杜守颖 中药新药立项与研究思路 - 北京828 - 副本

1、中药新药立项与中药新药立项与研究思路研究思路杜守颖杜守颖 教授教授北京中医药大学北京中医药大学2010.8.28一、一、CDE 成立以来的成立以来的中药注册回顾中药注册回顾CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾32005年年5月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法22002年年12月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法11999年年5月月1日日新药审批新药审批办法办法42007年年10月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾1新药：系指新药：系指我国未生产我国未生产过的药品过的药品第一类：第一类：1中药材的人工制成品。

2、中药材的人工制成品。2新发现的中药材及其制剂。新发现的中药材及其制剂。3中药材中提取的有效成分及其制剂。中药材中提取的有效成分及其制剂。4复方中提取的有效成分。复方中提取的有效成分。第二类：第二类：1中药注射剂。中药注射剂。2中药材新的药用部位及其制剂。中药材新的药用部位及其制剂。3中药材、天然药物中提取的有效部位及其制剂。中药材、天然药物中提取的有效部位及其制剂。4中药材以人工方法在动物体内的制取物及其制剂。中药材以人工方法在动物体内的制取物及其制剂。5复方中提取的有效部位群。复方中提取的有效部位群。第三类：第三类：1新的中药复方制剂。新的中药复方制剂。2以中药疗效为主的中药和化学药品的复方

3、制剂。以中药疗效为主的中药和化学药品的复方制剂。3从国外引种或引进养殖的习用进口药材及其制剂。从国外引种或引进养殖的习用进口药材及其制剂。第四类：第四类：1改变剂型或改变给药途径的制剂。改变剂型或改变给药途径的制剂。2国内异地引种或野生变家养的动植物药材。国内异地引种或野生变家养的动植物药材。第五类：增加新主治病证的药品。第五类：增加新主治病证的药品。CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾药品注册申请：包括新药申请、已有国家标药品注册申请：包括新药申请、已有国家标准药品的申请和进口药品申请及其补充申请准药品的申请和进口药品申请及其补充申请新药申请，是指未曾在中国境内上市销售新药申

4、请，是指未曾在中国境内上市销售的药品的注册申请。已上市药品改变剂型、的药品的注册申请。已上市药品改变剂型、改变给药途径的，按照新药管理。改变给药途径的，按照新药管理。 已有国家标准药品的申请，是指生产国家已有国家标准药品的申请，是指生产国家药品监督管理局已经颁布正式标准的药品药品监督管理局已经颁布正式标准的药品的注册申请。的注册申请。进口药品申请，是指在境外生产的药品在进口药品申请，是指在境外生产的药品在中国上市销售的注册申请。中国上市销售的注册申请。补充申请，是指新药申请、已有国家标准药补充申请，是指新药申请、已有国家标准药品的申请或者进口药品申请经批准后，改变、品的申请或者进口药品申请经批

5、准后，改变、增加或取消原批准事项或内容的注册申请。增加或取消原批准事项或内容的注册申请。新药技术转让、进口药品分包装、药品试行新药技术转让、进口药品分包装、药品试行标准转正，按补充申请办理。标准转正，按补充申请办理。CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾1、未在国内上市销售的从中药、天然药物中提取的有效成份、未在国内上市销售的从中药、天然药物中提取的有效成份及其制剂。及其制剂。2、未在国内上市销售的来源于植物、动物、矿物等药用物质、未在国内上市销售的来源于植物、动物、矿物等药用物质制成的制剂。制成的制剂。3、中药材的代用品。、中药材的代用品。4、未在国内上市销售的中药材新的药用部

6、位制成的制剂。、未在国内上市销售的中药材新的药用部位制成的制剂。5、未在国内上市销售的从中药、天然药物中提取的有效部位、未在国内上市销售的从中药、天然药物中提取的有效部位制成的制剂。制成的制剂。6、未在国内上市销售的由中药、天然药物制成的复方制剂。、未在国内上市销售的由中药、天然药物制成的复方制剂。7、未在国内上市销售的由中药、天然药物制成的注射剂未在国内上市销售的由中药、天然药物制成的注射剂。8、改变国内已上市销售药品给药途径的制剂。、改变国内已上市销售药品给药途径的制剂。9、改变国内已上市销售药品剂型的制剂。、改变国内已上市销售药品剂型的制剂。10、改变国内已上市销售药品工艺的制剂改变国内

7、已上市销售药品工艺的制剂。11、已有国家标准的中成药和天然药物制剂。、已有国家标准的中成药和天然药物制剂。CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾药品注册申请：包括新药申请、已有国家标准药品注册申请：包括新药申请、已有国家标准的药品申请、进口药品申请和补充申请。的药品申请、进口药品申请和补充申请。新药申请，是指未曾在中国境内上市销售的药新药申请，是指未曾在中国境内上市销售的药品的注册申请。已上市药品改变剂型、改变给品的注册申请。已上市药品改变剂型、改变给药途径、药途径、增加新适应症的增加新适应症的，按照新药申请管理，按照新药申请管理已有国家标准药品的申请，是指生产国家药品已有国家标

8、准药品的申请，是指生产国家药品监督管理局已经颁布正式标准的药品的注册申监督管理局已经颁布正式标准的药品的注册申请。请。进口药品申请，是指在境外生产的药品在中国进口药品申请，是指在境外生产的药品在中国上市销售的注册申请。上市销售的注册申请。补充申请，是指新药申请、已有国家标准的药补充申请，是指新药申请、已有国家标准的药品申请或者进口药品申请经批准后，改变、增品申请或者进口药品申请经批准后，改变、增加或取消原批准事项或者内容的注册申请。加或取消原批准事项或者内容的注册申请。32005年年5月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾32005年年5

9、月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法1、未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取、未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效成分及其制剂。的有效成分及其制剂。2、新发现的药材及其制剂。、新发现的药材及其制剂。3、新的中药材代用品。、新的中药材代用品。4、药材新的药用部位及其制剂。、药材新的药用部位及其制剂。5、未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取、未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效部位及其制剂。的有效部位及其制剂。6、未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂。、未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂。7、改变国内已上市销售中药、天然药

10、物给药途径的制剂。、改变国内已上市销售中药、天然药物给药途径的制剂。8、改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。、改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。9、已有国家标准的中药、天然药物。、已有国家标准的中药、天然药物。CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾新药申请，是指未曾在中国境内上市销售的药新药申请，是指未曾在中国境内上市销售的药品的注册申请。对已上市药品改变剂型、改变品的注册申请。对已上市药品改变剂型、改变给药途径、增加新适应症的药品注册按照新药给药途径、增加新适应症的药品注册按照新药申请的程序申报申请的程序申报仿制药申请，是指生产国家食品药品监督管理仿制药申请，

11、是指生产国家食品药品监督管理局已批准上市的已有国家标准的药品的注册申局已批准上市的已有国家标准的药品的注册申请请再注册申请，是指药品批准证明文件有效期满再注册申请，是指药品批准证明文件有效期满后申请人拟继续生产或者进口该药品的注册申后申请人拟继续生产或者进口该药品的注册申请请进口药品申请，是指境外生产的药品在中国境进口药品申请，是指境外生产的药品在中国境内上市销售的注册申请内上市销售的注册申请补充申请，是指新药申请、仿制药申请或者进补充申请，是指新药申请、仿制药申请或者进口药品申请经批准后，改变、增加或者取消原口药品申请经批准后，改变、增加或者取消原批准事项或者内容的注册申请。批准事项或者内容

12、的注册申请。42007年年10月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾1.未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效成份及其制剂。有效成份及其制剂。2.新发现的药材及其制剂。新发现的药材及其制剂。3.新的中药材代用品。新的中药材代用品。4.药材新的药用部位及其制剂。药材新的药用部位及其制剂。5.未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效部位及其制剂。有效部位及其制剂。6.未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂。未在国

13、内上市销售的中药、天然药物复方制剂。7.改变国内已上市销售中药、天然药物给药途径的制剂。改变国内已上市销售中药、天然药物给药途径的制剂。8.改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂。9.仿制药仿制药。42007年年10月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾对已上市药品改变剂型但不改变给药途径的注册申请，应对已上市药品改变剂型但不改变给药途径的注册申请，应当采用新技术以提高药品的质量和安全性，且与原剂型比当采用新技术以提高药品的质量和安全性，且与原剂型比较有明显的临床应用优势。较有明显的临床应用

14、优势。改变剂型但不改变给药途径，以及增加新适应症的注册申改变剂型但不改变给药途径，以及增加新适应症的注册申请，应当由具备生产条件的企业提出；靶向制剂、缓释、请，应当由具备生产条件的企业提出；靶向制剂、缓释、控释制剂等特殊剂型除外控释制剂等特殊剂型除外42007年年10月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法仿制药应当与被仿制药具有同样的活性成份、给药途径、仿制药应当与被仿制药具有同样的活性成份、给药途径、剂型、规格和相同的治疗作用。剂型、规格和相同的治疗作用。CDE 成立以来的中药注册回顾成立以来的中药注册回顾42007年年10月月1日日药品注册药品注册管理办法管理办法二、中药新药的立项二、

15、中药新药的立项思考思考中药新药立项选题的原则中药新药立项选题的原则v科学性v创新性v可行性v效益性中药新药立项选题的思路中药新药立项选题的思路v根据中医药学特点和优势选方 v根据国内外医药市场需求信息选方v根据世界性新药研究动态选方中药新药方源的选择中药新药方源的选择v中药新药研究的方源可以是多途径，多方式的，而且各具特色，大致可以归纳为以下几个方面：中药新药方源的选择中药新药方源的选择v1、传统古方v2、名医验方v3、医院制剂v4、法定处方v5、协定处方v6、从常见病、多发病、疑难病着手选题v8、从文献期刊上选题三、中药提取过程中的三、中药提取过程中的科学设计科学设计设计的重要性设计的重要性

16、v质量源于设计质量源于设计处方设计处方设计制备工艺设计制备工艺设计药效毒理研究设计药效毒理研究设计v中药制剂中药制剂 净原料净原料 提取（粉碎）提取（粉碎） 净化净化 浓缩浓缩 干燥干燥 制剂成型制剂成型v西药制剂西药制剂 原料原料 制剂成型制剂成型中西药制剂工艺比较中西药制剂工艺比较 中药有效成分提取是中药制剂的重中药有效成分提取是中药制剂的重要环节，是保证中药制剂安全有要环节，是保证中药制剂安全有效的物质基础效的物质基础提取工艺设计提取工艺设计三个层次三个层次v工艺路线：工艺路线要正确工艺路线：工艺路线要正确v工艺步骤：工艺步骤要明确、简单工艺步骤：工艺步骤要明确、简单v工艺参数：工艺参数

17、要优化工艺参数：工艺参数要优化提取工艺路线设计提取工艺路线设计提取工艺路线设计提取工艺路线设计三个设计依据三个设计依据根据药材的性状、根据药材的性状、有效成分的性质有效成分的性质根据临床的需要根据临床的需要根据剂型的需要根据剂型的需要三个注意三个注意工艺尽量简单工艺尽量简单对环境无污染对环境无污染对操作人员无毒害对操作人员无毒害设计前题设计前题v 三个明确（固定）三个明确（固定） 处方组成、剂量明处方组成、剂量明确确 处方的功能主治、处方的功能主治、君臣佐使明确君臣佐使明确 处方中药材基源、处方中药材基源、产地明确产地明确v 三掌握三掌握 掌握处方中药材所掌握处方中药材所含的化学成分种类含的化

18、学成分种类 掌握所含化学成分掌握所含化学成分的性质的性质 掌握化学成分的主掌握化学成分的主要药效与毒性要药效与毒性 有效成分相对明确：进行处方分析，确定有效成有效成分相对明确：进行处方分析，确定有效成分，根据有效成分的性质确定工艺路线分，根据有效成分的性质确定工艺路线 有效成分相对明确，但化学性质较复杂：以有效成分相对明确，但化学性质较复杂：以有效有效成分为指标成分为指标，进行不同工艺路线的比较，进行不同工艺路线的比较 有效成分复杂，但主要药效明确有效成分复杂，但主要药效明确: :根据主要药效根据主要药效报道确定工艺路线报道确定工艺路线 有效成分复杂，药效研究报道少有效成分复杂，药效研究报道少

19、: :设计不同工艺设计不同工艺路线进行路线进行药效药效研究比较，确定工艺路线。研究比较，确定工艺路线。提取工艺路线设计方法与评价指标提取工艺路线设计方法与评价指标有效成分相对明确：进行处方分析，确定有效有效成分相对明确：进行处方分析，确定有效成分，根据有效成分的性质确定工艺路线成分，根据有效成分的性质确定工艺路线提取工艺路线设计方法与评价指标提取工艺路线设计方法与评价指标花蕊石生牡蛎黄芪白芍益母草炒蒲黄茜草炒白术三七 加12倍量水煎加6倍乙醇回流二次，每次2h，滤过洗净，烘干，粉碎过300目筛煮2h，滤过滤液药材微粉加8倍量煎煮二次，每次滤液 芪芍止血颗粒芪芍止血颗粒有效成分相对明确，但化学性

20、质较复杂：以有效成分相对明确，但化学性质较复杂：以有有效成分为指标效成分为指标，进行不同工艺路线的比较，进行不同工艺路线的比较提取工艺路线设计方法与评价指标提取工艺路线设计方法与评价指标处方：制何首乌、三七、人参、生山楂、处方：制何首乌、三七、人参、生山楂、 荷叶、泽泻、女贞子荷叶、泽泻、女贞子制何首乌不同提取溶剂提取效果的比较制何首乌不同提取溶剂提取效果的比较提取所用溶剂提取所用溶剂二苯乙烯苷含量二苯乙烯苷含量（mg/gmg/g）出膏率出膏率(%)(%)水水22.9522.9524.4524.4542.142.142.6%42.6%70%70%醇醇24.8324.8324.8124.8121

21、.5821.5822.1122.11v 由结果可以看出，水提法与醇提法比较，二苯乙烯苷由结果可以看出，水提法与醇提法比较，二苯乙烯苷含量相差不大，考虑到生产成本，该部分采用水提，含量相差不大，考虑到生产成本，该部分采用水提，在此基础上，进一步优选提取工艺条件。在此基础上，进一步优选提取工艺条件。三七、人参不同提取溶剂提取效果的比较三七、人参不同提取溶剂提取效果的比较提取所用溶剂提取所用溶剂人参皂苷人参皂苷Rg1Rg1（mgmg）出膏率（出膏率（% %）水水363.55363.55396.47396.4739.9339.9339.1039.1070%70%醇醇579.16579.16587.78

22、587.7831.0031.0031.7831.78v 由结果可以看出，水提法与醇提法比较，醇提法人参皂由结果可以看出，水提法与醇提法比较，醇提法人参皂苷苷Rg1Rg1总量明显高于水提法，该部分采用醇提，在此基础总量明显高于水提法，该部分采用醇提，在此基础上，进一步优选提取工艺条件。上，进一步优选提取工艺条件。有效成分复杂，但主要药效明确有效成分复杂，但主要药效明确: :根据主要药根据主要药效效报道报道确定工艺路线确定工艺路线提取工艺路线设计方法与评价指标提取工艺路线设计方法与评价指标v处方：v伸筋草、凤仙透骨草、铁丝威灵仙、细辛、花椒、海桐皮、干姜等15gv 伸筋草：主要含有三萜类和生物碱类

23、成分，此外还有少量的蒽醌类成分和挥发油类。伸筋草煎剂对小鼠耳肿胀和棉球肉芽肿等急、慢性炎症均有很好抑制作用。表明伸筋草煎剂具有显著的抗炎、镇痛作用。根据有效成分性质和药效及药材质地，故选择水提其有效成分。v 干姜：主要成分为挥发性成分和辛辣成分。干姜醚提物及水提物可显著抑制醋酸引起小鼠扭体反应，延长热刺激痛反应潜伏期，对二甲苯引起小鼠耳壳肿胀、角叉菜胶引起大鼠足跖肿胀有抑制作用。选择双提法。有效成分复杂，药效研究报道少有效成分复杂，药效研究报道少: :设计不同工设计不同工艺路线进行艺路线进行药效研究比较药效研究比较，确定工艺路线。，确定工艺路线。提取工艺路线设计方法与评价指标提取工艺路线设计方

24、法与评价指标醒脑静口服制剂醒脑静口服制剂v 处方： 栀子、郁金、冰片、麝香不同提取工艺不同提取工艺v 处方一：栀子提取纯化后提取物、郁金挥发油、麝香、冰片。v 处方二：郁金挥发油、麝香、冰片；栀子水蒸气提取蒸馏液。v 处方三：栀子提取纯化后提取物、郁金挥发油、郁金醇提物，麝香、冰片。v 处方四：栀子水提离心后提取物、郁金挥发油、麝香、冰片。表表1 1 醒脑静注射液及醒脑静注射液及1-41-4号提取物对号提取物对MCATMCAT大鼠神经症状的影响大鼠神经症状的影响组别剂量例数6小时评分24小时评分模型组-123.500.503.250.72假手术组-120.000.000.000.00醒脑静注射

25、液组3ml/kg112.910.67*2.450.50*9ml/kg122.580.76*2.330.75*1号提取物组33.1mg/kg123.170.902.420.49*99.3mg/kg122.750.72*2.330.47*2号提取物组25.5mg/kg113.180.832.730.4576.5mg/kg122.830.80*2.750.723号提取物组38.7mg/kg122.750.72*2.500.65*116mg/kg122.920.64*2.580.49*4号提取物组58mg/kg112.910.792.730.62173.9mg/kg122.750.83*2.670.7

26、5注：与模型组相比较注：与模型组相比较* *P0.05P0.05，* * * P0.01P0.01表表2 2 醒脑静注射液及醒脑静注射液及1-41-4号提取物对号提取物对MCATMCAT大鼠脑梗塞范围的影响大鼠脑梗塞范围的影响组别剂量例数梗塞范围 (%)模型组-1215.154.73假手术组-120.000.00醒脑静注射液组3ml/kg119.974.82*9ml/kg1210.374.45*1号提取物组33.1mg/kg1210.423.03*99.3mg/kg129.813.20*2号提取物组25.5mg/kg119.672.61*76.5mg/kg1211.743.223号提取物组38

27、.7mg/kg128.133.08*116mg/kg1210.905.104号提取物组58mg/kg1110.213.71*173.9mg/kg1210.194.01*注：与模型组相比较注：与模型组相比较* *P0.05P0.05，* * * P0.01P0.01解酒剂解酒剂v 将中药解酒剂分别采用：v 95%醇提 Av 65%醇提 Bv 65%醇提后水煮 Cv 水煮 Dv 解酒剂B和解酒剂C显示出显著的解酒药效,小鼠醉倒率仅10%左右,醉倒前的耐受时间显著延长,醉倒后的维持时间明显缩短;而解酒剂D和解酒剂A仅表现出一定程度的解酒药效,醉倒率约60%,醉倒前耐受时间略有延长,醉倒状态维持时间有

28、一定程度的减少 酒前给药对小鼠血浆中乙醇含量的影响酒前给药对小鼠血浆中乙醇含量的影响 v 解酒剂B和解酒剂C这两组在降低鼠血中乙醇含量方面有显著性,而解酒剂D和解酒剂A这两组小鼠血醇含量仅略低于生理盐水对照组 酒前给药对小鼠血液中酒前给药对小鼠血液中SOD酶活的影响酶活的影响 v 解酒剂B和解酒剂C这两组对鼠血中SOD酶活的提高有显著性 提取工艺设计存在提取工艺设计存在主要问题主要问题工艺路线设计工艺路线设计目的不明确目的不明确*滴眼液滴眼液v处方：夏枯草、野菊花、千里光、贯叶金丝桃处方：夏枯草、野菊花、千里光、贯叶金丝桃v四味药四味药80%80%乙醇回流。浓缩至乙醇回流。浓缩至2g/ml2g

29、/ml。v石油醚萃取石油醚萃取v药液乙醚萃取，回收，残渣加水溶解，药液乙醚萃取，回收，残渣加水溶解，v乙醚萃取后的药液乙酸乙酯萃取，乙醚萃取后的药液乙酸乙酯萃取，v乙酸乙酯萃取后的药液过大孔吸附树脂乙酸乙酯萃取后的药液过大孔吸附树脂D101D101 清开灵注射液（合理设计）清开灵注射液（合理设计）v处方：板蓝根、金银花、栀子、水牛角、珍珠处方：板蓝根、金银花、栀子、水牛角、珍珠母、黄芩苷、胆酸、去氧胆酸母、黄芩苷、胆酸、去氧胆酸v 1、板蓝根加水煎煮两次，1h/次，过滤，合并滤液，滤液浓缩200ml，加乙醇至含醇量60%，冷藏，滤液回收乙醇，加水，冷藏备用。v 2、栀子加水煎煮两次，第一次1

30、h，第二次0 .5h，过滤，合并滤液，滤液浓缩至25 ml，加乙醇至含醇量60%，冷藏，滤过液回收乙醇，加水，冷藏备用。v 3、金银花加水煎煮两次，0 .5h/次，过滤,合并滤液，滤液浓缩至60 ml，加乙醇至75%，滤液调pH至8.0，冷藏，滤过液回收乙醇，再加乙醇至85%，冷藏，滤过液回收乙醇，加水，冷藏备用。 清开灵注射液清开灵注射液v 4、水牛角用氢氧化钡溶液、珍珠母用硫酸分别水解79个小时，滤液调pH至3.54.0，滤液加乙醇使含醇达60%，冷藏，滤过液回收乙醇，加水，冷藏备用。v 5、将栀子液、板蓝根液、珍珠母和水牛角水解混合液合并后，加到胆酸、猪去氧胆酸的75%乙醇溶液中，混匀，

31、加乙醇使含醇量达75%，调节pH至7.0，冷藏，滤过液回收乙醇，加水，冷藏备用。v 6、黄芩苷加注射用水溶解，调节pH至7.5，加入金银花提取液，混匀，与上述各备用液合并，混匀，并加注射用水至1000 ml。再经活性炭处理后，冷藏，灌封，灭菌，即得。提取工艺中使用提取工艺中使用有毒溶剂有毒溶剂*滴丸滴丸v处方：米稿、艾片、川芎、薤白处方：米稿、艾片、川芎、薤白v对川芎使用氯仿提取，回收至相对密度对川芎使用氯仿提取，回收至相对密度1.01-1.01-1.051.05提取工艺中提取工艺中使用易燃易使用易燃易爆溶剂爆溶剂*注射液注射液v处方：斑蝥、蟾酥等处方：斑蝥、蟾酥等v斑蝥用丙酮斑蝥用丙酮- -

32、盐酸精制，沉淀用乙醚盐酸精制，沉淀用乙醚- -乙醇洗涤乙醇洗涤v蟾酥乙醇回流，回收乙醇，乙醚溶解，滤过，蟾酥乙醇回流，回收乙醇，乙醚溶解，滤过，回收，蒸干回收，蒸干提取工艺参数的研究提取工艺参数的研究提取工艺参数的研究提取工艺参数的研究v工艺参数的优化方法工艺参数的优化方法单因素比较法单因素比较法正交实验法正交实验法均匀实验法（混料均匀设计法）均匀实验法（混料均匀设计法）响应面法响应面法1 1单因素轮换设计单因素轮换设计v简单、易行，在很多情况下可以得到比简单、易行，在很多情况下可以得到比较满意的结果。较满意的结果。 在一实际体系中，有许多影响因素在一实际体系中，有许多影响因素( (常称常称之

33、为因子之为因子) )，习惯的作法是每次改变一种，习惯的作法是每次改变一种因子，而其他因子固定不变，以寻找这因子，而其他因子固定不变，以寻找这种因子对于体系响应的最适范围。种因子对于体系响应的最适范围。单因素比较法单因素比较法苍术挥发油提取比较苍术挥发油提取比较h 加水量加水量 （倍）（倍） 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20饮饮片片 4 0.2 0.4 0.55 0.7 0.9 1.1 1.3 1.4 1.5 1.5 6 0.2 0.35 0.5 0.7 0.9 1.1 1.3 1.4 1.5 1.5 8 0.1 0.2 0.3 0.5 0.7 0.9 1.1 1.2 1.2

34、1.2粗粗粉粉 4 1.0 1.3 1.6 2.0 2.3 2.7 3.2 3.7 3.7 3.7 6 0.9 1.3 1.6 1.8 2.1 2.6 3.0 3.2 3.6 3.6 8 0.5 1.0 1.3 1.6 1.8 2.1 2.7 2.7 2.7 2.7v存在的问题存在的问题 同时改变一个以上因素同时改变一个以上因素2 2、正交试验设计、正交试验设计v 正交试验设计是指用正交表安排试验的方法。其理论基础是拉丁方理论和群论，可以用来安排多因素试验，试验次数对各因素的各水平的全排列组合来说是大大减少了，是一种优良的试验设计方法。 v 用正交设计表安排试验，相对于全面试验而言，它只是部分

35、试验，但对其中任何2因素来说，它又是具有相同重复次数的全面试验，可用比全面试验法少得多的试验，获得能基本上反映全面情况的试验资料，克服了以往惯用的单因素轮换试验法不能全面考察因素的影响与因素之间交互效应的缺点。 v单因素轮换法获得的最佳条件只是各因素的一种特定组合，而正交设计获得的最佳条件常常是一个优化区，可在各因素间进行多种可能的最佳搭配。特点均匀分散，整齐可比特点均匀分散，整齐可比 正交试验法正交试验法制何首乌等正交试验因素水平表制何首乌等正交试验因素水平表水水 平平因因 素素A AB BC C提取时间（提取时间（h h） 溶剂用量（倍）溶剂用量（倍）提取次数提取次数（次）（次）1 11

36、1 6 6 1 1 2 21.51.58 8 2 23 32 2 10103 3 按按L L9 9(3(34 4) )正交表设计的结果及数据分析正交表设计的结果及数据分析列号列号A AB BC CD D（空白）（空白） 二苯乙烯苷含量（二苯乙烯苷含量（mg/gmg/g）出膏率（出膏率（% %）1 11 11 11 11 112.4492 12.4492 12.9582 12.9582 20.45 20.45 20.72 20.72 2 21 12 22 22 216.2721 16.2721 17.0319 17.0319 34.03 34.03 33.76 33.76 3 31 13 33

37、33 320.6439 20.6439 21.4160 21.4160 47.37 47.37 47.37 47.37 4 42 21 12 23 321.7354 21.7354 19.9372 19.9372 35.02 35.02 33.06 33.06 5 52 22 23 31 121.9627 21.9627 22.4540 22.4540 42.88 42.88 42.82 42.82 6 62 23 31 12 215.7230 15.7230 16.5265 16.5265 24.49 24.49 25.50 25.50 7 73 31 13 32 221.8145 21.8

38、145 21.3100 21.3100 44.91 44.91 43.33 43.33 8 83 32 21 13 315.3126 15.3126 15.0407 15.0407 25.83 25.83 26.09 26.09 9 93 33 32 21 121.2839 21.2839 21.4179 21.4179 41.15 41.15 42.11 42.11 j j100.7713100.7713110.2045110.204588.010288.0102112.5259112.5259j j118.3388118.3388108.074108.074117.6784117.6784

39、108.6780108.6780j j116.1796116.1796117.0112117.0112129.6011129.6011114.0858114.0858R Rj j17.567517.56758.93728.937241.590941.59095.40785.4078SSSSj j30.59427.2635152.89752.5824方差分析表方差分析表方差来源方差来源离均差平方和离均差平方和自由度自由度 方差方差 F F值值 显著性显著性溶剂用量溶剂用量A A30.5942215.297080846.67.0001提取时间提取时间B B7.263523.631770511.08

40、0.0037提取次数提取次数C C152.89752 276.4487730233.26.0001空空 白白2.58242 21.29122013.940.0590误误 差差2.94979 90.3277462水提部分工艺验证水提部分工艺验证组号组号二苯乙烯苷含量二苯乙烯苷含量（mg/gmg/g）出膏率出膏率(%)(%)1 1号号28.6528.6546.8846.882 2号号28.2528.2546.2346.23妇淋颗粒提取工艺的研究（存在问题）妇淋颗粒提取工艺的研究（存在问题）表表1 1 因素水平表因素水平表 因素因素水平水平A A水量水量/ /倍倍B B时间时间/h/hC C提取次提

41、取次数数/ /次次D D误差误差1 16 61 11 12 28 82 22 23 310103 33 3表表2 2 正交试验安排与结果正交试验安排与结果因素序号 A水量/倍B时间/hC提取/次数D误差芍药苷/峰面积出膏量/g11（6）1（1）1（1）72479815.08 21（6）2（2）2（2）89360524.23 31（6）3（3）3（3）82587028.05 42（8）1（1）2（2）92327220.25 52（8）2（2）3（3）80411526.51 62（8）3（3）1（1）66504819.29 73（10）1（1）3（3）83077027.25 83（10）2（2）1

42、（1）76602419.54 93（10）3（3）2（2）83999924.39 k1814757.67826280.00718623.33Y=7273501.00 最优C2 B1A1k2797478.33821248.00885625.33Y2=5929814136719.00 k3812264.33776972.33820251.67Y=808166.78 R17279.3349307.67167002.00表表3 3 方差分析表方差分析表( (芍药苷芍药苷) )变异来源离差平方和自由度方差F值PA523417867.562.00261708933.780.13B4416901674.89

43、2.002208450837.441.06C42491702433.562.0021245851216.7810.16*误差4180248409.562.002090124204.78F F0.10.1（2 2，2 2）9.0 9.0 ，F F0.050.05（2 2，2 2）19.0019.00，F F0.010.01（2 2，2 2）99.99.0 0根据以上结果，结合生产实际，确定煎煮工艺为：加水煎煮根据以上结果，结合生产实际，确定煎煮工艺为：加水煎煮3 3次，分别为次，分别为1010倍量、倍量、2 2小时，小时，8 8倍量、倍量、1 1小时，小时，8 8倍量、倍量、1 1小时。小时。与

44、正交试验没有关系与正交试验没有关系3、均匀试验设计均匀试验设计v 均匀试验设计就是只考虑试验点在试验范围内均匀分布的一种试验设计方法。它适用于多因素、多水平的试验设计场合。试验次数等于因素的水平数，是大幅度减少试验次数的一种优良的试验设计方法。 v 在试验设计中，不考虑综合可比性的要求，完全满足均匀性的要求，让试验点在试验范围内充分地均匀分散，既可以大大减少试验点，也能得到试验目标要求的试验结果。 均匀分散均匀分散用均匀设计优化黄芪皂苷提取工艺用均匀设计优化黄芪皂苷提取工艺v 利用SPSS 810 统计软件进行逐步回归计算,求得回归方程为:起决定作用起决定作用, ,提取次数越多黄芪甲苷的提取率越高提取次数越多黄芪甲苷的提取率越高,