[医学微生物学]支原体 立克次体

1、第第19章章 支原体支原体Mycoplasma微生物学教研室微生物学教研室概念：支原体是一类概念：支原体是一类缺乏细胞壁缺乏细胞壁的原核细的原核细胞型微生物，也是在胞型微生物，也是在无生命培养基上生长无生命培养基上生长繁殖的繁殖的最小最小微生物微生物。其特点为细胞膜含固。其特点为细胞膜含固醇，能通过细菌滤器；高度多形性、形成醇，能通过细菌滤器；高度多形性、形成分枝的长丝；含分枝的长丝；含DNADNA和和RNARNA，二分裂繁殖等。，二分裂繁殖等。柔膜体纲支原体目支原体科 无胆甾原体科 螺原体科支原体属 脲原体属主要病原性支原体主要病原性支原体n肺炎支原体肺炎支原体 M.pneumoniaeM.

2、pneumoniaen人型支原体人型支原体 M. NominisM. Nominisn生殖器支原体生殖器支原体 M.genitaliumM.genitaliumn穿透支原体穿透支原体 M . penetrausM . penetrausn溶脲脲原体溶脲脲原体 U.urealyticumU.urealyticum第一节第一节 概概 述述一、生物学性状一、生物学性状1. 1. 形态结构形态结构最小的原核细胞生物；最小的原核细胞生物；球形、球杆形、长丝球形、球杆形、长丝状及分枝状等状及分枝状等多多种形态；种形态；G-，着色困难，常，着色困难，常用用Giemsa染色法染染色法染成淡紫色。成淡紫色。细胞

3、膜由细胞膜由蛋白质和脂质蛋白质和脂质（固醇固醇）组成）组成三层结构三层结构 特殊的顶端结构： 粘附宿主上皮 细胞表面，与支原 体的致病有关。2. 2. 培养特性培养特性: :荷包蛋样菌落荷包蛋样菌落培养基中含人或动培养基中含人或动物的血清物的血清(1020%)及酵母浸液。及酵母浸液。多数支原体能在鸡多数支原体能在鸡胚绒毛尿囊膜或细胚绒毛尿囊膜或细胞培养中生长。胞培养中生长。固体培养基：固体培养基： 27天长出直径约天长出直径约10600m的的典型的典型的“荷包蛋样荷包蛋样”菌落：低倍镜下见菌落：低倍镜下见菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，外周由颗粒包绕。外周由

4、颗粒包绕。液体培养基：液体培养基： 清亮清亮支原体是污染细胞培养的重要原因之一支原体是污染细胞培养的重要原因之一 鉴别点 支原体 细菌L型细胞壁缺失原因 在遗传上与细菌无关 与原菌相关，可以回复细胞膜 含高浓度固醇 细胞膜不含固醇 培养特性 需要胆固醇 大多需要高渗培养 菌落大小 生长慢，菌落小 菌落稍大 ( 0.61.0) 液体培养 液体培养混浊度极低 一定混浊度，可附壁支原体与细菌L型的异同点n 不同点n 相同点 支原体支原体 葡萄糖葡萄糖 精氨酸精氨酸 尿素尿素 吸附细胞吸附细胞 致病性致病性 肺炎支原体肺炎支原体 + 红细胞红细胞 肺炎、支气管炎肺炎、支气管炎人型支原体人型支原体 +

5、泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染生殖器支原体生殖器支原体 + 泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染穿透支原体穿透支原体 + + 红细胞红细胞 条件感染条件感染 CD4+T细胞细胞 多见于艾滋病多见于艾滋病 巨噬细胞巨噬细胞 溶脲脲原体溶脲脲原体 + 泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染 流产及不孕不育流产及不孕不育 3、生化反应溶脲脲原体分解尿素产氨，是酚红变红，液体清亮，为阳性（右） （四）抗原结构抗原结构 来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原，来自细胞膜，胞膜外层蛋白质是主要抗原， 常用生长抑制试验常用生长抑制试验(GIT)与代谢抑制试验与代谢抑制试验 (MIT)鉴定。鉴定。 GIT是将吸有型特异性抗血清的滤

6、纸片置于接种有是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上，支原体的固体培养基上， 经孵育出现同型血清抑制经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现象。该型支原体生长现象。 MIT是将支原体接种在含有抗血清培养基中，若抗是将支原体接种在含有抗血清培养基中，若抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。二、致病性与免疫性顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上荚膜或微荚膜的抗吞噬作用荚膜或微荚膜的抗吞噬作用产

7、生毒性代谢产物产生毒性代谢产物超抗原，刺激炎症细胞分泌大量细胞因子超抗原，刺激炎症细胞分泌大量细胞因子粘附、侵入粘附、侵入CD4 TCD4 T淋巴细胞（穿透支原体）淋巴细胞（穿透支原体）第二节第二节 主要致病性支原体主要致病性支原体一一 肺炎支原体肺炎支原体n是下呼吸道重要的致病性支原体，所引起的人类是下呼吸道重要的致病性支原体，所引起的人类支原体肺炎占细菌性肺炎支原体肺炎占细菌性肺炎50%左右，其病理变化以左右，其病理变化以间质性肺炎为主，又称之原发性非典型性肺炎。间质性肺炎为主，又称之原发性非典型性肺炎。症状轻，与胸片严重程度不符症状轻，与胸片严重程度不符（一）致病性 1.主要经飞沫传播，

8、主要经飞沫传播，但大多数发生于夏但大多数发生于夏 末秋初，末秋初，515岁青少年发病率最高。岁青少年发病率最高。 2.含特殊的顶端结构含特殊的顶端结构：P1表面蛋白（表面蛋白（170 kDa）和和P30（32 kDa）为主要的粘附蛋白，使肺炎）为主要的粘附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。支原体黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子（如在感染部位释放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起组织损伤）引起组织损伤。致病性与免疫性致病性与免疫性所致疾病所致疾病-支原体肺炎支原体肺炎n传播途径

9、传播途径 n经飞沫传播经飞沫传播n发病年龄发病年龄 n儿童及青少年多见儿童及青少年多见n潜伏期潜伏期 2 23W3Wn临床表现临床表现n发热（约发热（约3939）、头痛、）、头痛、持续性顽固咳嗽持续性顽固咳嗽、胸痛等。一般经胸痛等。一般经3 310d10d主要症状消失，但主要症状消失，但咳嗽可以持续咳嗽可以持续1 1个月之久。个月之久。（一）分离培养 痰或咽拭子接种在SP-4培养基，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定，进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验。三、微生物学检查法三、微生物学检查法三、微生物学检查法三、微生物学检查法ELISA：此法敏感，特异

10、性高，快速、经此法敏感，特异性高，快速、经济，并可检测济，并可检测IgM和和IgG抗体，为目前诊抗体，为目前诊断的可靠方法。检测分子量断的可靠方法。检测分子量190kDa的的P1蛋白，蛋白，3h可完成试验，特异性高，敏感可完成试验，特异性高，敏感性为性为10 4CFUl标本。标本。防治原则 大环内酯类药物 喹诺酮类药物四、防治原则四、防治原则二二 解脲脲原体解脲脲原体溶脲脲原体溶脲脲原体 U.urealyticumU.urealyticum人型支原体人型支原体 M. NominisM. Nominis生殖器支原体生殖器支原体 M.genitaliumM.genitalium性传播疾病（性传播疾

11、病（STD）的病原体）的病原体解脲脲原体解脲脲原体 通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋非淋菌性尿道炎菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。，也能引起盆腔等部位的感染。还可通过胎盘感染胎儿，出现早产和死胎。还可通过胎盘感染胎儿，出现早产和死胎。也能引起妇女也能引起妇女不孕不育症不孕不育症。常与衣原体、淋球菌合并感染常与衣原体、淋球菌合并感染1.寄居泌尿生殖道，寄居泌尿生殖道，2.传播途径为传播途径为性接触和母婴传播性接触和母婴传播。3.致病机制致病机制-粘附于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；粘附于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；-产生毒性代谢产物如产生毒性代谢产

12、物如NH3，对宿主细胞有急性，对宿主细胞有急性毒性作用；毒性作用；-磷脂酶损伤宿主的细胞膜磷脂酶损伤宿主的细胞膜。解脲脲原体解脲脲原体 2.引起非淋菌性尿道炎引起非淋菌性尿道炎(NGU) ，上行感染，上行感染，可引起前列腺炎或附睾炎；阴道炎和宫颈可引起前列腺炎或附睾炎；阴道炎和宫颈炎，并可导致流产。因为与人精子膜有共炎，并可导致流产。因为与人精子膜有共同抗原，对精子可造成免疫损伤而致不育。同抗原，对精子可造成免疫损伤而致不育。常与衣原体、淋球菌合并感染常与衣原体、淋球菌合并感染引起男性不孕的原因：引起男性不孕的原因： UuUu吸附于精子表面，使其运动受阻，吸附于精子表面，使其运动受阻， 并蔽盖

13、了精子识别卵细胞的部位并蔽盖了精子识别卵细胞的部位 UuUu产生神经氨酸样物质，干扰精子与产生神经氨酸样物质，干扰精子与 卵细胞结合。卵细胞结合。 UuUu与精子膜有共同抗原，从而产生抗与精子膜有共同抗原，从而产生抗 精子抗体精子抗体 病原体检测 接种液体培养基，分接种液体培养基，分解尿素产碱，酚红指示解尿素产碱，酚红指示剂由橘黄色变为红色；剂由橘黄色变为红色；培养培养2448h，用低倍，用低倍镜观察菌落，进一步鉴镜观察菌落，进一步鉴定需用特异抗血清做定需用特异抗血清做GIT与与MIT。三、微生物学检查法三、微生物学检查法核酸检测 PCR检测：检测： 检 测 尿 素 酶 基 因 、 多 带 抗

14、 原检 测 尿 素 酶 基 因 、 多 带 抗 原（MB-Ag）基因和）基因和16S rRNA基因。基因。此法快速、特异，适宜于大批量标本此法快速、特异，适宜于大批量标本检测。检测。三、微生物学检查法三、微生物学检查法生殖支原体生殖支原体与泌尿生殖道感染有关与泌尿生殖道感染有关人型支原体人型支原体能引起渗出性咽炎及尿道炎，也与卵能引起渗出性咽炎及尿道炎，也与卵巢脓肿、产褥热等有关。巢脓肿、产褥热等有关。思考题1 1、名词解释：支原体、名词解释：支原体(mycoplasma)(mycoplasma)2 2、简述致病性支原体的种类及其致病性。、简述致病性支原体的种类及其致病性。3 3、支原体与细菌

15、、支原体与细菌L L型的比较型的比较第第20章章 立克次体立克次体（Rickettsia）概念概念 ：立克次体是一类以：立克次体是一类以节肢动物节肢动物为传播为传播媒介，媒介，严格活细胞内寄生严格活细胞内寄生的原核细胞型微的原核细胞型微生物，可以引起斑疹伤寒、生物，可以引起斑疹伤寒、Q Q热、恙虫病、热、恙虫病、斑点热等传染病。斑点热等传染病。 1906年首次被发现，第一个被发现的立克次体病是斑疹伤寒。为了纪念因研究斑疹伤寒被感染而牺牲的年仅39岁的医师，将这类微生物统称为立克次体。 立克次体的共同特点：立克次体的共同特点：专性活细胞内寄生，以二分裂方式繁殖专性活细胞内寄生，以二分裂方式繁殖有

16、有DNADNA和和RNARNA两类核酸两类核酸球杆状或多形态，革兰染色阴性球杆状或多形态，革兰染色阴性寄生在吸血性节肢动物体内，以节肢动物为传播媒介或储存宿主寄生在吸血性节肢动物体内，以节肢动物为传播媒介或储存宿主引起自然疫源性疾病引起自然疫源性疾病对多种抗生素敏感对多种抗生素敏感第一节第一节 概概 述述一、生物学性状一、生物学性状大小大小: : (0.3m-0.6m) (0.3m-0.6m)(0.8m -2.0m)(0.8m -2.0m)形态形态: : 类似球杆菌类似球杆菌, ,多形性多形性 ( (球形、哑铃形、长杆状或丝状等球形、哑铃形、长杆状或丝状等) )染色染色: : Giemsa G

17、iemsa染色法染色法: : 紫色或蓝色紫色或蓝色 马氏染色法马氏染色法(Macchiavello stain): (Macchiavello stain): 红色红色排列排列: : 散在于细胞浆中、核旁成堆散在于细胞浆中、核旁成堆 ( (斑点热立克次体在胞浆或核内斑点热立克次体在胞浆或核内) ) 培养培养: : 专性细胞内专性细胞内( (活细胞内活细胞内) )寄生寄生培养方法培养方法: : 鸡胚卵黄囊内接种，组织细胞培养鸡胚卵黄囊内接种，组织细胞培养 动物接种动物接种 抗原构造：抗原构造： 群特异性抗原群特异性抗原, ,种特异性外膜抗原种特异性外膜抗原外斐反应外斐反应(Weil-Felix

18、reaction):(Weil-Felix reaction):斑疹伤寒斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些等立克次体与变形杆菌某些X X菌株（菌株（ OX19、OX2、OXk ）有共同的耐热多糖类抗原。利）有共同的耐热多糖类抗原。利用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原，进行用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原，进行定量定量非特异凝集反应非特异凝集反应（交叉凝集反应交叉凝集反应），以），以检检测测人或动物血清中的相应人或动物血清中的相应抗体抗体。协助诊断。协助诊断斑疹斑疹伤寒伤寒, ,恙虫病恙虫病, ,滴度超过滴度超过1:1601:160有意义有意义. .立克次体立克次体变形杆菌变形杆菌抗体抗体交叉反

19、应交叉反应 外裴氏反应示意图外裴氏反应示意图抵抗力抵抗力: : 热、消毒剂热、消毒剂: : 较弱较弱(56,(56,数分钟数分钟,0.5%,0.5%石碳酸、石碳酸、 0.5%0.5%来苏来苏,75%,75%酒精中数分钟酒精中数分钟) ) 抗生素抗生素: : 敏敏 感感: :氯霉素和四环素氯霉素和四环素 不敏感不敏感: :磺胺类，磺胺类，磺胺药刺激生长磺胺药刺激生长 低温、干燥低温、干燥: : 较强较强(-20(-20或冷冻干燥半年以或冷冻干燥半年以上上) )二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性传播媒介：传播媒介：吸血节肢动物，如虱、蚤、蜱、螨等。吸血节肢动物，如虱、蚤、蜱、螨等。致病物质：致病

20、物质：脂多糖（发热、微循环障碍、脂多糖（发热、微循环障碍、DICDIC、休克、休克 磷脂酶磷脂酶A A（溶解宿主细胞膜或吞噬体膜）（溶解宿主细胞膜或吞噬体膜） 微荚膜（粘附、抗吞噬）微荚膜（粘附、抗吞噬）致病过程致病过程 体虱体虱 鼠蚤鼠蚤 人体人体 局部淋巴结及小血管内皮细胞局部淋巴结及小血管内皮细胞 恙螨恙螨 第一次入血第一次入血 全身小血管内皮细胞全身小血管内皮细胞 高热、皮疹高热、皮疹 神经系统症状神经系统症状 临床症状临床症状 第二次入血第二次入血 心血管系统症状心血管系统症状生长繁殖生长繁殖大量繁殖大量繁殖致病机制：致病机制：立克次体立克次体 虱、蚤、蜱、螨等叮咬虱、蚤、蜱、螨等叮

21、咬或其粪便污染伤口或其粪便污染伤口 局部淋巴组织局部淋巴组织或小血管内皮细胞或小血管内皮细胞 中增殖中增殖 立克次立克次体血症体血症 （第一次）（第一次） 经血流经血流 全身全身小血管内皮细胞小血管内皮细胞 大量增殖大量增殖 立立克次体血症（第二次）、毒血症和各克次体血症（第二次）、毒血症和各种临床症状。种临床症状。 螨虫螨虫蜱蜱吃饱的跳蚤吃饱的跳蚤人体虱人体虱致病性与免疫性致病性与免疫性所致疾病所致疾病 人畜共患性疾病人畜共患性疾病 流行性斑疹伤寒流行性斑疹伤寒 地方性斑疹伤寒地方性斑疹伤寒 恙虫病恙虫病 Q Q热热免疫性：免疫性：以细胞免疫为主，体液免疫为辅。以细胞免疫为主，体液免疫为辅。

22、多数可获得持久的免疫。多数可获得持久的免疫。三、微生物学诊断与防治三、微生物学诊断与防治病原体的分离培养与鉴定病原体的分离培养与鉴定血清学试验（外斐反应、血清学试验（外斐反应、ELISA）控制和消灭媒介昆虫；控制和消灭媒介昆虫；抗生素治疗（氯霉素、四环素，但禁用磺胺类药物）；抗生素治疗（氯霉素、四环素，但禁用磺胺类药物）；全细胞灭活疫苗全细胞灭活疫苗立克次体易引起实验室感染，注意无菌操作！立克次体易引起实验室感染，注意无菌操作！第二节第二节 主要致病性立克次体主要致病性立克次体一、普氏立克次体一、普氏立克次体 (R. prowazekii)流行性斑疹伤寒（epidemic typhus）虱型斑疹伤寒（louse-borne typhus）流行环节流行环节 传染源：传染源： 病人病人 储存宿主：储存宿主： 病人病人 传播媒介：传播媒介： 人虱人虱 传播方式：传播方式： 人人 人虱人虱 人人所致疾病所致疾病流行性斑疹伤寒临床表现临床表现: : 潜伏期潜伏期 （101014d14d） 高热、头痛、肌肉痛等高热、头痛、肌肉痛等 （4 47d7d） 皮疹皮疹 神经、心血管和其他器官病变神经、心血管和其他器官病变免疫力免疫力 病后免疫持久病后免疫持久 与地方性斑疹伤寒与地方性斑疹伤寒 有交叉免疫有交叉免疫二、斑疹伤寒立克次体二、斑疹伤寒立克次体 (R. typhi)莫氏立克次体莫氏立克次