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文档简介
1、血型鉴定基本知识血型的种类血型的种类 1900年奥地利科学家兰德斯坦纳经过研究,将人年奥地利科学家兰德斯坦纳经过研究,将人的血液分为的血液分为A型、型、B型、型、AB型、型、O型四种,也就是型四种,也就是ABO血型血型。 除了除了ABO血型系统外,人类还有一些其它的血型血型系统外,人类还有一些其它的血型系统,比如系统,比如Rh血型系统等。血型系统等。 Rh阳性阳性血型在中国汉族及大多数民族人中约占血型在中国汉族及大多数民族人中约占99.7%,个别少数民族约为,个别少数民族约为90%。在中国,。在中国,RH阴阴性血型性血型只占千分之三到四。只占千分之三到四。RH阴性阴性A型、型、B型、型、O型、
2、型、AB型的比例是型的比例是3:3:3:1。ABO血型鉴定定义 ABO血型鉴定,即指ABH血型抗原的检测。红细胞含A抗原的叫A型,含B抗原的叫B型,含A和B抗原的叫AB型;不含A、B抗原,而含H抗原的称O型。正常范围 ABO血型分为A型、B型、O型、AB型。临床意义 ABO血型鉴定主要用于: 1、临床输血:当循环血量不足或大失血或贫血需进行输血治疗,在输血前必须先选择血型相同的供血者,再进行交叉配血,完全相同后才能输血。 2、在皮肤、肾移植等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体。 3、不孕症和新生儿溶血症病因的分析。 4、亲子鉴定等。鉴定原理 常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血
3、清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有:正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。ABO血型定型原则血浆血细胞白细胞白细胞血小板血小板红细胞红细胞红细胞红细胞A凝集原凝集原B凝集原凝集原凝集原凝集原凝集原凝集原(红细胞)(红细胞)ABA和和B无无血型血型ABABOA凝集原B凝集原血清血清抗抗A凝集素凝集素抗抗B凝集素凝集素(抗(抗A)(抗(抗B)凝集素凝集素凝集原凝集原凝集原凝集原(红细胞)(红细胞)ABA和和B无无血型血型ABABO凝集素凝集素
4、(血清)(血清)抗抗B抗抗A无无抗抗A和抗和抗BB、OA、ABAB、A、B、OA、O无无A、AB、BB、AB输血原则:输血原则:同型血液可以互相输,同型血液可以互相输,O型血可以少型血可以少量输给其他三种血型的人,量输给其他三种血型的人,AB型血原型血原则上可以接受其他三种血型的血。则上可以接受其他三种血型的血。O(万能输血者)(万能输血者)(万能受血者)(万能受血者)方法学原理 根据红细胞膜表面有无A抗原和(或)B抗原,将血型分为A,B,AB,O型4种。可利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定ABO血型。所谓的正定型是指用标准抗A抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或(和)B抗原;所
5、谓的反定型,是指用标准的A型、B型细胞来测定血清中有无抗A和(或)抗B。试剂及配套品 抗抗A,抗,抗B和抗和抗0的标准的标准血清血清。准血清均采自健康人,并应符合下述条件:准血清均采自健康人,并应符合下述条件:特异性:只能与相应的特异性:只能与相应的红细胞抗原红细胞抗原发生凝集,无非特发生凝集,无非特异性凝集。异性凝集。效价:我国标准抗效价:我国标准抗A和抗和抗B血清效价均在血清效价均在1:128以上。以上。亲和力:我国标准要求抗亲和力:我国标准要求抗A对对A1、A2及及A2B发生反应发生反应开始出现凝集的时间分别是开始出现凝集的时间分别是15s、30s和和45s;抗;抗B对对B型型红细胞开始
6、出现凝集的时间为红细胞开始出现凝集的时间为15s。凝集强度为。凝集强度为3min时,时,凝块不小于凝块不小于1-2mm。冷凝集素效价:在冷凝集素效价:在1:4以下。以下。无菌。无菌。灭活补体。灭活补体。 操作步骤 玻片法正定型 1、 取清洁玻片1张,用蜡笔划成方法,标明抗A,抗B,分别滴家抗A,抗B血清在相应的方格内,再加受检者红细胞1滴,混匀。 2、 将玻片轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连续约1-5MIN,肉眼观察有无凝集反映,也可以用低倍镜观察结果。注意事项 1、所用器材必须干燥清洁、防止溶血,凝集和溶血的意义一样。为避免交叉污染,建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后,应待其平衡至室
7、温后再用,用毕后应尽快放回冰箱保存。 2、加试剂顺序:一般先加血清,然后再加红细胞悬液,以便核实是否漏加血清。 3、虽然IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4最强,医学教育网收集整理但为了防止冷凝集现象干扰,一般在室温2024内进行试验,而37条件,可使反应减弱。 4、幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱,最好采用试管法鉴定血型。注意事项 5、玻片法反应时间不能少于10min,否则较弱凝集不能出现,造成假阴性。 6、正、反定型结果一致才可发报告。 7、反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制,血型抗体可减弱或消失;血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓
8、瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难;新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体,且自身血型抗体效价又低,因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及(或)抗B抗体,可引起假阴性或血型鉴定错误。 婚配式子女可能有的血型子女不可能有的血型婚配式子女可能有的血型子女不可能有的血型鉴定方法 1)生理盐水凝集法:玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。 红细胞亚型抗原
9、性弱,如抗A抗B标准血清效价低时,易造成漏检或误定。如加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此类错误。鉴定方法 玻片法凝集结果判断:红细胞呈均匀分布,无凝集颗粒,镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱判断标准: 呈一片或几片凝块,仅有少数单个游离红细胞为(+)。 呈数个大颗粒状凝块,有少数单个游离红细胞为(+)。 数个小凝集颗粒和一部分微细凝集颗粒,游离红细胞约占1/2为(+)。 肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒。于镜下观察,每凝集团中有58个以上红细胞凝集为(+)。 可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多的游离红细胞()。 可见极少数红细胞凝集,而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。 镜下未见细胞凝集,红细胞均匀分布为(-
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