老年痴呆动物模型

1、老年痴呆动物模型老年痴呆动物模型小组成员：*老年痴呆症简介老年痴呆症简介 所谓老年痴呆症，又称阿尔茨海默(Alzheimers disease,AD)， 是发生在老年期及老年前期的一种原发性退行性脑病，指的是一种持续性高级神经功能活动障碍，即在没有意识障碍的状态下，记忆、思维、分析判断、视空间辨认、情绪等方面的障碍。 疾病类型：1、血管性痴呆症，这类型的痴呆症多为血管病变所导致 2、脑神经细胞退化性的痴呆症 v其特征性病理变化：为大脑皮层萎缩，并伴有-淀粉样蛋白 (-amyloid,-AP) 沉积，神经原纤维缠结 (neurofibrillary tangles , NFT) ，大量记忆性神经

2、元数目减少，以及老年斑 (senileplaque,SP) 的形成。v以下介绍老年痴呆小 鼠模型v建模目的：建立老年痴呆(AD)小鼠模型,用于AD及其治疗药物的研究。v所需材料：NIH小鼠，蛋白定量(双缩脲法)测定试剂盒、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定试剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒、D2半乳糖(生化试剂)、亚硝酸钠(分析纯)v建模方法：选用NIH小鼠,腹腔注射D2半乳糖120mg 和亚硝酸钠90mg ,每天1次,连续60d,制备老年痴呆动物模型。通过水迷宫试验,脑组织匀浆蛋白质含量、乙酰胆碱酯酶(AchE)v和超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定,脑组织病理切片HE染色和刚果红

3、染色,比较老年痴呆模型小鼠和正常小鼠的差异。v 建模步骤：1、雌性NIH小鼠40只,2024g, 每组20只,随机分为空白对照组和AD模型组。造模方法为:小鼠每日腹腔注射D2半乳糖120mg/kg和亚硝酸钠90mg/kg,连续60d;空白对照组腹腔注射等体积生理盐水。v2、水迷宫试验：自动记录水迷宫装置为80cm50cm20cm的茶色有机玻璃槽(中国医科院药物所研制),内设起点、终点(台阶)和多处盲端,水深9cm,水温2427,记录小鼠从起始点放入至找到台阶的时间(寻找潜伏期),若超过120s则以120s计。 给药完毕后第1天,各组小鼠进行训练,使其找到台阶;第24天加长路程,记录各组小鼠的寻

4、找潜伏期。 v3、脑内相关指标的测定：行为学试验结束后,每组取10只 小鼠禁食12h,断头处死,取全脑(嗅脑除外),置玻璃匀浆器 中,加入预冷生理盐水制成10%(g/ml)脑匀浆,3000r/min离心10min,取上清液置冰浴中,测定蛋白含量和AchE、SOD活性,按试剂盒说明书所述步骤操作,取样量均为50mlv4、病理检查：各组余下小鼠腹腔注射戊巴比妥钠60mg/kg麻醉,仰卧固定于手术台上,剪开胸腔,暴露心脏,用生理盐 水和4%多聚甲醛进行心脏灌注固定,至四肢僵直为止,取全脑和 颊部皮肤组织置4%多聚甲醛溶液中固定24h,石蜡包埋切片,常规HE染色和刚果红染色。 （统计方法：数据以平均值标准差表示,使用SPSS810 统计软件处理,用t检验进行统计学分析) 预防措施：1、改善劳动环境 2、忌酒和戒烟 3、保持精神愉快利于长寿及精神健康 4、饮食调节:既要防止高脂食物引起胆固醇升高，又要摄取必要