分子生物学复习题第八章重组dna技术

1、第八章重组 DNA 技术单选i 下列哪项不属于生物工程A. PCR 技术 B. 重组 DNA 技术 C.蛋白质工程 D.酶工程 E. 细胞工程2、重组 DNA 技术中所用的限制酶是哪类A.I型限制酶B.n型限制酶C.川型限制酶 D.型限制酶 E.V型限制酶3、 可以利用蓝白筛选法筛选用pUC 转化的重组 DNA 克隆，是因为 pUC 包含以下哪种元件A.复制起点B.ampD. 多克隆位点 MCS E.调节基因lacl4、关于入噬菌体，以下叙述错误的是A.基因组 DNA 的部分序列并非溶原性生长所必需B.基因组 DNA 感染大肠杆菌后形成闭环结构C.在溶原性生长时进行滚环复制D.复制时形成多联体

2、结构E.其转化的细菌经过培养形成噬菌斑5、pBR322 质粒包含两个抗性基因：氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，据此可以利用 哪种方法筛选重组 DNA 克隆A.a互补 B. PCR C. 插入失活 D.6、制备重组 DNA 首先要制备目的 DNA 要保证目的 的制备方法不包括A.PCR 扩增B.从组织细胞分离基因组C.化学合成D.逆转录合成 cDNA E.限制酶截取7、第一种应用于临床的重组蛋白是A.基因工程疫苗B.基因工程抗体C.激素D.生长因子E. 细胞因子8、 在重组 DNA 技术中，目的 DNA 与载体在体外连接的过程称为DNA 的体外重组。体外重组的方法不包括：A.加人工接头连接B

3、.加同聚物尾连接 C.互补黏端连接 D.连接 E.平移连接9、重组 DNA 的宿主细胞有原核细胞和真核细胞。用于制备基因文库的宿主细胞主要是A.哺乳动物细胞B.大肠杆菌 C. 酵母 D.枯草杆菌 E.昆虫细胞10、 哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞A.CaCl2法 B.病毒感染法C.脂质体载体法D.显微注射法E.穿刺法11、 蓝白筛选属于筛选重组DNA 克隆方法的哪种A. PCR 分析B. 插入失活分析 C.核酸分子杂交分析 D.酶切分析 E.免疫分析12、 重组 DNA 技术领域常用的质粒 DNA 是A. T 病毒基因组 DNA 的一部分B.细菌染色体外的独立遗传单位C. 细菌染色体 D

4、NA 的一部分D. 真核细胞染色体外的独立遗传单位E.真核细胞染色体 DNA 的一部分13、某限制性内切核酸酶切割5GGGGGIGAATTCG- 3序列后产生C. 5 及 3突出末端选择核酸分子杂交E.蓝白筛选DNA 的量和纯度能满足重组要求。 常用DNAA. 5 突出末端B. 5或 3 突出末端D. 3 突出末端E. 平末端14、“克隆”某一目的 DNA 的过程不包括A.重组 DNA 分子导人受体细胞B.外源基因与载体的拼接C.基因载体的选择与构建D.筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞E.表达目的基因编码的蛋白质15、关于基因文库及其构建，以下叙述错误的是A.基因文库包括基因组文库和cDNA

5、 文库B.构建基因组文库常用的克隆载体是入噬菌体、粘粒和酵母人工染色体系统C.目前构建的 cDNA 文库可以包含一种生物基因组所含的全部编码序列D.真核生物 cDNA 文库中的目的基因可以在原核细胞内表达活性产物E.构建 cDNA 文库要用到逆转录酶 多选：1、用目的 DNA 和质粒制备重组 DNA 下列哪些工具酶是必需的A. DNA 聚合酶 B. 核酸酶 C.连接酶 D.限制酶 E.修饰酶2、影响限制酶切割效率的因素有那些A. 底物纯度 B. 底物甲基化程度 C. 底物结构 D. 反应温度 E. 反应体系组成3、 哪些因素会降低限制酶的特异性A.高浓度限制酶B.高浓度甘油C.低离子强度D.用

6、M6+取代 Mg+E.高 pH 值4、 限制酶的应用非常广泛，包括:A. DNA 重组 B.质粒改造 C. DNA 杂交 D.探针制备 E.基因定位5、关于重组 DNA 技术使用的 DNA 连接酶A.用以将目的 DNA 与载体共价连接成重组 DNAB.包括大肠杆菌 DNA 连接酶和 T4 DNA 连接酶C.大肠杆菌 DNA 连接酶需要 NAD 而 T4 DNA 连接酶需要 ATPD.大肠杆菌 DNA 连接酶用于连接切口或互补黏端E.T4 DNA 连接酶用于连接互补黏端或平端6、重组 DNA 技术常用的 DNA 聚合酶有A. DNA 聚 合酶IB. Kle now 片段 C. Taq DNA 聚

7、合酶D. 逆转录酶 E. T4 DNA 聚合酶7、载体分为克隆载体和表达载体两类。克隆载体含有以下基本元件A.复制起点 B. 克隆位点 C. 选择标记 D.启动子E.核糖体结合位点8、表达载体的哪些元件是克隆载体不需要的A.复制起点 B. 克隆位点 C. 选择标记 D.启动子E.核糖体结合位点9、原核细胞表达载体的表达元件有A.核糖体结合位点 B. 加尾信号 C. 启动子 D.增强子E.转录终止信号10、真核细胞表达载体的哪些表达元件是原核表达载体没有的A.核糖体结合位点B.加尾信号C.启动子D.增强子E.转录终止信号11、以下哪些是真核载体A.质粒B.噬菌体 C.酵母人工染色体D.逆转录病毒

8、E.腺病毒12、以下哪些DNA 分子可以通过化学合成法制备A.Cd naB. PCR 引物 C.寡核苷酸探针D.较小的基因E.人工接头13、将外源 1 DNA 导入原核细胞，常用A.CaCl2 法B.电穿孔法C.病毒感染法D.脂质体载体法E.显微注射法14、以下哪些是真核生物基因在原核细胞内表达存在的问题A.真核生物基因的启动子不能被原核生物的RNA 聚合酶识别B.真核生物基因含有内含子，原核细胞没有相应的剪接系统C.真核生物 mRNA 羽译起始位点不能被原核生物核糖体识别D.真核生物基因的表达产物往往需要后加工，原核细胞没有相应的加工系统E.真核生物基因表达的蛋白质容易被原核细胞的蛋白酶降解

9、。15、基因工程药物包括A.激素 B. 细胞因子C.生长因子D.基因工程疫苗E.基因工程抗体二、填空1.DNA 克隆是从染色体中分离特定DNA 片段，与一个 DNA 载体连接成 _ ，将其导入宿主细胞进行复制，并随细胞分裂而扩增，最终得到该特定DNA 片段的_。2.重组 DNA 技术的核心内容之一是 DNA 重组，即将 _ 与_连接成重组 DNA3.限制酶是一种内切核酸酶，由细菌产生，能识别双链 DNA_位点，并水解该位点内部或附近的_键。4.DNA 重组需要连接酶，常用的 DNA 连接酶包括DNA 连接酶和 DNA 连接酶。5.载体的化学本质是 DNA 载体不但能与 _重组，能导入 _，还能

10、利用自身的调 控系统，使目的 DNA 在宿主细胞内复制或表达。6.载体分为_载体和_载体两类。7.克隆载体含有以下基本元件：复制起点、 _ 和。8.常用的载体有以原核细胞为宿主的载体和噬菌体载体，以真核细胞为宿主的载体。9.质粒是游离于_之外、能_的闭环双链 DNA 根据与宿主的相互关系分为寄生型 质粒和共生型质粒。10.pBR322 质粒包含两个抗性基因：_抗性基因和_抗性基因。11.入噬菌体感染细菌后可以进行 _生长和_ 生长。12.入噬菌体的 DNA 为线性双链分子，在分子两端各有12nt 的，是天然黏端，称为位点。13. 制备目的 DNA 就是要保证目的 DNA 的量和纯度能满足重组要

11、求。 常用的制备方法有 分离纯化、和化学合成。14.化学合成法主要用于合成 _、_、人工接头和较小的基因。15.在重组 DNA 技术中，与载体在体外连接的过程称为DNA 的体外重组。体外重组的产物称为。16.体外连接的方法有平端连接、端连接、加同聚物尾连接、 _ 连接。17.外源 DNA 导入宿主细胞，使其获得新的遗传表型，称为其中通过噬菌体或病毒完成的转化称为转导或 _，外源 DNA 转化培养的真核细胞称为转染。18.将外源 DNA 导入原核细胞，常用 _法、_ 法和病毒感染法。19.将大肠杆菌悬浮在 CaCb 溶液中，并置于低温（05C）环境下一段时间，Cf 使的结构发生变化，增加，外源

12、DNA 可以进入，这种细胞称为感受态细胞。20. 许多载体的选择标记内都有，插入目的 DNA 将导致该选择标记失活，称为_。21. 与克隆载体相比，表达载体应具备表达元件， 主要包括 _、_和转录终止信号等。22. 基因文库是已经阐明的各物种基因的总称，包括 _文库和_文库。23. 基因组文库是应用重组DNA 技术构建的一个_，它包含了一种生物 _的全部 DNA序列。、解释1.重组 DNA 技术2.克隆3.DNA 克 隆4.宿主细胞5.限制酶6.载体7.克隆载体8.表达载体9.DNA 重 组10.转化11.感染12.转染13.感受态细胞14.基因组文库15.cDNA 文 库四、问答1、 DNA 克隆的基本步骤2、 简述克隆载体及其基本元件3、 简述表达载体及其基本元件4、 简述 pBR322 质粒载体及其基本元件5、 简述 pUC 质粒载体及其基本元件6、 将外源 DNA 导入原核细胞的常用方法7、 真核生物基因在原核细胞内表达存在那些问题8、 用原核细胞