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文档简介
1、121、试管凝集反应(示教)2、ABO血型鉴定-玻片凝集反应(1份/1人)3、类风湿因子检测-乳胶凝集实验(示教)4、乙型肝炎病毒表面抗体检测-ELISA法(1份/1人)34567 操作步骤于试管架上列7支试管。 1.每管内分别加入生理盐水0.5ml。 2.血清稀释:第一管加入1:10待检血清0.5ml,混匀 后取0.5ml,加入第二管内,依此类推,直到第6管, 混匀后从第6管中吸出0.5ml弃去;第7管为对照管。 0.0.5ml0.0.5ml0.0.5ml0.0.5ml0.0.5ml0.0.5ml(一)试 管 凝 集 反 应8910效价:抗原抗体反应时,发生明显反应的最高血清稀释度,又称滴度
2、。凝集效价:凝集反应时,能使50%或以上的抗原发生凝集的最高血清稀释度。 112022-3-20121314151617操作步骤1.在凝集反应板中取4孔分别加入阴性血清、 阳性血清、生理盐水、待检血清各1滴2.每孔分别加入致敏胶乳1滴,充分混匀,置 室温-10分钟观察结果。181920 包被包被(未知抗原)未知抗原) 加入酶标抗体加入酶标抗体 洗板洗板 加底物加底物 加终止液加终止液21包被包被(已知抗原)已知抗原)加入待检标本(未知抗体)加入待检标本(未知抗体)加入酶标第二抗体加入酶标第二抗体抗抗体抗抗体 洗板洗板 加底物加底物 加终止液加终止液23加入待检标本(未知抗原)加入待检标本(未知
3、抗原) 加入酶标抗体加入酶标抗体 洗板洗板 加底物加底物 加终止液加终止液包被包被(已知抗体)已知抗体)2526无菌采血,离心无菌采血,离心2000rpm,3min2000rpm,3min,取上清作为待测标本,取上清作为待测标本每孔加入酶结合物每孔加入酶结合物1 1滴,滴,3737孵育孵育30min30min反应板中加入待测标本,同时设阴性、阳性、空白对照孔反应板中加入待测标本,同时设阴性、阳性、空白对照孔(NS)(NS)(反应板已用纯化反应板已用纯化 ) 手工洗板,弃液拍干,重复手工洗板,弃液拍干,重复5 5次次 每孔加入显色剂每孔加入显色剂A A液、液、B B液各液各1 1滴,置滴,置3737孵育孵育1515分钟分钟 每孔加入终止液每孔加入终止液1 1滴,混匀滴,混匀 目测法:与阳性和阴性对照比较,观察
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