双链 DNA的特定碱基序列C特定的三联密码D以上都正确5末端转移酶是合成酶类,具有()活性。A 3 5 DNA聚合酶 B5 3 DNA聚合酶 C 53DNA内切酶 D 5 3DNA外切酶6下面关于松弛型质粒 (relaxed plasmid)性质的描述中, ()是不正确的。A质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,因而有较多的拷贝数。B 可以在氯霉素作用下进行扩增。C通常带有抗药性标记。D同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。7关于 cDNA的最正确的说法是 ()。A同 mRNA互补的单链 DNAB同 mRNA互补的双链 DNAC以 mRNA为模板合成的双链DN
3、AD以上都正确8关于 T4 DNA Ligase ,下列说法中哪一项不正确? ( )A是最常用的 DNA连接酶。B不但能连接粘性末端,还能连接齐平末端。C不但能连接粘性末端。D最适温度 37 。9下列关于建立 cDNA文库的叙述中, ()是错误的 ?A从特定组织或细胞中提取DNA或 RNAB用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链 DNA为模板合成双链 DNAD 新合成的双链 DNA克隆到载体上,并导入受体细胞10用下列方法进行重组体的筛选,只有( )说明外源基因进行了表达。A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D原位菌落杂交二、填
4、空题(每空 1 分,共 25 分)1限制性内切核酸酶分为三类,基因工程中应用的是_。2为了防止 DNA的自身环化,可用 _去双链 DNA。3切口平移 (nick translation)法标记 DNA探针时应用的酶是 _ _。4基因工程中的 3 种主要类型的载体是_、 _、_。5野生型的 M13不适合用作基因工程载体,主要原因是、和。6黏粒 (cosmid) 是杂合载体。7引物在基因工程中至少有 4 个方面的用途: (1)(2)、 (3)(4)。8 Northern 印迹和 Southern 印迹有两点根本的区别:(1)_ _ 、, (2)_9 PCR反应中常用的酶是 _。- 1 -欢迎下载精
5、品文档10感受态的大肠杆菌细胞在温度为_时吸附 DNA, _时摄人外源DNA。11. 用碱法分离质粒DNA时,染色体DNA之所以可以被除去,是因为。12. 除具有较低的分子量外,一个理想的质粒载体必需包括_、_、_三个部分。13转基因植物操作中常用的载体是。14. pcDNA3.1 用于。三、名词解释(每小题4 分,共 20 分)1目的基因:2 基因工程:3载体:4Western 印迹:5核酸分子杂交:四、简答题(每小题10 分,共 20 分)1. 基因工程的基本操作程序 ?2. 怎样制备目的基因 ?。- 2 -欢迎下载精品文档基因工程评分标准与参考答案一、选择题:每小题1.5 分,共 15
6、分;多选不得分。1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c二、填空题 :每空 1 分,共 25 分1 II类酶。2碱性磷酸酶;5端的磷酸基团3 DNA聚合酶 I 。4质粒 DNA;病毒 DNA;质粒和病毒DNA杂合体5没有合适的限制性内切核酸酶识别位点;选择标记6质粒和噬菌体7合成探针;合成cDNA;用于 PCR反应;进行序列分析8印迹的对象不同:Northern是 RNA, Southern 是 DNA; ) 电泳条件不同,前者是变性条件,后者是非变性电泳9 Tag DNA 聚合酶100 C;42 C11染色体变性后来不及复性12复制起点;选择标记;克隆位
7、点13 Ti 质粒14外源基因导入哺乳动物细胞三、名词解释(每小题4 分,共 20 分)1在基因工程中被操作的DNA序列;又称外源基因 (foreigngene/exogenous gene) ,主要是指编码蛋白质的结构基因( structuralgene);它们可以从自然界中已有的物种基因组(genome) 中分离出来,也可以用人工的方法合成。2按照人们的意愿,进行严密的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,有目的地改造生物种性,生产生物活性物质,甚至创造新物种的技术。3携带外源基因进入受体细胞的DNA分子。4 Western 印迹是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上;然后用特
8、异性的抗体进行检测;可说明基因是否进行了表达。5用标记的探针检测出DNA或 RNA同源序列的技术;原理是碱基互补;常用的有Southern blot、 Northern blot和原位杂交。四、简答题(20 分)1 目的基因的制备;目的基因与载体连接;目的基因导入受体细胞;目的基因的表达与检测。或者:转、接、切、增、检(加以解释)。2 直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。 (加以解释)五、实验与论述题(20 分)由于基因已被测序,可通过RT-PCR方法克隆该基因;也或通过基因文库分离法获得该基因;基因可以在大肠杆菌中作为融合蛋白质或分泌蛋白质进行表达。具体操作如下:制备目的基因;连接到 T- 载体;转化大肠杆菌,
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