桂林医学院天然药物教研室

1、生药学生药学总总 论论 桂林医学院天然药物教研室桂林医学院天然药物教研室真实性真实性有效性有效性安全性安全性生药学的基本理论与基本方生药学的基本理论与基本方法法内容内容生药质量的评价方法生药质量的评价方法 生药学总论生药学总论 内容内容一、总论的学习内容一、总论的学习内容 *经典理化鉴定方法经典理化鉴定方法二、中成药的鉴定二、中成药的鉴定 *DNA分子鉴定分子鉴定 *养阴清肺丸的鉴定养阴清肺丸的鉴定 *生药学生药学 原植物形态特征原植物形态特征性状特征性状特征*DNA分子分子特征特征显微特征显微特征定性分析定性分析定量分析定量分析有害物质限量有害物质限量（重金属、农残、毒性成分）（重金属、农残

2、、毒性成分）真真 伪伪优劣优劣定义定义方法方法直接将生药切片或粉末置载直接将生药切片或粉末置载玻片上，滴加试液，加盖玻玻片上，滴加试液，加盖玻片在显微镜下观察产生的结片在显微镜下观察产生的结晶、沉淀或颜色。晶、沉淀或颜色。生药的提取物置载玻片上，生药的提取物置载玻片上，滴加试液，加盖玻片在显微滴加试液，加盖玻片在显微镜下观察反应。镜下观察反应。显微化学定位显微化学定位一、微量升华的原理及方法一、微量升华的原理及方法二、在鉴定中的应用二、在鉴定中的应用荧光分析法在生药鉴定中的应用荧光分析法在生药鉴定中的应用定性分析定性分析紫外分析仪法紫外分析仪法1、观察生药整体、观察生药整体2、观察生药的新鲜断

3、面或饮片、观察生药的新鲜断面或饮片3、观察生药粉末、观察生药粉末4、直接观察生药的某种溶剂浸、直接观察生药的某种溶剂浸 出液出液5、将生药提取液滴于滤纸上，、将生药提取液滴于滤纸上， 挥干溶剂观察挥干溶剂观察6、生药提取液与化学试剂作用、生药提取液与化学试剂作用 后产生荧光后产生荧光 7、多重观察、多重观察 日光法日光法荧光显微镜法荧光显微镜法荧光光谱法荧光光谱法定量分析：荧光分光光度法、薄层荧光扫描法定量分析：荧光分光光度法、薄层荧光扫描法薄层色谱薄层色谱操作：选择吸附剂操作：选择吸附剂 制备薄层板制备薄层板 点样点样 定性参数的选测定定性参数的选测定 显色显色 展开展开 （比移值（比移值R

4、f、相对比移值、相对比移值Rst）应用：定性分析应用：定性分析 定量分析定量分析 以以RfRf做定性的依据，因影响做定性的依据，因影响RfRf因素多，需用标准因素多，需用标准 对照品作对照。在两种或两种以上展开系统种展开，对照品作对照。在两种或两种以上展开系统种展开， 若样品中斑点的若样品中斑点的RfRf值与标准对照品的值与标准对照品的RfRf值匀相同可基值匀相同可基 本肯定二者为同一化合物。本肯定二者为同一化合物。定性鉴别定性鉴别用标准物用标准物质对照别质对照别标准标准对照品对照品对照药材对照药材用相对比用相对比移值鉴别移值鉴别用文字描用文字描述鉴别述鉴别 原点中心至斑点中心的距离原点中心至

5、斑点中心的距离Rst = 原点中心至参考物质斑点中心的距离原点中心至参考物质斑点中心的距离定量鉴别定量鉴别n分两类：n一是将待测物从薄层板洗拖后，选择适宜的方法测定（洗脱法）；n二是薄层展开后，用薄层扫描仪在薄层板上测定被分离组分的含量（薄层扫描法）。n洗脱法分四步进行：n待测组分的分离n斑点定位n斑点的收集及洗脱n测定（多采用UV及可见光分光度法）HPLCHPLC 可用于定性和定量，色谱图中各色谱峰可用于定性和定量，色谱图中各色谱峰的保留时间、色谱峰相对百分峰面积及的保留时间、色谱峰相对百分峰面积及主要色谱峰的主要色谱峰的UVUV吸收光谱，均可作为生吸收光谱，均可作为生药真实性鉴定的指纹资料

6、。药真实性鉴定的指纹资料。 是生药及制是生药及制剂质量分析常用的方法。剂质量分析常用的方法。 一切物质都会对可见光及不可见光中的某些波长的一切物质都会对可见光及不可见光中的某些波长的光线产生吸收。不过其吸收的程度是不同的。即物质对不光线产生吸收。不过其吸收的程度是不同的。即物质对不同波长的光线表现出不同的吸收能力，物质的这一特性称同波长的光线表现出不同的吸收能力，物质的这一特性称为选择吸收。为选择吸收。 物质对光线的选择吸收反映了它们分子内部结构的差物质对光线的选择吸收反映了它们分子内部结构的差异。也就是说，通过研究物质得分子吸收光谱，就可以鉴异。也就是说，通过研究物质得分子吸收光谱，就可以鉴

7、别物质的分子结构。这是分光光度法对生药进行定性鉴别别物质的分子结构。这是分光光度法对生药进行定性鉴别的依据。的依据。 物质吸收光子能量的强度，不仅取决于物质的分子结物质吸收光子能量的强度，不仅取决于物质的分子结构，而且还与被光子所作用的物质的分子数目，即物质的构，而且还与被光子所作用的物质的分子数目，即物质的浓度有关。这是分光光度法对生药进行定量鉴别的依据。浓度有关。这是分光光度法对生药进行定量鉴别的依据。分光光度法在生药定性分析中的应用分光光度法在生药定性分析中的应用原理：同种生药的光谱具有一定的稳定性及重现性原理：同种生药的光谱具有一定的稳定性及重现性 不同种类生药的光谱各不相同不同种类生

8、药的光谱各不相同方法：方法：UVUV分光光度法分光光度法比较光谱的一致性（与对照药材比较；比较光谱的一致性（与对照药材比较； 与文献标准光谱核对）与文献标准光谱核对）比较导数光谱的一致性（用于比较导数光谱的一致性（用于UVUV光谱光谱 不易区分）不易区分）比较光谱的特征吸收（常用特征数据：比较光谱的特征吸收（常用特征数据： 最大吸收波长和吸光度比值）最大吸收波长和吸光度比值） 电子光谱，辐射波长电子光谱，辐射波长200-400200-400nmnm，仪器为，仪器为UVUV分光光度计选分光光度计选择性不如择性不如 IRIR。主要用于定量及。主要用于定量及物理常数测定物理常数测定IRIR分光光度法

9、分光光度法 振转光谱，辐射波长振转光谱，辐射波长2.5 - 15m2.5 - 15m。具特征峰多、专属性强。具特征峰多、专属性强（特别是在（特别是在 7-15m7-15m一段称指纹图谱，峰多且尖锐）、用试样量少一段称指纹图谱，峰多且尖锐）、用试样量少快速简便。用于生药真伪鉴别及结构鉴定。快速简便。用于生药真伪鉴别及结构鉴定。方法：方法：1 1、样品的处理：直接粉末法、溶剂提取法、样品的处理：直接粉末法、溶剂提取法 2 2、制片：压片法、涂片法、制片：压片法、涂片法 3 3、光谱分析：不需要确定光谱中各主要吸收峰的归属，、光谱分析：不需要确定光谱中各主要吸收峰的归属， 只在只在4000-400c

10、m 4000-400cm 范围内比较光谱的差异。范围内比较光谱的差异。 A A、在某一波数处，一方有明显吸收峰，另一方无。、在某一波数处，一方有明显吸收峰，另一方无。 B B、在某一波数内，两吸收峰的形状强度有明显不同。、在某一波数内，两吸收峰的形状强度有明显不同。 C C、被鉴别双方在指纹区的特征不同。、被鉴别双方在指纹区的特征不同。 上述三种，只要有其中一种就可做出鉴别结论。上述三种，只要有其中一种就可做出鉴别结论。-1应用举例应用举例 包括相对密度、旋光度、折光率、凝点、熔点等。对于油包括相对密度、旋光度、折光率、凝点、熔点等。对于油脂类、挥发油类及树脂类药材的真实性和纯度鉴别具有特别重

11、脂类、挥发油类及树脂类药材的真实性和纯度鉴别具有特别重要的意义。要的意义。相对密度相对密度熔点熔点区别或检区别或检查生药的查生药的纯杂程度纯杂程度区别或检区别或检查生药的查生药的纯杂程度纯杂程度测定含量测定含量折光率折光率区别不同区别不同的油类或的油类或检查生药检查生药纯杂程度纯杂程度旋光度、凝点旋光度、凝点解决形态鉴定的某些局限；解决形态鉴定的某些局限； 同属多来源药材的鉴别同属多来源药材的鉴别 道地药材的鉴别等道地药材的鉴别等特点：稳定性、多样性、化学稳定性方法：RFLP、PCR、RAPD等应用：植物分类、中药材鉴别、道地生药鉴定PCR (Polymerase chain reaction)PCR fragmentsInterested DNA sequencesPrimerPrimerExtracts Genomic DNADNA sequencing寻找特征性基因寻找特征性基因NoImagePCR-RFLPDNA Chi