GC-SM测定奶粉中的三聚氰胺——三聚氰胺的测定

1、 1 三聚氰胺知识概述一一气相色谱部分二二质谱部分三三样品处理四四提取与净化五五 食品营养与检测专业教学资源库 目录页衍生化处理六六 2 食品营养与检测专业教学资源库 过渡页三聚氰胺的知识概述三三三聚氰胺（化学式：C3N3（NH2）3），俗称密胺、蛋白精，IUPAC命名为“1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺”，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，被用作化工原料。它是白色单斜晶体，几乎无味，微溶于水（3.1g/L常温），可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等，不溶于丙酮、醚类、对身体有害，不可用于食品加工或食品添加物。 1 食品营养与检测专业教学资源库 仪器条件气相色谱部分气相色谱部分 色谱

2、柱色谱柱:Equity-5石英毛细管柱，石英毛细管柱，30m*0.25m;程序升温程序升温:初初始温度始温度75保持保持1min，以，以 20/min的速率升温至的速率升温至300，保，保持持5min。进样口温度。进样口温度250，进样方式，脉冲不分流进样，进样方式，脉冲不分流进样，柱流速柱流速:1.0M1/min，进样量，进样量:1L，溶剂峰时间，溶剂峰时间:4min 1 食品营养与检测专业教学资源库 仪器条件2质谱部分质谱部分 电子电离电子电离(FI)，电离能量，电离能量:70eV，离子源温度，离子源温度250，接口温，接口温度度:280;选择离子扫描选择离子扫描(SIM)，微扫描，微扫描

3、 时间窗口时间窗口0.3，全扫描，全扫描质量范围质量范围m/z40-450。 1 食品营养与检测专业教学资源库 样品前处理3.1提取提取 试样充分混匀，称取试样充分混匀，称取2g(精确至精确至0.01g)样品于样品于50ml，具塞比，具塞比色管，加入色管，加入 25ml的的1%三氯乙酸溶液，加入适量乙酸铅，涡三氯乙酸溶液，加入适量乙酸铅，涡旋振荡旋振荡*#8，超声提取，超声提取30min，4000r/min离心离心5min,用用1%三氯三氯乙酸定容至刻度，充分混匀后，静置，过滤，滤液待净化。乙酸定容至刻度，充分混匀后，静置，过滤，滤液待净化。 1 食品营养与检测专业教学资源库 样品前处理3.2

4、净化净化 依次加入依次加入3ml甲醇、甲醇、3ml水活化固相萃取柱，准确移取适当水活化固相萃取柱，准确移取适当体积数的待净化滤液上固相萃取柱，控制流速在体积数的待净化滤液上固相萃取柱，控制流速在 1ml/min以以内，再依次加入内，再依次加入 3ml水和水和 3ml甲醇淋洗固相萃取柱，抽近干，甲醇淋洗固相萃取柱，抽近干，用用 3ml甲醇氨水溶液洗脱，收集洗脱液于甲醇氨水溶液洗脱，收集洗脱液于50氮气吹干，根氮气吹干，根据洗脱液中三聚氰胺的浓度用甲醇溶液进行适当稀释即用甲据洗脱液中三聚氰胺的浓度用甲醇溶液进行适当稀释即用甲醇定容至醇定容至 3ml. 1 食品营养与检测专业教学资源库 样品前处理3

5、.3衍生化衍生化准确移取准确移取 2ml洗脱液，用氮气吹干，加入洗脱液，用氮气吹干，加入 400l吡啶和吡啶和200l衍生化试剂，混匀，衍生化试剂，混匀，70反应反应30min. 用吡啶定容至用吡啶定容至 2ML。进。进气相色谱质谱联用仪分析。气相色谱质谱联用仪分析。 1 食品营养与检测专业教学资源库 提取与净化 用三氯乙酸水溶液作为提取液，能够很好的溶解试样中用三氯乙酸水溶液作为提取液，能够很好的溶解试样中的三聚氰胺的三聚氰胺;同时采用甲醇氨水溶液作为洗脱液是因为三聚氰同时采用甲醇氨水溶液作为洗脱液是因为三聚氰胺属于弱碱性化合物，微溶于甲醇，加入氨水后增加了目标胺属于弱碱性化合物，微溶于甲醇，加入氨水后增加了目标物的溶解度，能够较充分的将萃取柱上的三聚氰胺洗脱下来，物的溶解度，能够较充分的将萃取柱上的三聚氰胺洗脱下来，洗脱效率高，有利于待测物和基质的分离。洗脱效率高，有利于待测物和基质的分离。 1 食品营养与检测专业教学资源库 衍生化处理 衍生化的作用是把硅烷基引入到三氯氰胺分子中取代其衍生化的作用是把硅烷基引入到三氯氰胺分子中取代其胺基上的活性氢，降低了三聚氰胺的极性，减少了氢键的束胺基上的活性氢，降低了三聚氰胺的极性，减少了氢键的束缚，形成的三聚氰胺衍生物沸点降低，更容易挥发缚，形成的三聚氰胺衍生物沸点降低，更容易挥发同时衍同时衍生化过程中，衍生试剂