紫外分光光度法有机物的定性与定量分析

1、精选ppt1紫外分光光度法紫外分光光度法有机物定性定量有机物定性定量仪器分析实验精选ppt2一、一、目的要求目的要求v1.掌握紫外分光光度法的基本原理和条件。v2.掌握吸收曲线的测绘和测量波长的选择，了解最大吸收波长的重要性。v3.熟悉朗伯一比尔定律的应用，掌握标准曲线法定量的技术。v4.熟练掌握紫外分光光度计和石英比色皿的使用方法。精选ppt3二、基本原理二、基本原理v【名称】 苯甲酸 Benzoic Acid v【其他名称】 安息香酸 （carboxybenzene ）、 苯酸（phenylformic acid）、苯蚁酸 v【适应】与水杨酸合用于成人皮肤真菌病，浅部真菌感染如体癣、手癣及

2、足癣等，用于食品和药物制剂的消毒防腐剂，一般浓度为0.2%，或用0.5%的苯甲酸钠，溶解度更好。 精选ppt4二、有机物吸收光谱与电子跃迁ultraviolet spectrometry of organic compounds有机化合物的紫外可见吸收光谱是三种电子跃迁的结果：电子、电子、n电子。分子轨道理论分子轨道理论：成键轨道反键轨道。当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态(反键轨道)跃迁。主要有四种跃迁四种跃迁所需能量大小顺序大小顺序为：n n n s sp p *s s *RKE,Bnp p ECOHnp ps sH精选ppt52跃迁 所需能量最大；电子只有吸收远紫外光的能量

3、才能发生跃迁； 饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区； 吸收波长200 nm；例：甲烷的max为125nm , 乙烷max为135nm。 只能被真空紫外分光光度计检测到； 作为溶剂使用；s sp p *s s *RKE,Bnp p E精选ppt63n跃迁 所需能量较大。 吸收波长为150250nm，大部分在远紫外区，近紫外区仍不易观察到。 含非键电子的饱和烃衍生物(含N、O、S和卤素等杂原子)均呈现n* 跃迁。600215CH3NH2365258CH3I200173CH3CL150184CH3OH1480167H2Omaxmax（nm）化合物精选ppt74 跃迁 所需能量较小，吸收波长处于远紫

4、外区的近紫外端或近紫外区，max一般在104Lmol1cm1以上，属于强吸收。 （1 1） 不饱和烃不饱和烃* *跃迁跃迁 乙烯*跃迁的max为162nm，max为: 1104 Lmol-1cm1。 K带共轭非封闭体系的p p* 跃迁 C=C 发色基团， 但 p p*200nm。ccHHHH取代基 -SR -NR2 -OR -Cl CH3 红移距离 45(nm) 40(nm) 30(nm) 5(nm) 5(nm) max=162nm 助色基团取代 p p（K带)发生红移。精选ppt8165nm 217nm p* p p p* p* p p p p* (HOMO LVMO) max 基基-是由非

5、环或六环共轭二烯母体决定的基准值；是由非环或六环共轭二烯母体决定的基准值；无环、非稠环二烯母体： max=217 nm共轭烯烃（不多于四个双键）p p*跃迁吸收峰位置可由伍德伍德沃德沃德菲泽菲泽 规则估算。 max= 基基+ ni i （2）共轭烯烃中的）共轭烯烃中的 p p p p*精选ppt9三、仪器与试剂三、仪器与试剂v1.仪器v T6型（或其他型号）紫外可见分光光度计v 石英比色皿 1cm 2只v 比色管 50mL 6只v 吸量管 25mL 、 l0mL 、5mL 各 1支精选ppt10精选ppt11三、仪器与试剂三、仪器与试剂v2.试剂v1mg/mL苯甲酸标准储备液。v100 ug/

6、mL苯甲酸标准溶液：准确吸取1mg/mL的苯甲酸标准储备液25.00mL，在250mL容量瓶中定容。 精选ppt12四、实验步骤四、实验步骤 v 1.溶液的配制 取50mL的比色管6只，蒸馏水清洗干净，编 号 ， 用 5 . 0 0 m L 吸 量 管 分 别 准 确 加 入l00g/ml的苯甲酸标准溶液0、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静置。 准确移取10.00mL苯甲酸试液，在50mL比色管中用蒸馏水定容 精选ppt13四、实验步骤四、实验步骤v2.石英比色皿配套性检查 石英比色皿在波长220nm处盛蒸馏水，以在一号格的比色

7、皿为参比，调节其透光率T为100%，测量第二个比色皿的的透光率，透光率的偏差小于0.5%的比色皿可以陪套使用。记录校正值精选ppt14四、实验步骤四、实验步骤v3.有机物的定性 选用苯甲酸试样溶液，以蒸馏水为参比，用1cm的石英比色皿，在波长210250nm范围内，每隔5 nm测量一次。以吸光度为纵坐标，波长为横坐标，绘制吸收曲线。与苯甲酸标准曲线比对定性。v选择吸收曲线的最大吸收波长max=227nm为本实验的测定波长。精选ppt15四、实验步骤四、实验步骤v3.有机物的定性 精选ppt16四、实验步骤四、实验步骤v4标准曲线的绘制 在选定的测量波长max=227nm处，以蒸馏水为参比，用1cm的比色皿盛溶液，准确测定以上配制好的各个苯甲酸标准溶液的吸光度A，每个标准溶液读三次取其平均值。以浓度C作横坐标，吸光度A作纵坐标，绘制标准曲线。精选ppt17四、实验步骤四、实验步骤v5.试样吸光度的测定 在测量波长max=227nm处，与标准曲线同样的条件下，测量样液吸光度A，测三次取其平均值。精选ppt18五、实验记录五、实验记录 v1测定波长的确定 仪器型号 比色皿厚度 精选ppt19五、实验记录五、实验记录 v2标准曲线的绘制及样品测定精选ppt20六、数据处理及计算结果v1测定波长的确定v根据上述数据绘制吸收曲线，确定最大吸收波长即为测定波长。v2标准曲线的绘