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文档简介

蛋白质含量测定蛋白质含量测定南京晓庄学院生命科学系一 实验原理v利用考马斯亮蓝能使蛋白质染色的利用考马斯亮蓝能使蛋白质染色的特性，能快速简单地测定蛋白质的特性，能快速简单地测定蛋白质的含量，本方法的灵敏度较高，且不含量，本方法的灵敏度较高，且不受游离氨基酸和小肽的影响。受游离氨基酸和小肽的影响。二 实验器材和试剂实验仪器：实验仪器：v分光光度计v分析天平v样品v容量瓶v移液管实验材料：芦荟v实验试剂实验试剂v标准牛血清蛋白溶液v染料试剂三三 实验步骤实验步骤v1 取芦荟叶片0.1剪碎，从磷酸缓冲液研磨，倒入10ml 离心管中，定容到10 ml，12000 pm离心，20min 得上清液作为待测样品。2 取0.5 ml提取液叫上5 ml考马斯亮兰试剂，摇匀在30摄氏度水浴 20min ，于595nm处测得OD值。3 制定标准曲线，配制20 40 60 80 100 mg/ml牛血清蛋白液，同2法测595nm 处的OD 值，以蒸馏水加考马斯亮兰试剂为作照。四四 计算计算v芦荟：0.067v0.067=0.0042 x-0.0141v x=19.31mg/ml蛋白质含量=19.31*10/0.1*1000000 =0.193五五 注意事项注意事项由于取的组织不同，所以 OD值相差较大。 研磨须充分，否则溶解后析光时所得数据并不是1克

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