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文档简介
1、青霉素的提炼工艺刘科梅1 青霉素的生产工艺过程 菌种 孢子制备 种子制备 发酵 发酵液预处理及种子加滤 提取 精制 成品检验 包装 分装 (应用 跟踪 质量分析)发酵阶段提取阶段2 发酵阶段粉碎机槽式混合机3 青霉素提炼工艺流程发酵液 预处理 过滤 萃取 洗涤 反萃取共沸结晶 过滤 干燥 成品3.1 预处理青霉素的存在部位:发酵液发酵液中含有大量杂质:菌体细胞、核酸、杂蛋白质、细胞壁多糖等、残留的培养基、色素、盐离子、代谢产物等目的:浓缩目的产物,去除大部分杂质,改变发酵液的流变学特征,利于后续的分离纯化过程预处理:发酵液加少量絮凝剂沉淀蛋白发酵液的预处理和过滤鼓式真空机过滤一次滤液:Ph6.
2、2-7.2,略浑浊,棕黄或绿色,蛋白质含量0.5-2.0%3.2 过滤过滤时转鼓下部沉浸在悬浮液中缓慢旋转。沉没在悬浮液内的滤室与真空系统连通,滤液被吸出过滤机,固体颗粒则被吸附在过滤面上形成滤渣。滤室随转鼓旋转离开悬浮液后,继续吸去滤渣中饱含的液体。当需要除去滤渣中残留的滤液时,可在滤室旋转到转鼓上部时喷洒洗涤水。这时滤室与另一真空系统接通,洗涤水透过滤渣层置换颗粒之间残存的滤液。滤液被吸入滤室,并单独排出,然后卸除已经吸干的滤渣。这时滤室与压缩空气系统连通,反吹滤布松动滤渣,再由刮刀刮下滤渣。压缩空气(或蒸汽)继续反吹滤布,可疏通孔隙,使之再生 .板框式过滤机过滤:硫酸调节ph4.5-5.
3、0,加入0.07%溴代十五烷吡啶,0.07%硅藻土作为助滤剂。二次滤液:澄清透明,用于提取(收率90%)3.3 溶剂萃取原理:青霉素游离酸易溶于有机溶剂,而青霉素盐易溶于水萃取剂:青霉素分配系数高的有机溶剂。工业上通常用:醋酸丁酯和醋酸戊酯。由于第一次萃取时存在大量的蛋白质,所以要加0.05-0.1%乳化剂PPB。萃取:2-3次。萃取过程BA萃取:酸化pH1.8-2.0,碟片式离心机分离(浓缩1.5-2.1)反萃取:pH6.8-7.4(磷酸盐、碳酸盐缓冲液)。把青霉素从丁酯中提取到缓冲液中。反复萃取2-3次,达到结晶要求。萃取条件:为减少青霉素降解,整个萃取过程应保持在10下,萃取罐冷冻盐水冷
4、却。一次BA萃取碟片式离心机3.4 青霉素的精制脱色1、萃取液中添加活性炭,除去色素、热源质2、过滤,除去活性炭结晶萃取液一般通过结晶提纯。青霉素钾盐在醋酸丁酯中溶解度很小,在二次丁酯萃取液中加入醋酸钾-乙醇溶液,青霉素钾盐就结晶析出。然后采用重结晶方法,进一步提高纯度,将钾盐溶于KOH溶液,调PH至中性,加无水乙醇,在真空条件下,共沸蒸馏结晶得纯品。结晶-直接结晶加醋酸钠-乙醇溶液反应:得到结晶钠盐。加醋酸钠-乙醇溶液:得到青霉素钾盐。结晶-共沸蒸馏结晶萃取液,再用0.5M NaOH萃取pH6.4-6.8下得到钠盐水浓缩液。加3-4倍体积丁醇,16-26,真空0.67-1.3kpa下蒸馏。水和丁
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